{"product_id":"neb-b8533s","title":"نيو إنجلاند بيولابس، B8533S، المخفف B (مع الألبومين المؤتلف)","description":"\u003cb\u003eالفئات ذات الصلة:\u003c\/b\u003e محاليل ومخففات إنزيمات القطع المحددة. \u003cb\u003eالتطبيقات:\u003c\/b\u003e هضم إنزيمات القطع. \u003cb\u003eالمواصفات:\u003c\/b\u003e \u003cb\u003eمكونات المحلول المنظم 1X:\u003c\/b\u003e 300 ملي مولار كلوريد الصوديوم، 10 ملي مولار Tris-HCl، 1 ملي مولار DTT، 0.1 ملي مولار EDTA، 500 ميكروغرام\/مل ألبومين مُعاد التركيب، 50% جلسرين، درجة الحموضة 7.4 عند 25 درجة مئوية. \u003cb\u003eالأسئلة الشائعة\u003c\/b\u003e : س: ما هي مدة صلاحية الإنزيم المخفف؟ ج: لم يتم اختبار ثبات كل إنزيم مخفف إلى أقل من تركيز البيع. ستبقى العديد من الإنزيمات نشطة لفترات طويلة عند تخزينها مخففة عند -20 درجة مئوية. استخدم ركيزة تحكم لاختبار التخفيفات المخزنة. س: لماذا لا يقطع إنزيم القطع الخاص بي الحمض النووي؟ ج: قد يكون هناك عدة أسباب مختلفة لعدم قطع إنزيم القطع الخاص بك للحمض النووي كما هو موضح في هذا الفيديو. يجب أن يكون تحضير الحمض النووي المراد قطعه خاليًا من الملوثات مثل الفينول، والكلوروفورم، والكحول، وEDTA، والمنظفات، أو الأملاح الزائدة، حيث يمكن أن تتداخل جميعها مع نشاط إنزيمات القطع. يمكن استخدام مجموعات تنقية الأحماض النووية من مونارك لتنقية عينة الحمض النووي قبل الهضم. إذا واجهت صعوبة في قطع ركيزة الحمض النووي، نوصي بإجراء تفاعل التحكم التالي: حضن الحمض النووي التجريبي في محلول التفاعل بدون إنزيم القطع (يشير تحلل الحمض النووي إلى وجود تلوث في تحضير الحمض النووي أو محلول التفاعل) مع الحمض النووي الضابط (حمض نووي يحتوي على مواقع متعددة معروفة للإنزيم، مثل حمض نووي لامدا) مع إنزيم القطع لتقييم اكتمال التفاعل بدقة أكبر. إذا تم قطع الحمض النووي الضابط بينما قاوم الحمض النووي التجريبي القطع، يمكن مزج الحمضين النوويين لتحديد ما إذا كان هناك مثبط موجود في العينة التجريبية. في حال وجود مثبط (غالبًا ما يكون ملحًا، أو EDTA، أو فينول)، فلن يتم قطع الحمض النووي الضابط بعد المزج. تتوفر أيضًا مساعدة إضافية لحل المشكلات. يُعدّ مثيلة الحمض النووي عنصرًا هامًا في عملية الهضم بالإنزيمات القاطعة. في حال الاشتباه بتثبيط المثيلة، يُرجى مراجعة الرابط الذي يشرح مثيلة dam وdcm وCpG. س: لماذا أرى حزمًا إضافية من الحمض النووي على الهلام بعد الهضم بالإنزيمات القاطعة؟ ج: قد تظهر حزم إضافية في عملية الهضم لعدة أسباب. لمزيد من التفاصيل حول هذا الموضوع، يُرجى مشاهدة الفيديو أعلاه. عادةً ما تنتج حزم الحمض النووي غير المستهدفة إما عن هضم جزئي أو عن نشاط إنزيم Star. عليك مقارنة عملية الهضم بنمط حزم الحمض النووي المتوقع. إذا كانت الحزم في كلا المسارين مشابهة للنمط المتوقع، وكانت الحزم الإضافية محصورة في الفراغات بين الحزمتين العلوية والسفلية للنمط المتوقع، فإن عملية الهضم غير مكتملة (جزئية). في هذه الحالة، قد تحتاج إلى تنقية الحمض النووي لإزالة أي شوائب، أو استخدام كمية أكبر من الإنزيم، أو زيادة وقت الحضانة لضمان اكتمال الهضم. إذا ظهرت حزم إضافية أسفل أدنى حزمة في النمط المتوقع، وتم قطع الحزم المتوقعة، فمن المرجح أن عملية الهضم تُظهر نشاطًا غير نمطي. ظروف التفاعل لديك تدفع الإنزيم إلى قطع تسلسلات DNA إضافية غير نمطية. يجب عليك تكرار عملية الهضم في ظل واحد أو أكثر من ظروف التفاعل المعدلة التالية: ∙ تقليل كمية الإنزيم ∙ تقليل وقت الحضانة ∙ زيادة حجم التفاعل أو ∙ استخدام إنزيم تقييد NEB عالي الدقة (HFTM) مناسب. س: كم عدد النيوكليوتيدات التي يجب إضافتها بجوار موقع التعرف على إنزيم التقييد للحصول على قطع فعال؟ ج: بروتوكول هضم إنزيم التقييد: القطع بالقرب من نهاية DNA","brand":"New England Biolabs","offers":[{"title":"Default Title","offer_id":46835523780777,"sku":"B8533S","price":0.99,"currency_code":"USD","in_stock":true}],"url":"https:\/\/iright.com\/ar\/products\/neb-b8533s","provider":"Iright","version":"1.0","type":"link"}