{"product_id":"neb-e3340l","title":"مجموعة تحضير مكتبة الحمض النووي NEBNext ULTRAEXPRESS® FS من شركة نيو إنجلاند بيولابس، E3340L","description":"\u003cb\u003eفئات ذات صلة\u003c\/b\u003e بـ NEBNext UltraExpress: تحضير مكتبة الحمض النووي لتقنية Illumina، تحضير مكتبة الحمض النووي لتقنية Illumina، \u003cb\u003eالأسئلة الشائعة\u003c\/b\u003e حول تحضير مكتبة التسلسل من الجيل التالي: س: عند تحضير العينات باستخدام مجموعة تحضير مكتبة الحمض النووي NEBNext UltraExpress® FS، هل يمكن أن يكون الحمض النووي المدخل في محاليل تحتوي على EDTA؟ ج: نعم، نوصي بأن يكون الحمض النووي في محلول TE بتركيز 1X أو محلول TE منخفض EDTA. يمكن أيضًا أن يكون الحمض النووي في محلول Tris بتركيز 10 ملي مولار ودرجة حموضة 7.0-8.0 أو في الماء. س: ماذا لو رأيت راسبًا في محلول التفاعل NEBNext UltraExpress® FS؟ ج: من الشائع رؤية راسب أبيض في محلول NEBNext UltraExpress® FS. في هذه الحالة، اترك الخليط حتى يصل إلى درجة حرارة الغرفة، ثم استخدم الماصة عدة مرات لإعادة تعليق الراسب، ثم قم برجّ الخليط سريعًا باستخدام جهاز الخلط الدوامي. س: هل أحتاج فعلاً إلى خلط مزيج إنزيم NEBNext UltraExpress® FS باستخدام جهاز الخلط الدوامي؟ ج: نعم، قد يؤدي عدم خلط مزيج إنزيم NEBNext UltraExpress FS باستخدام جهاز الخلط الدوامي إلى نتائج غير متناسقة. س: تفاعل الربط لزج للغاية. ماذا سيحدث إذا لم يتم خلطه جيدًا؟ ج: إذا لم يتم خلط تفاعل الربط جيدًا، فقد ينتج عنه كمية قليلة من المكتبة. لضمان الخلط الجيد، يمكن سحب المحلول وإعادة وضعه في المحلول باستخدام الماصة 10 مرات، أو خلطه باستخدام جهاز الخلط الدوامي لمدة 3 ثوانٍ. س: ما هي كمية المادة الأولية التي يجب استخدامها عند تحضير المكتبات باستخدام مجموعة تحضير مكتبات الحمض النووي NEBNext UltraExpress® FS؟ ج: هذه المجموعة مناسبة لكمية تتراوح بين 10 و200 نانوغرام من الحمض النووي السليم. بالنسبة لكميات الإدخال خارج هذا النطاق، سيلزم إجراء تعديلات من قِبل المستخدم النهائي، وقد تتأثر جودة المكتبة. س: ما هي أنواع العينات التي يمكنني استخدامها مع مجموعة تحضير مكتبات الحمض النووي NEBNext UltraExpress® FS؟ ج: تشمل أنواع العينات المتوافقة الحمض النووي الجينومي البشري والميكروبي والنباتي عالي الجودة، بالإضافة إلى الحمض النووي البلازميدي والمضخم الذي يزيد حجمه عن 1 كيلوبايت. لا نوصي باستخدام هذه المجموعة مع الحمض النووي المستخلص من الأنسجة المثبتة بالفورمالين والمضمنة في البارافين (FFPE). بالنسبة لهذا النوع من الحمض النووي، نوصي باستخدام مجموعة تحضير مكتبة الحمض النووي NEBNext Ultrashear™ FFPE (NEB #E6655). س: هل يمكنني استخدام مجموعة تحضير مكتبة الحمض النووي NEBNext UltraExpress® FS لتحويل البيسلفيت وسير عمل EM-seq™؟ ج: لا، مجموعة NEBNext UltraExpress® FS غير متوافقة مع NEBNext Enzymatic Methyl-seq (EM-seq؛ NEB #E7120) أو سير عمل تحويل البيسلفيت. نوصي باستخدام NEBNext UltraShear™ (NEB #M7634). س: هل من الممكن استخدام الحمض النووي المقطع كمادة إدخال مع مجموعة تحضير مكتبة الحمض النووي NEBNext UltraExpress® FS؟ ج: بالنسبة لعينات الحمض النووي المقطّع، نوصي باستخدام مجموعة تحضير مكتبة الحمض النووي NEBNext UltraExpress® (NEB #E3325) أو مجموعة تحضير مكتبة الحمض النووي NEBNext® Ultra™ II (NEB #E7645). تستوعب مجموعة تحضير مكتبة الحمض النووي NEBNext UltraExpress® (NEB #E3325) كميات تتراوح بين 10 و200 نانوغرام من الحمض النووي المقطّع ميكانيكيًا، وتتميز بآلية تحضير مشابهة جدًا لمجموعة NEBNext UltraExpress® FS DNA. أما مجموعة تحضير مكتبة الحمض النووي NEBNext® Ultra™ II (NEB #E7645) فتستوعب كميات تتراوح بين 500 بيكوغرام و1 ميكروغرام، مع وقت تحضير أطول وظروف مُخصصة بناءً على كمية الحمض النووي المُدخلة. س: ما الفرق بين مجموعة تحضير مكتبة الحمض النووي NEBNext UltraExpress® FS ومجموعة تحضير مكتبة الحمض النووي NEBNext® Ultra™ II FS؟ وكيف أختار المجموعة المناسبة؟ ج: تم تحسين مجموعة NEBNext UltraExpress® FS لتحضير مكتبات الحمض النووي لتبسيط عملية التحضير، حيث تُستخدم تركيز واحد للمُهايئ وعدد دورات تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) للعينات ضمن نطاق الإدخال الموصى به (10 نانوغرام - 200 نانوغرام من الحمض النووي السليم). أما مجموعة NEBNext® Ultra™ II FS لتحضير مكتبات الحمض النووي، فقد خضعت لتحسينات مكثفة لإنتاج كميات أكبر من المكتبات بأعلى جودة. تتميز مجموعة Ultra II FS بظروف أكثر تخصيصًا بناءً على كمية الحمض النووي المُدخلة، وخطوات وتنظيفات أكثر، ووقت عمل أطول، ونطاق إدخال أوسع (0.1 نانوغرام - 500 نانوغرام من الحمض النووي السليم). تُنتج كلتا المجموعتين كميات كبيرة من المكتبات عالية الجودة، ولكننا نوصي باختيار NEBNext UltraExpress® FS DNA للعينات ضمن نطاق كمية الإدخال المذكور، حيث تُعد السرعة أمرًا بالغ الأهمية. كما نوصي باختيار NEBNext Ultra II FS DNA للعينات الأكثر تعقيدًا وقيمة (مثل العينات منخفضة الجودة أو ذات كمية الإدخال المنخفضة). س: هل تحتوي مجموعات NEBNext UltraExpress® لتحضير المكتبات على خرز؟ ج: لا، نوصي باستخدام مجموعة كواشف SPRIselect® (Beckman Coulter, Inc. #B23317) أو خرز AMPure® XP (Beckman Coulter, Inc. #A63881). س: ماذا أفعل إذا رأيت ثنائي محول في مكتبات NEBNext UltraExpress® الخاصة بي؟ ج: صُممت خطوة التنظيف المرحلي بعد تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) خصيصًا لتقليل ثنائي المحول؛ يُرجى اتباع التعليمات الخاصة بهذه الخطوة كما هي مكتوبة قبل تجربة أي توصيات إضافية. إذا كنت لا تزال ترى كميات صغيرة من ثنائي المحول في العينات، فنوصي بتنظيف باستخدام خرز SPRI بتركيز 0.9X بعد تجميع المكتبات أو زيادة تحسين كمية المحول. س: هل يمكن استخدام هذه المجموعة مع محولات وبادئات من موردين آخرين غير NEB؟ ج: نعم، من المفترض أن يكون من الممكن استخدام محولات وبادئات من موردين آخرين غير NEB مع مجموعة NEBNext® هذه. يجب أن يكون المحول من نوع T overbling، وقد يكون مردود المكتبة النهائي أقل قليلاً من استخدام محولات NEBNext لتقنية Illumina®. س: هل يمكنني استخدام مجموعة NEBNext UltraExpress® FS DNA Library Prep Kit لتحضير المكتبات للتسلسل على أجهزة Ion Torrent؟ ج: لا، المحولات المطلوبة لتسلسل Ion Torrent لها نهايات غير لاصقة وليست ذات نهايات 5´-T overbling، وهي غير متوافقة مع سير عمل UltraExpress FS DNA. س: هل يحتوي كاشف التجزئة في مجموعات NEBNext UltraExpress® FS DNA على إنزيم NEBNext dsDNA Fragmentase®؟ ج: لا، تحتوي منتجات NEBNext UltraExpress® FS (نظام التجزئة) DNA على مزيج فريد من الإنزيمات التي تجزئ الحمض النووي، وتصلح نهاياته، وتضيف ذيل dA في أنبوب واحد. إنزيم Fragmentase غير موجود في مزيج إنزيمات FS. س: هل توفر مجموعة تحضير مكتبة الحمض النووي NEBNext UltraExpress® FS كميات كافية من المكتبة لإثراء الهدف؟ ج: قد يتطلب الأمر ظروف دورات تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) مخصصة للمكتبة بناءً على كميات المدخلات لإنتاج كميات مكتبة تبلغ حوالي 1 ميكروغرام؛ راجع ملاحق دليل مجموعة تحضير مكتبة الحمض النووي NEBNext UltraExpress® FS للاطلاع على ظروف دورات تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) الموصى بها.","brand":"New England Biolabs","offers":[{"title":"Default Title","offer_id":46835503890601,"sku":"E3340L","price":0.99,"currency_code":"USD","in_stock":true}],"url":"https:\/\/iright.com\/ar\/products\/neb-e3340l","provider":"Iright","version":"1.0","type":"link"}