{"product_id":"neb-m0259s","title":"نيو إنجلاند بيولابس، M0259S، بوليميراز الحمض النووي الخارجي Deep Vent®","description":"\u003cb\u003eالفئات ذات الصلة\u003c\/b\u003e \u003cb\u003eتطبيقات\u003c\/b\u003e بوليميرازات تفاعل البوليميراز المتسلسل الأخرى تفاعل البوليميراز المتسلسل الروتيني، \u003cb\u003eمواصفات\u003c\/b\u003e تفاعل البوليميراز المتسلسل \u003cb\u003eتعريف الوحدة\u003c\/b\u003e تُعرف الوحدة الواحدة بأنها كمية الإنزيم التي ستدمج 10 نانومول من dNTP في مادة غير قابلة للذوبان في الأحماض لمدة 30 دقيقة عند 75 درجة مئوية. \u003cb\u003eشروط التفاعل:\u003c\/b\u003e محلول تفاعل ThermoPol® بتركيز 1X، محلول تفاعل ThermoPol® بتركيز 1X، 20 ملي مولار Tris-HCl، 10 ملي مولار (NH4)2SO4، 10 ملي مولار KCl، 2 ملي مولار MgSO4، 0.1% Triton® X-100 (الأس الهيدروجيني 8.8 عند 25 درجة مئوية). \u003cb\u003eمحلول التخزين:\u003c\/b\u003e 10 ملي مولار Tris-HCl، 100 ملي مولار KCl، 1 ملي مولار DTT، 0.1 ملي مولار EDTA، 0.1% Triton® X-100، 50% جلسرين، الأس الهيدروجيني 7.4 عند 25 درجة مئوية. \u003cb\u003eالتثبيط الحراري\u003c\/b\u003e : لا. \u003cb\u003eالوزن الجزيئي\u003c\/b\u003e النظري: 89000 دالتون \u003cb\u003e. إكسونوكلياز 5' - 3'\u003c\/b\u003e : لا. \u003cb\u003eإكسونوكلياز 3' - 5':\u003c\/b\u003e لا. \u003cb\u003eإزاحة السلسلة\u003c\/b\u003e : +++. \u003cb\u003eشروط فحص الوحدة:\u003c\/b\u003e محلول تفاعل ThermoPol® بتركيز 1X، 200 ميكرومولار من كل dNTP بما في ذلك [3 [H]-dTTP، 15 نانومول من الحمض النووي M13 المُحفَّز. \u003cb\u003eالأسئلة الشائعة\u003c\/b\u003e : س: هل قطع الحمض النووي الناتجة عن بوليميراز الحمض النووي Deep Vent (exo-) ذات نهايات غير لاصقة أم أنها تحتوي على قاعدة واحدة بارزة في الطرف 3' كما هو الحال مع بوليميراز الحمض النووي Taq؟ ج: هناك نوعان رئيسيان من النهايات؛ 70% منها ذات نهايات غير لاصقة، بينما 30% منها ذات قاعدة واحدة بارزة في الطرف 3'. إذا كنت ترغب في الحصول على قطع ذات نهايات غير لاصقة بنسبة تزيد عن 95%، فاستخدم بوليميراز الحمض النووي المُصحِّح مثل بوليميراز الحمض النووي Deep Vent (NEB# M0258). س: هل يمكن استخدام بوليميراز الحمض النووي Deep Vent (exo-) في محاليل منظمة أخرى؟ ج: لا يُنصح باستخدام محاليل منظمة أخرى. س: لا يعمل بوليميراز الحمض النووي Deep Vent (exo-) لديّ، بينما يعمل بوليميراز الحمض النووي Taq بشكل جيد. أ: إن بوليميرازات الحمض النووي التي تتميز بدقة عالية بفضل وجود وحدة إكسونيوكلياز مصححة، تتطلب دقة أكبر في استخدامها من مشتقاتها الخارجية أو بوليميرازات الحمض النووي التي لا تحتوي على وحدة إكسونيوكلياز مصححة، مثل بوليميراز الحمض النووي Taq. كما أن الاختلافات في قيمة ثابت ميكايليس (Km) للحمض النووي بين بوليميرازات الحمض النووي المختلفة قد تُغير درجة حرارة التلدين الفعالة للبادئ. نقترح مراجعة الإرشادات العامة المرفقة مع البوليميراز والالتزام بالتوصيات التالية: 1. استخدم المحلول المنظم المرفق مع البوليميراز. 2. استخدم النيوكليوتيدات القياسية الأربعة (dNTPs) (وليس dUTP أو dITP). 3. يبيع بعض موردي النيوكليوتيدات مخزونًا ملوثًا بـ dUTP، مما قد يُسبب مشاكل مع بوليميرازات الحمض النووي المقاومة للحرارة. لتجنب التلوث، نقترح استخدام نيوكليوتيدات NEB. 4. اضبط درجة حرارة التلدين للبادئ. 5. اضبط مستوى المغنيسيوم (2، 4، 6 أو 8 ملي مولار). ٦. اضبط كمية البوليميراز (١-٢ وحدة لكل ١٠٠ ميكرولتر من التفاعل للمصححين؛ ٢-٤ وحدات لكل ١٠٠ ميكرولتر من التفاعل للأشكال الخارجية)؛ قم بزيادة أو تقليل الكمية حسب حجم التفاعل. يمكن الاطلاع على تفاصيل بروتوكولات التحسين في تبويب البروتوكولات.","brand":"New England Biolabs","offers":[{"title":"Default Title","offer_id":46835525255337,"sku":"M0259S","price":0.99,"currency_code":"USD","in_stock":true}],"url":"https:\/\/iright.com\/ar\/products\/neb-m0259s","provider":"Iright","version":"1.0","type":"link"}