{"product_id":"neb-m0463s","title":"مختبرات نيو إنجلاند البيولوجية، M0463S، yDcpS","description":"إنزيم yDcpS هو إنزيم إزالة غطاء m7G الذي يحلل m7G. \u003cb\u003eالتصنيفات ذات الصلة:\u003c\/b\u003e تعديل الحمض النووي الريبي (RNA). \u003cb\u003eالمواصفات:\u003c\/b\u003e \u003cb\u003eتعريف الوحدة\u003c\/b\u003e : تُعرَّف الوحدة الواحدة بأنها كمية yDcpS اللازمة لتحويل 50% من محلول تركيزه 500 نانومتر من الحمض النووي الريبي (RNA) ذي غطاء m7G والمكون من 25 قاعدة إلى شكل ثنائي الفسفرة عند الطرف 5'، وذلك في حجم تفاعل إجمالي قدره 20 ميكرولتر خلال ساعة واحدة عند درجة حرارة 37 درجة مئوية: 5'-[m7Gppp]rGrUrArGrArArCrUrUrCrGrUrCrGrArGrUrArCrGrCrUrCrArA[3-6FAM]-3'. \u003cb\u003eشروط التفاعل: محلول\u003c\/b\u003e تفاعل yDcpS بتركيز 1X، يُحضَّن عند درجة حرارة 37 درجة مئوية. محلول تفاعل yDcpS بتركيز 1X، 10 ملي مولار من ثنائي-تريس-هيدروكلوريد، 1 ملي مولار من EDTA (الأس الهيدروجيني 6.5 عند 25 درجة مئوية)، \u003cb\u003eمحلول التخزين.\u003c\/b\u003e 300 ملي مولار كلوريد الصوديوم، 10 ملي مولار Tris-HCl، 0.1 ملي مولار EDTA، 1 ملي مولار DTT، 50% جلسرين، درجة الحموضة 7.4 عند 25 درجة مئوية، \u003cb\u003eتعطيل حراري\u003c\/b\u003e عند 70 درجة مئوية، \u003cb\u003eنشاط نوعي\u003c\/b\u003e 20,000 وحدة\/ملغ \u003cb\u003e. شروط اختبار الوحدة\u003c\/b\u003e : محلول تفاعل yDcpS بتركيز 1X مع 500 نانومولار من m7، 25-mer RNA 3´-FAM ذي غطاء G. بعد الحضانة عند 37 درجة مئوية لمدة ساعة واحدة، يتم تعطيل yDcpS عند 70 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة، ويتم قياس إزالة الغطاء بواسطة الفصل الكهربائي الشعيري. \u003cb\u003eالأسئلة الشائعة\u003c\/b\u003e : س: هل يُعد yDcpS بديلاً عن بيروفوسفاتاز حمض التبغ (TAP)؟ ج: لا. يترك yDcpS طرفًا ثنائي الفوسفات 5′ عند إزالة الغطاء، وهو غير قابل للربط مباشرة. يترك إنزيم TAP مجموعة فوسفات أحادية في الطرف 5′، والتي يمكن استخدامها للربط المباشر باستخدام إنزيم T4 RNA Ligase. س: تشير الدراسات إلى أن إنزيم DcpS لا يُظهر أي نشاط على النسخ التي يزيد طولها عن 25 نيوكليوتيدًا. هل إنزيم yDcpS من شركة NEB نشط على النسخ الأطول؟ ج: نعم. تم التحقق من نشاط إزالة غطاء الحمض النووي الريبوزي (RNA) لإنزيم yDcpS على نسخ مُستنسخة في المختبر يصل طولها إلى 1.4 كيلوبايت، وكذلك على الحمض النووي الريبوزي البشري الكلي. س: هل إنزيم yDcpS نشط في محلول التغطية المُرفق مع نظام تغطية فيروس الوقس (NEB #M2080)؟ ج: لا. يتأثر نشاط إنزيم yDcpS بوجود كلوريد البوتاسيوم (KCl) ودرجة حموضة ≥ 7.5، وكلاهما موجود في محلول التغطية. س: ما هي خصوصية الهدف لإنزيم yDcpS؟ ج: يُظهر إنزيم yDcpS نشاط إزالة غطاء الحمض النووي الريبوزي (RNA) على معظم الأغطية القائمة على الغوانوزين، ولكنه لا يُظهر أي نشاط على أغطية الأدينين (A) أو السيتوزين (C) أو اليوراسيل (U). يُزيل إنزيم yDcpS غطاءَي Cap0 وCap1. ومن المهم ذكره أن yDcpS لا يُزيل غطاءَي desthiobiotin GTP أو m2,2,7G. س: هل نشاط yDcpS حساس للبنية الثانوية للحمض النووي الريبي؟ ج: نعم. تُزال الغطاءات من النهايات 5′ المُقعّرة أو غير المُتداخلة بكفاءة أقل من النهايات أحادية السلسلة أو النهايات 5′ المُتدلية. ومع ذلك، يُمكن التغلب على التداخل البنيوي باستخدام كمية أكبر من الإنزيم، أو درجات حرارة حضانة أعلى، أو فترات حضانة أطول. س: ما هي ظروف المحلول المُفضّلة لـ yDcpS؟ ج: يتراوح الرقم الهيدروجيني الأمثل لـ yDcpS بين 6 و7. يُؤثر محلول الفوسفات على نشاط yDcpS. ينخفض ​​نشاط yDcpS في المحاليل التي تحتوي على ≥100 ملي مولار من كلوريد الصوديوم أو ≥50 ملي مولار من كلوريد البوتاسيوم. س: هل يكون yDcpS نشطًا عند درجات حرارة أعلى من 37 درجة مئوية؟ ج: نعم. تم تأكيد نشاط yDcpS حتى 50 درجة مئوية.","brand":"New England Biolabs","offers":[{"title":"Default Title","offer_id":46835496157353,"sku":"M0463S","price":0.99,"currency_code":"USD","in_stock":true}],"url":"https:\/\/iright.com\/ar\/products\/neb-m0463s","provider":"Iright","version":"1.0","type":"link"}