{"product_id":"neb-n6951s","title":"نيو إنجلاند بيولابس، N6951S، ناقل pTWIN1","description":"pTWIN1 هو نظام IMPACT، وهو نظام تنقية بروتيني \u003cb\u003eجديد يعتمد\u003c\/b\u003e \u003cb\u003eعلى تقنية\u003c\/b\u003e التنقية بوساطة الإنتين باستخدام \u003cb\u003eعلامة\u003c\/b\u003e تقارب مرتبطة بالكيتين (CBD). يتضمن هذا النظام بلازميدات وركائز DNA، وعلامة تقارب محددة. \u003cb\u003eالأسئلة الشائعة\u003c\/b\u003e : س: ما هو نظام IMPACT؟ ج: نظام IMPACT، وهو نظام تنقية بروتيني بوساطة الإنتين باستخدام علامة تقارب مرتبطة بالكيتين، هو نظام تنقية بروتيني مبتكر يسمح بتنقية البروتينات المؤتلفة دون الحاجة إلى علامة تقارب في خطوة كروماتوغرافية واحدة. طُوِّرت هذه الطريقة في مختبرات نيو إنجلاند بيولابس (NEB) بناءً على دراسات آلية ربط البروتين (انظر المراجع في 1.10 و1.11). يتميز هذا النظام عن جميع أنظمة التنقية الأخرى بقدرته على تنقية البروتين المؤتلف بتسلسله الأصلي باستخدام عمود تقارب واحد، دون الحاجة إلى استخدام إنزيم بروتياز. يستغل نظام IMPACT خاصية الانشطار الذاتي المُحفَّز لعنصر ربط بروتيني مُهندَس (إنتين) لفصل البروتين المستهدف عن علامة التقارب. يُدمج البروتين المستهدف مع علامة تتكون من الإنتين ونطاق ربط الكيتين (CBD)، مما يسمح بتنقية البروتين المُدمج باستخدام تقنية التقارب على عمود الكيتين. يخضع الإنتين لانشطار نوعي بواسطة كاشف ثيول أو بتغيير درجة الحموضة ودرجة الحرارة، مما يُحرر البروتين المستهدف من علامة الكيتين المرتبطة به، وبالتالي يُتيح تنقية البروتين المستهدف باستخدام عمود واحد. يتضمن نظام IMPACT سلسلة من نواقل التعبير في بكتيريا الإشريكية القولونية، والتي تستخدم إنتينات مُهندَسة تتكون من 134 إلى 454 حمضًا أمينيًا. صُممت هذه النواقل للتعبير عن البروتين وتنقيته في بكتيريا الإشريكية القولونية، بالإضافة إلى عمليات معالجة البروتين مثل وسم البروتين وربطه وتكوين الحلقات. تتوفر مجموعة IMPACT، بالإضافة إلى النواقل التي تُباع بشكل منفصل، لتلبية أهداف بحثك. تتيح توافقية مواقع الاستنساخ المتعددة في النواقل إدخال نفس جزء الجين المستهدف في نواقل مختلفة لتحقيق التعبير الأمثل والتنقية. يُدخل الجين المشفر للبروتين المستهدف في موقع الاستنساخ المتعدد لناقل التعبير IMPACT، لإنشاء اندماج متوافق بين الجين المستهدف وعلامة التقارب المكونة من الإنتين ونطاق ربط الكيتين (CBD، 52 حمضًا أمينيًا). عند تمرير المستخلصات الخام لخلايا الإشريكية القولونية المحفزة عبر عمود الكيتين، يرتبط بروتين الاندماج (إنتين-CBD) بحبيبات الكيتين، بينما تُغسل جميع الملوثات الأخرى من العمود. يُحفز الانقسام على العمود عند درجة حرارة 4 مئوية بإضافة عامل مختزل (مثل DTT) أو بتغيير درجة الحرارة ودرجة الحموضة (نواقل pTWIN). يُحرر البروتين المستهدف بينما تبقى علامة الإنتين-CBD مرتبطة بالعمود، مما يؤدي إلى تنقية البروتين المستهدف باستخدام عمود واحد. تحتوي مجموعة IMPACT على نواقل تعبير تسمح بدمج علامة الإنتين القابلة للفصل إما مع الطرف الكربوكسيلي (pTXB1) أو الطرف الأميني (pTYB11) للبروتين المستهدف. هذه المرونة في بناء البروتين المدمج تزيد من احتمالية نجاح التعبير عن البروتين المستهدف وتنقيته. توفر متجهات pTWIN (#N6951S و#N6952S) العديد من المزايا: (1) سهولة عزل البروتينات الأصلية دون استخدام كاشف ثيول - باستخدام تغيير درجة الحموضة ودرجة الحرارة (إنتين 1)؛ (2) عزل البروتينات التي تحتوي على سيستين في الطرف الأميني [لربط الإنتين بوساطة (IPL)] أو بقايا أخرى غير الميثيونين دون استخدام بروتيازات خارجية قد تكون مكلفة وغير نوعية؛ (3) تنقية البروتينات التي تحتوي على ثيوإستر في الطرف الكربوكسيلي لاستخدامها في تفاعلات IPL التي يمكنها إدخال أحماض أمينية غير مشفرة في البروتين أو وسم بروتين مُعبَّر عنه بكتيريًا؛ (4) توليد أنواع بروتينية دائرية. تستخدم جميع المتجهات مُحفِّز T7 وجين lacI لتوفير تحكم دقيق في التعبير عن جين الاندماج. يؤدي ارتباط مثبط اللاكتوز بتسلسل مُشغِّل اللاكتوز الموجود مباشرةً بعد مُحفِّز T7 إلى كبح التعبير القاعدي لجين الاندماج في غياب تحفيز IPTG. تحمل جميع النواقل علامة جين Ampr (جين bla)، الذي ينقل مقاومة الأمبيسيلين إلى السلالة المضيفة، باستثناء pKYB1 (#N6706S)، الذي يحمل جين مقاومة الكاناميسين. س: ما هو تسلسل الحمض النووي لهذا المنتج؟ ج: يمكن العثور على تسلسل الحمض النووي في أداة تسلسلات وخرائط الحمض النووي.","brand":"New England Biolabs","offers":[{"title":"Default Title","offer_id":46835538067625,"sku":"N6951S","price":0.99,"currency_code":"USD","in_stock":true}],"url":"https:\/\/iright.com\/ar\/products\/neb-n6951s","provider":"Iright","version":"1.0","type":"link"}