{"product_id":"neb-r0513s","title":"مختبرات نيو إنجلاند البيولوجية، R0513S، AlwI","description":"تم إيقاف إنتاج الحجم الكبير من هذا المنتج في 15 ديسمبر 2025. وسيظل الحجم الصغير متوفرًا. \u003cb\u003eالفئات ذات الصلة\u003c\/b\u003e : إنزيمات القطع المحددة: \u003cb\u003eالتطبيقات،\u003c\/b\u003e \u003cb\u003eمواصفات\u003c\/b\u003e هضم إنزيمات القطع، \u003cb\u003eتعريف الوحدة:\u003c\/b\u003e تُعرَّف الوحدة الواحدة بأنها كمية الإنزيم اللازمة لهضم 1 ميكروغرام من الحمض النووي λ (dam-) في ساعة واحدة عند درجة حرارة 37 درجة مئوية في حجم تفاعل إجمالي قدره 50 ميكرولتر. \u003cb\u003eشروط التفاعل:\u003c\/b\u003e محلول rCutSmart™ بتركيز 1X، يُحضن عند 37 درجة مئوية. محلول rCutSmart™ بتركيز 1X، 50 ملي مولار أسيتات البوتاسيوم، 20 ملي مولار أسيتات التريس، 10 ملي مولار أسيتات المغنيسيوم، 100 ميكروغرام\/مل ألبومين مُعاد التركيب (الأس الهيدروجيني 7.9 عند 25 درجة مئوية). \u003cb\u003eالنشاط في محاليل\u003c\/b\u003e NEBuffer™: NEBuffer™ r1.1: 50%، NEBuffer™ r2.1: 50%، NEBuffer™ r3.1: 10%، محلول rCutSmart™: 100%. \u003cb\u003eتوافق المخفف\u003c\/b\u003e : المخفف أ: \u003cb\u003eمحلول التخزين\u003c\/b\u003e ، 10 ملي مولار تريس-هيدروكلوريد، 50 ملي مولار كلوريد البوتاسيوم، 1 ملي مولار داي ثيو ثريتول، 0.1 ملي مولار إيديتات ثنائي الصوديوم، 200 ميكروغرام\/مل ألبومين مُعاد التركيب، 50% جلسرين، الأس الهيدروجيني 7.4 عند 25 درجة مئوية. \u003cb\u003eتعطيل حراري\u003c\/b\u003e عند 25 درجة مئوية، لا \u003cb\u003eحساسية للمثيلة،\u003c\/b\u003e مثيلة dam: محظورة، مثيلة dcm: غير حساسة، مثيلة CpG: غير حساسة. \u003cb\u003eالأسئلة الشائعة:\u003c\/b\u003e س: هل يتم حظر AlwI بواسطة مثيلة dam؟ ج: نعم. س: لماذا يصعب ربط الحمض النووي المقطوع بواسطة AlwI؟ ج: النهايات المتدلية أحادية القاعدة هي ركائز ضعيفة لإنزيم T4 DNA ligase: فهي تلتصق بشكل ضعيف للغاية، ويصعب ربطها مثل شظايا الحمض النووي ذات النهايات غير المتداخلة. أيضًا، بالنسبة لـ AlwI، لا تقتصر النهاية المتدلية على أي نيوكليوتيد معين؛ فجميع القواعد الأربع ممثلة بالتساوي تقريبًا. وبالتالي، فإن أي نهاية متدلية معينة تكون متوافقة مع 25% فقط من النهايات المتدلية الأخرى الموجودة. هذا يقلل من كفاءة الربط مقارنةً بالنهايات المتدلية الناتجة عن إنزيمات التقييد التي تترك فقط نهايات متدلية متوافقة. يمكن زيادة كفاءة الربط باستخدام مزيج Blunt\/TA Ligase Master Mix الخاص بنا. س: لماذا لا يُنصح بالهضم المطول؟ ج: لأن هناك نشاطًا نوكليازيًا خارجيًا أو نوكليازيًا داخليًا غير متخصص، ويبدو أنه من خصائص الإنزيم. س: اختبرتُ إنزيم التقييد الخاص بكم على الحمض النووي الركيزة الموصى به من قِبل NEB، ويبدو أنه نشط، ولكنه لا يهضم الحمض النووي الخاص بي. ما السبب المحتمل؟ ج: تُعد جودة ونقاء الحمض النووي من العوامل الرئيسية التي تؤثر على نشاط الإنزيم. قد تُثبَّط إنزيمات التقييد النشطة في محلول rCutSmart®، ولكنها أقل نشاطًا في محلول NEBuffer r2.1 و\/أو r3.1 (محاليلنا ذات الملوحة العالية)، بسبب وجود الملح في التفاعل. قد تُؤدي إجراءات تنقية الحمض النووي التي تستخدم أعمدة الطرد المركزي إلى محاليل حمض نووي ذات مستويات عالية من الملح، والتي قد تنتقل إلى التفاعل وتُثبِّط نشاط الإنزيم. لمنع ذلك، نوصي بألا تتجاوز كمية محلول الحمض النووي المُضاف إلى التفاعل 25% من إجمالي حجم التفاعل. ويمكن تحقيق ذلك عن طريق تعديل إجمالي حجم التفاعل وفقًا لذلك. س: هل يمكنك إخباري المزيد عن التحول من الألبومين البقري المصل (BSA) إلى الألبومين المُعاد تركيبه (rAlbumin) في محاليل NEBuffers؟ ج: يسرّ شركة NEB أن تعلن عن استبدال محاليل التفاعل المحتوية على الألبومين البقري المصل (NEBuffer 1.1، 2.1، 3.1 وCutSmart® Buffer) بمحاليل تحتوي على الألبومين المُعاد تركيبه (NEBuffer r1.1، r2.1، r3.1 وrCutSmart™ Buffer). كما أننا بصدد تحويل جميع تركيبات إنزيمات التقييد لتشمل الألبومين المُعاد تركيبه. ونعتقد أن التخلي عن المنتجات الحيوانية خطوة في الاتجاه الصحيح، ونقدم هذا التحسين بنفس السعر.","brand":"New England Biolabs","offers":[{"title":"Default Title","offer_id":46835541377193,"sku":"R0513S","price":0.99,"currency_code":"USD","in_stock":true}],"url":"https:\/\/iright.com\/ar\/products\/neb-r0513s","provider":"Iright","version":"1.0","type":"link"}