{"product_id":"neb-r0528l","title":"مختبرات نيو إنجلاند البيولوجية، R0528L، EarI","description":"تمت إعادة صياغة EarI باستخدام الألبومين المؤتلف (rAlbumin) بدءًا من رقم الدفعة 10180739. \u003cb\u003eالفئات ذات الصلة:\u003c\/b\u003e إنزيمات القطع المحددة CG، إنزيمات القطع المؤهلة لتوفير الوقت. \u003cb\u003eالتطبيقات:\u003c\/b\u003e هضم إنزيم القطع. \u003cb\u003eتعريف\u003c\/b\u003e \u003cb\u003eالوحدة:\u003c\/b\u003e تُعرَّف الوحدة الواحدة بأنها كمية الإنزيم اللازمة لهضم 1 ميكروغرام من الحمض النووي λ في ساعة واحدة عند 37 درجة مئوية في حجم تفاعل إجمالي قدره 50 ميكرولتر. \u003cb\u003eشروط التفاعل:\u003c\/b\u003e محلول rCutSmart™ بتركيز 1X، يُحضن عند 37 درجة مئوية. محلول rCutSmart™ بتركيز 1X، 50 ملي مولار أسيتات البوتاسيوم، 20 ملي مولار أسيتات التريس، 10 ملي مولار أسيتات المغنيسيوم، 100 ميكروغرام\/مل ألبومين مُعاد التركيب (الأس الهيدروجيني 7.9 عند 25 درجة مئوية). \u003cb\u003eالنشاط في محاليل\u003c\/b\u003e NEBuffer™: NEBuffer™ r1.1: 50%، NEBuffer™ r2.1: 10%، NEBuffer™ r3.1: \u0026lt;10%، محلول rCutSmart™: 100%. \u003cb\u003eتوافق المخفف\u003c\/b\u003e : المخفف B، \u003cb\u003eمحلول التخزين\u003c\/b\u003e : 10 ملي مولار تريس-هيدروكلوريد، 300 ملي مولار كلوريد الصوديوم، 1 ملي مولار DTT، 0.1 ملي مولار EDTA، 500 ميكروغرام\/مل ألبومين مُعاد التركيب، 50% جلسرين، الأس الهيدروجيني 7.4 عند 25 درجة مئوية. \u003cb\u003eتعطيل حراري\u003c\/b\u003e عند 25 درجة مئوية، ثم عند 65 درجة مئوية لمدة 20 دقيقة. \u003cb\u003eحساسية المثيلة\u003c\/b\u003e : مثيلة dam: غير حساسة، مثيلة dcm: غير حساسة، مثيلة CpG: تتأثر بالتداخل. \u003cb\u003eالأسئلة الشائعة:\u003c\/b\u003e س: هل يُحجب إنزيم EarI بالمثيلة مثل نظيره Eam1104I؟ ج: يُحجب إنزيم EarI بتداخل مثيلة CpG. س: هل يُستخدم إنزيم EarI في أي تقنيات خاصة؟ ج: طورت شركة ستراتاجين طريقة تُسمى الاستنساخ السلس باستخدام Eam1104I وPCR، كما وصفها بادجيت وسوجي في مجلة Gene 168 (1996)، الصفحات 31-35. لا تمتلك شركة NEB ترخيصًا لأي من هاتين التقنيتين. تستخدم هذه التقنية بادئًا يحتوي على جانب الموقع غير المتماثل الذي يحتوي على السيتوزين. يُجرى تفاعل PCR باستخدام سيتوزين مثيل. جميع المواقع الداخلية محجوبة، ولا يتبقى سوى المواقع الناتجة عن البادئ قابلة للقطع بواسطة إنزيم Eam1104I أو إنزيم مماثل له في حساسية المثيلة. س: ما هو نشاط إنزيم EarI عند درجة حرارة 25 درجة مئوية؟ ج: تتراوح نسبة نشاط إنزيم EarI بين 25% و50% عند درجة حرارة 25 درجة مئوية. س: هل يجب عليّ تحضير عمليات الهضم باستخدام إنزيمات Time-Saver™ المعتمدة لمدة تتراوح بين 5 و15 دقيقة؟ هل يمكنني إجراء عملية الهضم لفترة أطول؟ ج: تتميز إنزيمات Time-Saver™ من NEB بسرعة عملها (من 5 إلى 15 دقيقة)، كما أنها مصممة ومعتمدة لتحمل عمليات الهضم طوال الليل دون إتلاف الحمض النووي. س: اختبرت إنزيم التقييد الخاص بكم على الحمض النووي الركيزة الموصى به من NEB، ويبدو أنه نشط، ولكنه لا يهضم الحمض النووي الخاص بي. ما السبب المحتمل؟ ج: تُعد جودة ونقاء الحمض النووي من العوامل الرئيسية التي تؤثر على نشاط الإنزيم. قد تُثبَّط إنزيمات القطع النشطة في محلول rCutSmart®، ولكنها أقل نشاطًا في محلولي NEBuffer r2.1 و\/أو r3.1 (محاليلنا ذات التركيز الملحي العالي)، بفعل الملح في التفاعل. قد تُنتج إجراءات تنقية الحمض النووي التي تستخدم أعمدة الطرد المركزي محاليل حمض نووي ذات مستويات عالية من الملح، والتي قد تنتقل إلى التفاعل وتُثبِّط نشاط الإنزيم. ولمنع ذلك، نوصي بألا تتجاوز كمية محلول الحمض النووي المُضاف إلى التفاعل 25% من إجمالي حجم التفاعل. ويمكن تحقيق ذلك بتعديل إجمالي حجم التفاعل وفقًا لذلك. س: هل يمكنك إخباري المزيد عن التحوّل من الألبومين البقري (BSA) إلى الألبومين المُعاد تركيبه (rAlbumin) في محاليل NEBuffer؟ يسرّ شركة NEB أن تعلن عن استبدال محاليل التفاعل المحتوية على الألبومين البقري (NEBuffer 1.1، 2.1، 3.1 وCutSmart® Buffer) بمحاليل تحتوي على الألبومين المُعاد تركيبه (NEBuffer r1.1، r2.1، r3.1 وrCutSmart™ Buffer). كما أننا بصدد تحويل جميع تركيبات إنزيمات التقييد لتشمل الألبومين المُعاد تركيبه. ونرى أن التخلي عن المنتجات الحيوانية خطوة في الاتجاه الصحيح، ونقدم هذا التحسين بنفس السعر.","brand":"New England Biolabs","offers":[{"title":"Default Title","offer_id":46835534135465,"sku":"R0528L","price":0.99,"currency_code":"USD","in_stock":true}],"url":"https:\/\/iright.com\/ar\/products\/neb-r0528l","provider":"Iright","version":"1.0","type":"link"}