{"product_id":"neb-r3539s","title":"نيو إنجلاند بيولابس، R3539S، BbsI-HF®","description":"تعرف على دقة الليغاز وتجاوز حدود \u003cb\u003eالفئات ذات الصلة\u003c\/b\u003e : إنزيمات القطع عالية الدقة (HF®)، إنزيمات القطع B، \u003cb\u003eتطبيقات\u003c\/b\u003e إنزيمات القطع المؤهلة لتوفير الوقت، حلول الاستنساخ والأتمتة عالية الإنتاجية، تجميع NEBridge® Golden Gate، \u003cb\u003eمواصفات\u003c\/b\u003e هضم إنزيم القطع \u003cb\u003e، تعريف الوحدة:\u003c\/b\u003e تُعرف الوحدة الواحدة بأنها كمية الإنزيم المطلوبة لهضم 1 ميكروغرام من الحمض النووي λ في ساعة واحدة عند 37 درجة مئوية في حجم تفاعل إجمالي قدره 50 ميكرولتر. \u003cb\u003eشروط التفاعل:\u003c\/b\u003e محلول rCutSmart™ بتركيز 1X، يُحضن عند 37 درجة مئوية. محلول rCutSmart™ بتركيز 1X، 50 ملي مولار أسيتات البوتاسيوم، 20 ملي مولار أسيتات التريس، 10 ملي مولار أسيتات المغنيسيوم، 100 ميكروغرام\/مل ألبومين مُعاد التركيب (الأس الهيدروجيني 7.9 عند 25 درجة مئوية). \u003cb\u003eالنشاط في محاليل\u003c\/b\u003e NEBuffer™: NEBuffer™ r1.1: 10%، NEBuffer™ r2.1: 10%، NEBuffer™ r3.1: 10%، محلول rCutSmart™: 100%. \u003cb\u003eتوافق المخفف\u003c\/b\u003e : المخفف B، \u003cb\u003eمحلول التخزين\u003c\/b\u003e : 10 ملي مولار تريس-هيدروكلوريد، 300 ملي مولار كلوريد الصوديوم، 1 ملي مولار DTT، 0.1 ملي مولار EDTA، 500 ميكروغرام\/مل ألبومين مُعاد التركيب، 50% جلسرين، الأس الهيدروجيني 7.4 عند 25 درجة مئوية. \u003cb\u003eتعطيل حراري\u003c\/b\u003e عند 25 درجة مئوية، ثم عند 65 درجة مئوية لمدة 20 دقيقة. \u003cb\u003eحساسية المثيلة\u003c\/b\u003e : مثيلة dam: غير حساسة، مثيلة dcm: غير حساسة، مثيلة CpG: غير حساسة. \u003cb\u003eالأسئلة الشائعة\u003c\/b\u003e : س: ماذا يشير HF® بعد اسم إنزيم التقييد؟ ج: HF اختصار لـ \"الدقة العالية\". العديد من إنزيمات التقييد قادرة على قطع تسلسلات مشابهة، ولكنها ليست مطابقة تمامًا، لتسلسل التعرف المحدد لها. يُطلق على هذه الخصوصية المُعدلة أو المُخففة اسم \"النشاط النجمي\". تم تصميم إنزيمات التقييد HF هندسيًا للقطع بدقة أعلى من الإنزيم الأصلي، وبالتالي تُظهر نشاطًا نجميًا أقل. تم استخدام فحوصات باستخدام تركيز متزايد من الجلسرين، وزيادة وقت التفاعل، وتركيز عالٍ من الإنزيم لتحديد الإنزيمات التي تُوفر أعلى دقة في نطاق واسع من الظروف. بالإضافة إلى ذلك، يتم تزويد جميع إنزيمات HF بمحلول rCutSmart Buffer، بالإضافة إلى قارورة مجانية من صبغة التحميل البنفسجية. س: هل يجب عليّ تحضير عملية الهضم باستخدام إنزيمات Time-Saver™ المعتمدة لمدة 5-15 دقيقة؟ هل يمكنني إجراء عملية الهضم لفترة أطول؟ ج: تتميز إنزيمات Time-Saver™ من NEB بسرعة عملها (5-15 دقيقة)، كما أنها مصممة ومعتمدة لتحمل عمليات الهضم طوال الليل دون إتلاف الحمض النووي. س: ما هي إنزيمات التقييد من NEB التي تأتي مزودة بصبغة تحميل الجل البنفسجية (6X)؟ ج: جميع إنزيمات التقييد HF ومعظم إنزيمات التقييد غير HF من NEB تأتي مزودة بصبغة تحميل الجل البنفسجية (6X). الإنزيمات المقيدة غير HF التي تأتي مع الصبغة الأرجوانية هي: AatII AsiSI BsmBI-v2 EagI MboI NlaIII PvuI SmaI Acil AvrII BspHI EcoRI MboII NotI RsaI SpeI AfeI BamHI BsrGI EcoRV MluI NspI SacI StuI AflII BbsI ClaI Esp3I FseI MseI PacI SacII AgeI BglII DdeI HaeIII MspI PciI Sali XbaI AluI BsaI DpnI HindIII NcoI PmeI SapI XhoI ApaI BseYI DpnII HpaI NdeI PsiI-v2 SfaNI XmaI ApeKI BsiWI DraI KpnI NheI PstI SfiI XmnI AscI * يتم أيضًا توفير جميع إنزيمات تقييد HF مع تحميل الجل الصبغة الأرجوانية (6X) س: أي قيد هل تُستخدم الإنزيمات في تجميع GoldenBraid؟ ج: يُعدّ BsaI أحد إنزيمات النوع IIS المستخدمة في هذه الطريقة. كما تُقدّم NEB نسخة مُهندسة عالية الدقة من هذا الإنزيم، BsaI-HF®v2، والتي تتميّز بكونها مُؤهّلة لتوفير الوقت (حيث يُمكنها هضم الحمض النووي في غضون 5-15 دقيقة، ويمكن هضمها بأمان طوال الليل)، وتُظهر نشاطًا نجميًا مُنخفضًا. يعمل BsaI-HFv2 في محلول CutSmart®، كما هو الحال مع إنزيم T4 DNA Ligase (وهو أيضًا جزء من سير عمل GoldenBraid)، والذي يكون نشطًا وظيفيًا بنسبة 100% في هذا المحلول، عند إضافة 1 ملي مول من ATP إلى التفاعل. تشمل إنزيمات النوع IIS الأخرى المُستخدمة في GoldenBraid: BsmBI-v2\/Esp3I، وBtgZI، وBbsI\/BbsI-HF، وPaqCI (نظير AarI مع تسلسل تعرّف 7 أزواج قاعدية). المرجع: GoldenBraid 2.0: إطار عمل شامل لتجميع الحمض النووي في البيولوجيا التركيبية النباتية. س: ما هي إنزيمات التقييد المستخدمة في تجميع Golden Gate؟ ج: تجميع Golden Gate هو طريقة استنساخ فعالة أحادية الأنبوب تعتمد على إنزيمات التقييد من النوع IIS التي تقطع خارج مواقع التعرف الخاصة بها وتترك نهايات بارزة من 3 أو 4 قواعد. يُعد BsaI أكثر إنزيمات النوع IIS استخدامًا في تجميع Golden Gate. كما تُقدم NEB نسخة مُهندسة عالية الدقة من هذا الإنزيم، BsaI-HF®v2، والتي تتميز بميزة إضافية وهي كونها مُؤهلة لتوفير الوقت (حيث يمكنها هضم الحمض النووي في غضون 5-15 دقيقة أو طوال الليل دون تحلله) وتُظهر نشاطًا نجميًا مُنخفضًا بشكل كبير. تشمل إنزيمات النوع IIS الأخرى المستخدمة في تجميع Golden Gate: BsmBI-v2\/Esp3I، وBbsI\/BbsI-HF، وPaqCI (نظير AarI مع تسلسل تعرف مكون من 7 أزواج قاعدية)، وSapI\/BspQI\/BspQI-HF (مع تسلسل تعرف مكون من 7 أزواج قاعدية ونهايات بارزة مكونة من 3 أزواج قاعدية). س: هل هذا الإنزيم حساس لـ dam أو dcm أو مثيلة CpG في الثدييات؟ ج: لا. هذا الإنزيم غير حساس لـ dam أو dcm أو مثيلة CpG في الثدييات. للحصول على معلومات محدثة حول حساسية المثيلة، يُرجى زيارة Dam-Dcm ومثيلة CpG أو REBASE. س: هل تُوفر NEB أي إنزيمات تقييد خالية من BSA و\/أو خالية من أصل حيواني لتخطيط البلازميدات لتطوير لقاحات mRNA؟ ج: نعم، قامت شركة NEB بتطوير بعض إنزيمات التقييد (بما في ذلك BspQI، وهو نظير SapI) بدون مكونات مشتقة من الحيوانات، ولا يحتوي تركيبها النهائي على BSA. بالإضافة إلى ذلك، لدينا العديد من إنزيمات التقييد المتاحة بدون BSA أو أي مكونات أخرى مشتقة من الحيوانات في تركيبها النهائي. تشمل هذه القائمة: BbsI-HF، وBsaI-HFv2، وBspQI، وهو نظير LguI، ومتوفر الآن بدرجة GMP*، وBspQI-HF، وClaI، وHindIII-HF، وPacI، وSapI، وSpeI، وSwaI، وXbaI، وXhoI، وXmnI. يمكن تطوير إنزيمات أخرى حسب الطلب. يرجى الاستفسار هنا. * \"GMP Grade\" و\"GMP-grade\" مصطلحات تجارية تستخدمها NEB لوصف المنتجات المصنعة أو النهائية في منشأة Rowley التابعة لها. صُممت منشأة Rowley لتصنيع المنتجات وفقًا لبنية تحتية وضوابط عمليات أكثر صرامة لتحقيق مواصفات منتجات أكثر دقة وتلبية متطلبات العملاء. تُصنّع المنتجات في منشأة NEB في رولي وفقًا لمعايير نظام إدارة الجودة ISO 9001 وISO 13485. مع ذلك، لا تُصنّع NEB حاليًا أو تبيع منتجات تُعرف باسم المكونات الصيدلانية الفعالة (APIs)، كما أنها لا تُصنّع منتجاتها بما يتوافق مع جميع لوائح ممارسات التصنيع الجيدة الحالية. س: هل يُمكنكم إطلاعي على المزيد حول التحوّل من الألبومين البقري (BSA) إلى الألبومين المُعاد تركيبه (rAlbumin) في محاليل NEBuffers؟ ج: يسرّ NEB أن تُعلن عن استبدال محاليل التفاعل المحتوية على الألبومين البقري (NEBuffer 1.1، 2.1، 3.1 وCutSmart® Buffer) بمحاليل تحتوي على الألبومين المُعاد تركيبه (NEBuffer r1.1، r2.1، r3.1 وrCutSmart™ Buffer). كما أننا بصدد تحويل جميع تركيبات إنزيمات التقييد لتشمل الألبومين المُعاد تركيبه. نرى أن التخلي عن المنتجات التي تحتوي على مكونات حيوانية خطوة في الاتجاه الصحيح، ونقدم هذا التحسين بنفس السعر. س: هل يمكن تخزين صبغة التحميل الجل، بنفسجي 6X (B7024) في درجات حرارة منخفضة؟ ج: درجة حرارة التخزين الموصى بها لصبغة التحميل الجل، بنفسجي 6X، هي درجة حرارة الغرفة (25 درجة مئوية). عادةً، قد يترسب SDS من المحلول عند تخزين الصبغة في درجات حرارة منخفضة. يمكن التخلص من هذا الترسب الطفيف بترك القارورة في درجة حرارة الغرفة لمدة ساعة، أو تسخينها برفق لمدة 10 دقائق. رجّ القارورة عدة مرات قبل الاستخدام لإعادة المحلول إلى حالته المتجانسة.","brand":"New England Biolabs","offers":[{"title":"Default Title","offer_id":46835536855209,"sku":"R3539S","price":0.99,"currency_code":"USD","in_stock":true}],"url":"https:\/\/iright.com\/ar\/products\/neb-r3539s","provider":"Iright","version":"1.0","type":"link"}