{"product_id":"qiagen-y9410l","title":"شركة كياجين، Y9410L، مزيج تجزئة WGS، 5x (24 تفاعلًا)\n icon_0368_ls_gen_eco_friendly-s","description":"\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e لـ 24 تفاعلًا: 5x مزيج تجزئة WGS (1 × 0.24 مل)، 10X محلول تجزئة (1 × 0.25 مل) ومعزز (1 × 0.25 مل)\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e سمات\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e - إنتاجية عالية للمكتبة وحساسية عالية\u003cbr\u003e\n - نطاق قابل للتعديل لأحجام الأجزاء\u003cbr\u003e\n - متوافق مع كمية الحمض النووي المدخلة من 1 نانوغرام إلى 1 ميكروغرام\u003cbr\u003e\n - مكتبات قابلة للتكرار\u003cbr\u003e\n - انخفاض معدلات التكرار وتحيز توزيع القواعد\u003cbr\u003e\n - التجانس عبر نطاق واسع من محتوى GC\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e تفاصيل المنتج\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e يوفر مزيج تجزئة تسلسل الجينوم الكامل حلاً أحادي الأنبوب لبناء المكتبات لمنصات Illumina. يدعم هذا البروتوكول التجزئة، وإصلاح النهايات، وإضافة ذيل dA في خطوة تفاعل واحدة، مما يبسط سير العمل بشكل كبير ويقلل من إجمالي وقت التفاعل والوقت اللازم للتنفيذ اليدوي.\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e يتم تزويد مزيج تجزئة WGS بمخزن تجزئة 10X (رقم الكتالوج B0330) ومحسن (رقم الكتالوج B0340).\u003c\/p\u003e\n\n\n \u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003eأداء\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e - سير عمل أسرع مع مكتبات عالية الجودة وقابلة للتكرار\u003cbr\u003e\n - إنتاجية مكتبة أعلى وحساسية أفضل عند مدخلات 100 نانوغرام و100 بيكوغرام\u003cbr\u003e\n - أحجام شظايا قابلة للتخصيص وتجزئة قابلة للتكرار بدرجة عالية\u003cbr\u003e\n - انخفاض تحيز توزيع القاعدة عند نقطة البداية\u003cbr\u003e\n - معدل تكرار أقل بكثير عند استخدام كميات قليلة من الحمض النووي\u003cbr\u003e\n - الأداء من أي مدخلات\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e - درجة حرارة التخزين: من -25 درجة مئوية إلى -15 درجة مئوية\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e تغطية الجينوم لمزيج تجزئة تسلسل الجينوم الكامل (WGS) مماثلة للقص الميكانيكي باستخدام كل من 100 نانوغرام و1 نانوغرام من الحمض النووي\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e يوفر مزيج تجزئة WGS ما يلي:\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e خصائص الإنزيم:\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e مبدأ\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e - استخدم ممارسات المختبر الجيدة لتقليل التلوث المتبادل لمنتجات الأحماض النووية.\u003cbr\u003e\n - استخدم دائمًا أنابيب تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وأنابيب الطرد المركزي الدقيقة وأطراف الماصات المعتمدة بأنها معقمة وخالية من إنزيمات DNase و RNase.\u003cbr\u003e\n - قبل البدء، امسح منطقة العمل والماصات بمنتج تنظيف RNase وDNA، مثل RNase Away (Molecular BioProducts, Inc. San Diego, CA).\u003cbr\u003e \n- لضمان تضخيم المكتبة بشكل متسق، تأكد من أن جهاز التدوير الحراري المستخدم في هذا البروتوكول يعمل بشكل جيد وتمت معايرته وفقًا لمواصفات الشركة المصنعة.\u003cbr\u003e\n - اقرأ البروتوكول بالكامل قبل البدء. انتبه إلى نقاط التوقف التي يمكن عندها تجميد العينات عند درجة حرارة -20 درجة مئوية، وخطط سير عملك وفقًا لذلك.\u003cbr\u003e\n تتأثر عملية تفتيت الحمض النووي باستخدام الإنزيمات بعوامل عديدة، مثل درجة حرارة التفاعل، والمدة الزمنية، وظروف الإعداد، بالإضافة إلى نوع الحمض النووي المُدخل. لذا، نوصي بشدة المستخدمين بتجربة البروتوكول وتحسين معلمات زمن التفاعل باستخدام عينات الحمض النووي نفسها أو عينات مشابهة.\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e الاحتياطات العامة\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e قبل أن تبدأ\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e قم بإذابة الكواشف على الجليد. بمجرد ذوبان الكواشف، امزج مزيج إنزيم التجزئة 5X عن طريق النقر بالأصابع (لا تقم بالتقليب الدوامي للمزج)، وامزج المكونات الأخرى عن طريق التقليب الدوامي السريع لتجنب أي تركيزات موضعية.\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e إجراء\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e الخطوة: درجة حرارة الحضانة (°م)\u003cbr\u003e\n 1: 4\u003cbr\u003e\n 2: 32\u003cbr\u003e\n 3: 65\u003cbr\u003e\n 4: 4\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e حجم ذروة القطعة من الحمض النووي المدخل، نانوغرام\u003cbr\u003e\n 250 زوج قاعدي: 350 زوج قاعدي\u003cbr\u003e\n 10:24\u003cbr\u003e\n 100: 16\u003cbr\u003e\n 1000: 14\u003c\/p\u003e\n\n\n \u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003eبالنسبة إلى\u0026gt; 10 نانوغرام من الحمض النووي المُدخل: بالنسبة إلى الحمض النووي المُدخل من 1 إلى 10 نانوغرام\u003cbr\u003e\n مخزن التجزئة 10X: 5\u003cbr\u003e\n الحمض النووي المنقى: X\u003cbr\u003e\n المُحسِّن: 0\u003cbr\u003e\n ماء خالٍ من النيوكلياز: (35–X)\u003cbr\u003e\n الحجم الإجمالي: 40\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e قبل البدء في التفاعل، من الضروري تحديد كمية الحمض النووي المدخل بالإضافة إلى المحلول المنظم الذي يوجد فيه الحمض النووي. نوصي بشدة المستخدمين بممارسة هذا البروتوكول وتحسين وقت التفاعل باستخدام نفس عينات الحمض النووي أو عينات مشابهة.\u003cbr\u003e\n - قم بإعداد البرنامج التالي في جهاز التدوير الحراري (الجدول أدناه). تأكد من استخدام الغطاء المُسخّن للجهاز، وإذا أمكن، اضبط درجة حرارة الغطاء المُسخّن على 70 درجة مئوية. عندما تصل درجة حرارة كتلة جهاز التدوير الحراري إلى 4 درجات مئوية، أوقف البرنامج مؤقتًا.\u003c\/p\u003e\n\n\n \u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e* ملاحظة: قد يلزم ضبط وقت التفاعل بدقة أكبر تبعًا لكمية الحمض النووي المُدخلة. يُقدّم الجدول أعلاه دليلًا عامًا للمساعدة في تحديد نقطة البداية لضبط وقت التفاعل لتحقيق حجم القطعة المطلوب. للضبط الأولي، نوصي بإضافة نقطتي ضبط إضافيتين، إحداهما أطول بثلاث دقائق والأخرى أقصر بثلاث دقائق. قد يلزم إجراء تعديلات دقيقة إذا كان حجم القطعة الدقيق بالغ الأهمية.\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e بالنسبة لـ DNA المدخل ≤10 نانوجرام: لإنتاج مراكز حجم القطع حوالي 350 زوج قاعدي، نوصي بإضافة 2.5 ميكرولتر من المحسن إلى تفاعل 50 ميكرولتر وحضانته لمدة 10 دقائق.\u003c\/p\u003e\n\n\n \u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e٣. من المهم اتباع الإجراء الموضح أدناه للحصول على أفضل النتائج. حجم التفاعل النهائي ٥٠ ميكرولتر: استخدم الجدول أدناه لإعداد التفاعل. حضّر مزيجًا رئيسيًا على الجليد بمزج محلول التجزئة، والحمض النووي، والماء الخالي من النيوكلياز كما هو موضح في الجدول (الأحجام مخصصة لعينة حمض نووي واحدة). امزج جيدًا باستخدام الماصة برفق (لا تستخدم جهاز الخلط الدوامي). يمكن تعديل حجم المزيج حسب الحاجة لعدد العينات المطلوب (أضف ١٠٪ حجمًا إضافيًا لتعويض الفقد في الماصة عند تحضير المزيج الرئيسي لعينات متعددة).\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e ٤. انقل ١٠ ميكرولتر من مزيج تجزئة تسلسل الجينوم الكامل ٥X إلى أنبوب تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) جديد ذي جدار رقيق لكل تفاعل. أضف ٤٠ ميكرولتر من المزيج الرئيسي من الخطوة ٣، واخلط جيدًا عن طريق سحب المزيج وإعادته بالماصة ١٠-١٢ مرة. من الضروري إبقاء أنبوب تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) على الثلج طوال فترة تحضير التفاعل.\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e 5. قم بتدوير أنبوب العينة بشكل متقطع وانقله فوراً إلى جهاز التدوير الحراري المبرد مسبقاً (4 درجات مئوية). استأنف برنامج التدوير.\u003c\/p\u003e\n\n\n \u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e6. عند اكتمال برنامج جهاز التدوير الحراري وعودة كتلة العينة إلى 4 درجات مئوية، قم بإخراج العينات من الكتلة وضعها على الجليد.\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e 7. انتقل مباشرة إلى خطوة الربط. لتحقيق كفاءة ربط مثالية، نوصي باستخدام WGS Ligase (رقم المنتج L6030-WL) وإذا لزم الأمر استخدم HiFi PCR Master Mix (رقم المنتج P7670).\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e تحليل مراقبة الجودة\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e يتم تقييم وظائف مزيج تجزئة WGS 5X من خلال إجراء بناء المكتبة، و PCR\/qPCR والتسلسل.\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e تم اختبار مكونات الإنزيم قبل تجميعها، وثبت خلوها من أي نوكليازات داخلية أو خارجية ملوثة. بلغت نقاوة الإنزيم أكثر من 95% وفقًا لتحليل SDS-PAGE، وتم تأكيد التلوث الضئيل بالحمض النووي الجينومي لبكتيريا الإشريكية القولونية بواسطة تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (qPCR).\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e يتم اختبار دفعات محددة من مزيج الإنزيم (رقم المنتج Y9410) ومحلول التجزئة 10X (رقم المنتج B0330) وطرحها معًا. لا يُضمن الأداء في حال شراء الإنزيم والمحلول بشكل منفصل.\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e التطبيقات\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e - مكتبة NGS الإعدادية لإلومينا\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e هذا المنتج متوفر لتطبيقات البيولوجيا الجزيئية مثل:\u003c\/p\u003e","brand":"Qiagen","offers":[{"title":"Default Title","offer_id":46646802415785,"sku":"Y9410L","price":0.99,"currency_code":"USD","in_stock":true}],"url":"https:\/\/iright.com\/ar\/products\/qiagen-y9410l","provider":"Iright","version":"1.0","type":"link"}