{"product_id":"revvity-62kb01rede","title":"Revvity، 62KB01REDE، HTRF ستاوروسبورين ريد ليجاند، 20 نانومول","description":"\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e ملخص\u003cbr\u003e\n هذا المركب مشتق من الستوروسبورين، وهو قلويد طبيعي موجود في بكتيريا ستربتوميسيس ستاوروسبوريوس. يُعدّ هذا المركب مثبطًا نموذجيًا للكينازات التنافسية مع الأدينوسين ثلاثي الفوسفات (ATP)، وقد ثبتت فعاليته العالية في استهداف أنواع متعددة من الكينازات، مما يجعله مفيدًا جدًا في منصة فحص ارتباط الكيناز بتقنية HTRF. يمتص صبغ الفلورسنت \"d2\" المستخدم الضوء عند طول موجي أقصى يقارب 650 نانومتر، ويُصدر فلورسنتًا عند طول موجي يقارب 670 نانومتر. وهو جزيء مستقبل يُستخدم في فحوصات HTRF.\u003cbr\u003e\n توفر فحوصات HTRF العديد من المزايا مقارنة بالتقنيات الأخرى:\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e تنسيق متجانس للإضافة والقراءة\u003cbr\u003e\n لا توجد خطوات غسيل\u003cbr\u003e\n خلفية منخفضة\u003cbr\u003e\n تصغير مباشر من صفائح دقيقة ذات 96 أو 384 بئراً إلى تنسيقات فحص عالية الكثافة مثل صفائح 384 بئراً ذات حجم منخفض وصفائح 1536 بئراً\u003cbr\u003e\n إشارة مستقرة، مما يوفر مرونة في وقت القراءة أو حجم التحليلات\u003cbr\u003e \nكيف يعمل؟\u003cbr\u003e\n مبدأ فحص تحديد ثابت التفكك (Kd)\u003cbr\u003e\n يُكشف عن ارتباط ستاوروسبورين-ريد باستخدام اختبار ساندويتش، حيث يُستخدم مضاد العلامة الموسوم بكريبتات اليوروبيوم (المانح) الذي يرتبط بالكيناز الموسوم، ومتتبع فلوري أحمر موسوم بـ d2 (المستقبل). يعتمد مبدأ الكشف على تقنية HTRF. تزداد نسبة HTRF (665\/620) بإضافة المزيد من المتتبع، وتصل إلى حد التشبع اعتمادًا على ثابت تفكك (Kd) المتتبع مع الكيناز الموسوم. لمعرفة ما إذا كان ستاوروسبورين-ريد هو المتتبع الأنسب للكيناز الموسوم الذي ترغب في استخدامه، ننصحك بتجربة مجموعات اكتشاف ارتباط الكيناز أولًا. \u003c\/p\u003e\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\n\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e\u003cbr\u003e\n بروتوكول فحص تحديد ثابت التفكك (Kd)\u003cbr\u003e\n يمكن إجراء تجارب ربط التشبع لـ Staurosporine-Red في صفائح 96 أو 384 بئراً (حجم نهائي 20 ميكرولتر).\u003cbr\u003e \nأولاً، يتم تحضير سلسلة تخفيف تتراوح بين 0 و 1 ميكرومتر من ستاوروسبورين الأحمر في محلول ربط الكيناز في صفيحة غير رابطة مكونة من 96 بئراً.\u003cbr\u003e\n بعد ذلك، تُضاف 5 ميكرولتر من محلول ربط الكيناز إلى الصفيحة النهائية ذات 96 أو 384 بئراً. ثم تُضاف 5 ميكرولتر من الكيناز الموسوم، متبوعةً بـ 5 ميكرولتر من مضاد الوسم Eu-cryptate. وأخيراً، تُضاف 5 ميكرولتر من محلول التتبع الأحمر.\u003cbr\u003e\n يتم قياس نسبة HTRF بعد ساعة واحدة من الحضانة. \u003c\/p\u003e\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\n\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e\u003cbr\u003e\n مبدأ فحص تحديد IC50\/Ki\u003cbr\u003e \nيُكشف عن ارتباط ستاوروسبورين-ريد باستخدام اختبار ساندويتش، وذلك باستخدام جسم مضاد نوعي لـ GST أو 6HIS أو ستربتأفيدين موسوم بكريبتات اليوروبيوم (المانح)، والذي يرتبط بالكيناز الموسوم، وستاوروسبورين أحمر فلوري موسوم بـ d2 (المستقبل). يعتمد مبدأ الكشف على تقنية HTRF®. تزداد نسبة HTRF (665\/620) مع زيادة كمية ستاوروسبورين-ريد، وتصل إلى حد التشبع اعتمادًا على ثابت تفكك (Kd) ستاوروسبورين-ريد مع الكيناز الموسوم. عند إضافة مثبط للكيناز، يُزاح ستاوروسبورين-ريد وتختفي إشارة HTRF، وذلك تبعًا للجرعة. \u003c\/p\u003e\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\n\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e\u003cbr\u003e\n بروتوكول فحص تحديد IC50\/Ki\u003cbr\u003e\n يمكن إجراء التقييمات الدوائية للمثبطات ذات الأهمية في صفائح ذات 96 أو 384 بئراً.\u003cbr\u003e \nأولًا، تُحضّر سلسلة تخفيف للمثبط تتراوح بين 40 ميكرومولار و0.23 نانومولار، ويُوزّع 5 ميكرولتر من كل تركيز في الصفيحة. ثم يُضاف 5 ميكرولتر من الكيناز الموسوم، يليه 5 ميكرولتر من مضاد الوسم Eu-cryptate. أخيرًا، يُضاف 5 ميكرولتر من محلول ستاوروسبورين الأحمر، المُحضّر بتركيز أربعة أضعاف التركيز النهائي. تُقاس نسبة HTRF بعد ساعة واحدة من التحضين.\u003cbr\u003e\n تُظهر تحليلات البيانات منحنيات استجابة نموذجية للجرعة تتراوح بين 10 ميكرومتر و56 بيكومتر، مما يُتيح تقييم قيم IC50\/Ki للمثبط محل الاهتمام. التطبيق: فحص إنزيمي كيميائي حيوي\u003cbr\u003e\n براند-HTRF\u003cbr\u003e\n طريقة الكشف - HTRF\u003cbr\u003e\n مجموعة المنتجات - كاشف فلوري\u003cbr\u003e\n شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف\u003cbr\u003e\n الفئة المستهدفة - الكينازات\u003cbr\u003e\n تقنية TR-FRET\u003cbr\u003e\n المجال العلاجي: الأيض\/السكري، علم الأعصاب، الأورام والالتهابات\u003cbr\u003e\n حجم الوحدة - 20 نانومول\u003c\/p\u003e","brand":"Revvity","offers":[{"title":"Default Title","offer_id":46775317364905,"sku":"62KB01REDE","price":0.99,"currency_code":"USD","in_stock":true}],"url":"https:\/\/iright.com\/ar\/products\/revvity-62kb01rede","provider":"Iright","version":"1.0","type":"link"}