{"product_id":"revvity-62kb02rede","title":"Revvity، 62KB02REDE، HTRF Dasatinib Red Ligand، 20 نانومول","description":"\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e ملخص\u003cbr\u003e\n هذا المركب مشتق من داساتينيب، وهو مثبط معروف لعائلتي كينازات BCR-ABL وSRC. يُستخدم داساتينيب، وهو مثبط تنافسي للكينازات مرتبط بالأدينوسين ثلاثي الفوسفات (ATP)، كدواء لعلاج ابيضاض الدم النخاعي المزمن وابيضاض الدم الليمفاوي الحاد. وقد ثبت أنه يرتبط بتقارب أقل من 100 نانومتر مع حوالي 16% من الكينازات، وبشكل رئيسي مع مستقبلات التيروزين كيناز (RTK). ولذلك، فهو مفيد لدراسة كينازات متعددة في منصة فحص ارتباط الكيناز بتقنية HTRF. يمتص صبغ الفلورسنت \"d2\" المستخدم الضوء عند طول موجي أقصى يقارب 650 نانومتر، ويتألق عند طول موجي يقارب 670 نانومتر. ويُستخدم كجزيء مستقبل في فحوصات HTRF.\u003cbr\u003e\n يتم توفير داساتينيب-ريد كمحلول بتركيز 25 ميكرومتر في ثنائي ميثيل سلفوكسيد (DMSO).\u003cbr\u003e\n توفر فحوصات HTRF العديد من المزايا مقارنة بالتقنيات الأخرى:\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e تنسيق متجانس للإضافة والقراءة\u003cbr\u003e\n لا توجد خطوات غسيل\u003cbr\u003e\n خلفية منخفضة\u003cbr\u003e\n تصغير مباشر من صفائح دقيقة ذات 96 أو 384 بئراً إلى تنسيقات فحص عالية الكثافة مثل صفائح 384 بئراً ذات حجم منخفض وصفائح 1536 بئراً\u003cbr\u003e \nإشارة مستقرة، مما يوفر مرونة في وقت القراءة أو حجم التحليلات\u003cbr\u003e\n كيف يعمل؟\u003cbr\u003e\n تحديد ثابت التفكك (Kd): مبدأ التحليل\u003cbr\u003e\n يُكشف عن ارتباط داساتينيب-ريد باستخدام اختبار ساندويتش، حيث يُستخدم مضاد العلامة الموسوم بكريبتات اليوروبيوم (المانح) الذي يرتبط بالكيناز الموسوم، ومتتبع فلوري أحمر موسوم بـ d2 (المستقبل). يعتمد مبدأ الكشف على تقنية HTRF. تزداد نسبة HTRF (665\/620) بإضافة المزيد من المتتبع، وتصل إلى حد التشبع اعتمادًا على ثابت تفكك (Kd) المتتبع مع الكيناز الموسوم. لمعرفة ما إذا كان داساتينيب-ريد هو المتتبع الأنسب للكيناز الموسوم الذي ترغبون في استخدامه، ننصحكم بتجربة مجموعات اكتشاف ارتباط الكيناز. \u003c\/p\u003e\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\n\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e\u003cbr\u003e\n بروتوكول فحص تحديد ثابت التفكك (Kd)\u003cbr\u003e \nيمكن إجراء تجارب ارتباط التشبع لـ Dasatinib-Red في صفائح ذات 96 أو 384 بئرًا (بحجم نهائي 20 ميكرولتر). أولًا، تُحضّر سلسلة تخفيف تتراوح بين 0 و1 ميكرومول من Dasatinib-Red في محلول ارتباط الكيناز في صفيحة غير مرتبطة ذات 96 بئرًا. بعد ذلك، يُضاف 5 ميكرولتر من محلول ارتباط الكيناز إلى الصفيحة النهائية ذات 96 أو 384 بئرًا. ثم يُضاف 5 ميكرولتر من الكيناز الموسوم، يليه 5 ميكرولتر من مضاد الوسم Eu-cryptate. أخيرًا، يُضاف 5 ميكرولتر من محلول التتبع الأحمر. تُقاس نسبة HTRF بعد ساعة واحدة من التحضين. \u003c\/p\u003e\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\n\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e\u003cbr\u003e\n مبدأ فحص تحديد IC50\/Ki\u003cbr\u003e \nيُكشف عن ارتباط داساتينيب-ريد باستخدام اختبار ساندويتش، وذلك باستخدام جسم مضاد نوعي لـ GST أو 6HIS أو ستربتأفيدين موسوم بكريبتات اليوروبيوم (المانح)، والذي يرتبط بالكيناز الموسوم، وداساتينيب أحمر فلوري موسوم بـ d2 (المستقبل). يعتمد مبدأ الكشف على تقنية HTRF®. تزداد نسبة HTRF (665\/620) بإضافة المزيد من داساتينيب-ريد، وتصل إلى حد التشبع اعتمادًا على ثابت تفكك (Kd) ستاوروسبورين-ريد للكيناز الموسوم. مع إضافة مثبط للكيناز، يُزاح داساتينيب-ريد وتختفي إشارة HTRF، وذلك تبعًا للجرعة. \u003c\/p\u003e\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\n\n\n\n\u003cp style=\";text-align:right;direction:rtl\"\u003e\u003cbr\u003e\n بروتوكول فحص تحديد IC50\/Ki\u003cbr\u003e\n يمكن إجراء التقييم الدوائي للمثبطات ذات الأهمية في صفائح ذات 96 أو 384 بئراً.\u003cbr\u003e \nأولًا، تُحضّر سلسلة تخفيف للمثبط تتراوح تراكيزها بين 40 ميكرومولار و0.23 نانومولار، حيث يُوضع 5 ميكرولتر من كل تركيز في الصفيحة. ثم يُضاف 5 ميكرولتر من الكيناز الموسوم، يليه 5 ميكرولتر من مضاد الوسم Eu-cryptate. أخيرًا، يُضاف 5 ميكرولتر من محلول داساتينيب الأحمر، المُحضّر بتركيز أربعة أضعاف التركيز النهائي. تُقاس نسبة HTRF بعد ساعة واحدة من التحضين.\u003cbr\u003e\n تُظهر تحليلات البيانات منحنيات استجابة نموذجية للجرعة تتراوح بين 10 ميكرومتر و56 بيكومتر، مما يُتيح تقييم قيم IC50\/Ki للمثبط محل الاهتمام. التطبيق: فحص إنزيمي كيميائي حيوي\u003cbr\u003e\n براند-HTRF\u003cbr\u003e\n طريقة الكشف - HTRF\u003cbr\u003e\n مجموعة المنتجات - كاشف فلوري\u003cbr\u003e\n شروط الشحن - يتم الشحن باستخدام الثلج الجاف\u003cbr\u003e\n الفئة المستهدفة - الكينازات\u003cbr\u003e\n تقنية TR-FRET\u003cbr\u003e\n المجال العلاجي: الأيض\/السكري، علم الأعصاب، الأورام والالتهابات\u003cbr\u003e\n حجم الوحدة - 20 نانومول\u003c\/p\u003e","brand":"Revvity","offers":[{"title":"Default Title","offer_id":46775244914857,"sku":"62KB02REDE","price":0.99,"currency_code":"USD","in_stock":true}],"url":"https:\/\/iright.com\/ar\/products\/revvity-62kb02rede","provider":"Iright","version":"1.0","type":"link"}