{"product_id":"neb-m0304s","title":"New England Biolabs, M0304S, Endonucleasa IV","description":"\u003cb\u003eCategorías relacionadas\u003c\/b\u003e Enzimas de reparación de ADN y endonucleasas específicas de la estructura \u003cb\u003eEspecificación\u003c\/b\u003e \u003cb\u003eUnidad Definición\u003c\/b\u003e Una unidad se define como la cantidad de enzima necesaria para escindir 1 pmol de un dúplex de oligonucleótidos de 34 meros que contiene un único sitio AP* en un volumen de reacción total de 10 μl en 1 hora a 37 °C. *Un sitio AP se crea tratando 10 pmol de un dúplex de oligonucleótidos de 34 meros que contiene un único residuo de uracilo con 1 unidad de uracil-ADN glicosilasa (UDG) durante 2 minutos a 37 °C. \u003cb\u003eCondiciones de reacción\u003c\/b\u003e 1X NEBuffer™ 3 Incubar a 37 °C 1X NEBuffer™ 3 100 mM NaCl 50 mM Tris-HCl 10 mM MgCl2 1 mM DTT (pH 7,9 a 25 °C) \u003cb\u003eTampón de almacenamiento\u003c\/b\u003e 10 mM Tris-HCl 250 mM NaCl 1 mM DTT 0,1 mM EDTA 200 µg\/ml BSA 50 % Glicerol 0,15 % Triton® X-100 pH 7,4 a 25 °C \u003cb\u003eInactivación por calor\u003c\/b\u003e 85 °C durante 20 minutos \u003cb\u003eCondiciones del ensayo unitario\u003c\/b\u003e 1X NEBuffer 3 que contiene 10 pmol de dúplex de oligonucleótidos marcados con fluorescencia en un volumen de reacción total de 10 μl. \u003cb\u003ePreguntas frecuentes\u003c\/b\u003e P: ¿Cuál es la actividad de la endonucleasa IV en los NEBuffers? A: El tampón óptimo de Endo IV es 1X NEBuffer 3. No tiene actividad en NEBuffer 1, 100% en NEBuffer 2 y 25% en NEBuffer 4. P: ¿Cuál es el peso molecular de la Endonucleasa IV? R: El peso molecular de la Endonucleasa IV es de 31 kDa. P: ¿La Endonucleasa IV escinde el ssDNA? R: Sí, la Endonucleasa IV escinde sitios abásicos tanto en ssDNA como en dsDNA. P: ¿El extremo 5' que queda por una escisión de Endonucleasa IV será adecuado para la ligadura posterior por la ADN ligasa T4? R: El extremo 5' generado por la escisión de Endonucleasa IV no es adecuado para la ligadura. P: Además de los sitios AP, ¿la Endonucleasa IV tiene actividad de escisión en otros tipos de daño del ADN? R: La Endo IV también reconoce 5,6-dihidrotimina. Sin embargo, su actividad en este sustrato es menor que en los sitios AP. Para más información, consulte esta página en nuestro sitio web: (Enzimas Reparadoras de ADN). P: ¿Es posible crear un sitio abásico y luego escindirlo con la Endonucleasa IV en la misma reacción? ¿Cuál es la actividad de la uracil-ADN-glicosilasa (cat. n.° M0280S) en el tampón de Endonucleasa IV? R: El tampón de Endonucleasa IV es el tampón NE 3. La UDG es 100 % activa en el tampón NE 3 y, por lo tanto, es posible realizar ambas reacciones en dicho tampón.","brand":"New England Biolabs","offers":[{"title":"Default Title","offer_id":46835528237225,"sku":"M0304S","price":0.99,"currency_code":"USD","in_stock":true}],"url":"https:\/\/iright.com\/es\/products\/neb-m0304s","provider":"Iright","version":"1.0","type":"link"}