{"product_id":"neb-m0527s","title":"New England Biolabs, M0527S, Msz Exonucleasa I","description":"\u003cb\u003eCategorías relacionadas\u003c\/b\u003e Exonucleasas y endonucleasas no específicas \u003cb\u003eEspecificación\u003c\/b\u003e \u003cb\u003eUnidad Definición\u003c\/b\u003e Una unidad de Msz Exonucleasa I se define como la cantidad de enzima que catalizará la liberación de 5 nmol de nucleótido soluble en ácido en un volumen de reacción total de 100 μl en 15 minutos a 55 °C en tampón rCutSmart 1X. \u003cb\u003eCondiciones de reacción\u003c\/b\u003e Tampón rCutSmart™ 1X Incubar a 55 °C Tampón rCutSmart™ 1X Acetato de potasio 50 mM Tris-acetato 20 mM Acetato de magnesio 10 mM Albúmina recombinante 100 µg\/ml (pH 7,9 a 25 °C) \u003cb\u003eInactivación por calor\u003c\/b\u003e 80 °C durante 1 minuto \u003cb\u003ePreguntas frecuentes\u003c\/b\u003e P: ¿Cuál es el rango de temperatura de reacción óptimo para la actividad de Msz Exonucleasa I? R: La Msz Exonucleasa I es más activa entre 50 °C y 58 °C. No se recomiendan temperaturas inferiores a 45 °C ni superiores a 60 °C. P: ¿Puede la Msz Exonucleasa I eliminar cebadores en reacciones de PCR anidadas? R: Sí, añada 1 µl de Msz Exonucleasa I a la primera ronda de productos de PCR (hasta 20 µl) e incube la reacción a 55 °C durante 15 minutos, seguido de 80 °C durante 1 minuto para inactivar la enzima. A continuación, se pueden añadir nuevos conjuntos de cebadores seguidos de una segunda ronda de PCR para reducir los amplicones de PCR inespecíficos. P: ¿Puede utilizarse la Msz Exonucleasa I para embotar el dsADN? R: No. Los extremos cortos del ssADN no son un sustrato. Utilice la ADN polimerasa I, fragmento Klenow grande (NEB n.º M0210) para rellenar los salientes de 5′ y masticar los salientes de 3′, o utilice la nucleasa de frijol mungo (NEB n.º M0250) para masticar los salientes de 3′ o 5′. Nota: Los salientes de 3′ no se pueden rellenar. P: ¿Se puede inactivar por calor la Msz Exonucleasa I? R: Sí. Inactive la enzima por calor a 80 °C durante 1 minuto. P: ¿Se puede utilizar la Msz Exonucleasa I con una exonucleasa bicatenaria para limpiar preparaciones de plásmidos? R: No se recomienda. La mejor enzima para limpiar la contaminación del ADN genómico en preparaciones de plásmidos es la exonucleasa V (RecBCD, NEB n.º M0345). P: ¿Funcionará la Msz Exonucleasa I en otros tampones? R: Sí. La mayoría de los tampones de PCR son compatibles. No se necesita ningún tampón de reacción adicional si se añade la enzima a una reacción de PCR. La incubación en los siguientes tampones a 55 °C durante 15 minutos produjo la actividad relativa indicada: % de actividad del tampón NE r1.1 (NEB# B7030) 20 r2.1 (NEB# B6002) 50 r3.1 (NEB# B6003) 50 rCutSmartTM (NEB# B6004) 100 Tampón de reacción de exonucleasa I (NEB# B0293) 10 ThermoPol (NEB# B9004) 90","brand":"New England Biolabs","offers":[{"title":"Default Title","offer_id":46835522371753,"sku":"M0527S","price":0.99,"currency_code":"USD","in_stock":true}],"url":"https:\/\/iright.com\/es\/products\/neb-m0527s","provider":"Iright","version":"1.0","type":"link"}