{"product_id":"neb-n0469s","title":"New England Biolabs, N0469S, escalera de ADN Quick-Load® 1 kb Plus","description":"\u003cb\u003eCategorías relacionadas\u003c\/b\u003e Marcadores y escaleras de ADN \u003cb\u003eAplicaciones\u003c\/b\u003e Análisis de ADN \u003cb\u003eEspecificación\u003c\/b\u003e \u003cb\u003eBases\u003c\/b\u003e Fragmento Masa (ng) pb 1 40 10.002 2 40 8.001 3 48 6.001 4 40 5.001 5 32 4.001 6 120 3.001 7 40 2.017 8 57 1.517 9 45 1.200 10 122 1.000 11 34 900 12 31 800 13 27 700 14 23 600 15 124 500 \/ 517 16 49 400 17 37 300 18 32 200 19 61 100 \u003cb\u003eRango de tamaño efectivo\u003c\/b\u003e 100 pb a 10 002 pb \u003cb\u003eTampón de almacenamiento\u003c\/b\u003e 3,3 mM Tris-HCl 11 mM EDTA 0,015 % azul de bromofenol 0,017 % SDS 2,5 % Ficoll®-400 pH 8 a 25 °C \u003cb\u003ePreguntas frecuentes\u003c\/b\u003e P: ¿Por qué aparecen las bandas de escalera de ADN en mi Southern blot? ¿Cuál es la secuencia o composición de las bandas de escalera? R: Este fenómeno se ha observado en diversos laboratorios y, aunque no tenemos una explicación definitiva, existen dos posibles causas de la aparentemente improbable hibridación de la sonda del usuario con el ADN de la banda de escalera. Una de ellas es que, si la sonda se generó a partir de un plásmido basado en pUC o pBR, podría existir un bajo nivel de contaminación plasmídica en la sonda que hibrida con las bandas de la escalera, la mayoría de las cuales contienen secuencias similares a pUC. Alternativamente, podría existir una homología aleatoria de baja especificidad entre la sonda y algún segmento de los fragmentos de la escalera. Las bandas están compuestas íntegramente por ADN derivado de pUC o ADN del adenovirus 2, que se utiliza como ADN de relleno para generar plásmidos del tamaño adecuado para los marcadores. Dado que la cantidad molar de ADN en las bandas de la escalera suele ser muy superior a la del ADN que se está sondeando, incluso una homología relativamente baja puede resultar en una incorporación suficiente de la sonda para obtener una señal fácilmente detectable. P: ¿Cómo puedo cuantificar la cantidad de ADN en cada banda de un marcador? R: La cantidad de ADN en cada banda se puede determinar dividiendo el tamaño (pb) de la banda en cuestión por el tamaño (pb) de la molécula de ADN sin cortar y multiplicando este número por el total de ug de marcador de ADN cargado en el gel. P: ¿Puedo usar Midori Green con las escaleras de ADN de NEB? R: Las escaleras de ADN de NEB, incluyendo la escalera de ADN Quick-Load Purple 1 kb Plus (NEB #N0550), son compatibles con el colorante Midori Green sin observar interferencias. Por favor, siga las recomendaciones del fabricante del colorante exactamente. Debido a la baja intensidad del colorante, es posible que necesite cargar entre 1 y 2 ug de la escalera de ADN para lograr una buena visualización en condiciones estándar de iluminación UV. P: ¿Puedo usar colorantes SYBR® y\/o GelRed® con las escaleras de ADN de NEB? R: Debido a que los colorantes de alta afinidad de unión a ácidos nucleicos pueden afectar la migración del ADN durante la electroforesis, se recomienda encarecidamente la tinción posterior de los geles con los colorantes SYBR y GelRed. La tinción post-electroforesis ofrece una sensibilidad superior y elimina la posibilidad de interferencia del colorante con la migración del ADN. Si bien los geles de agarosa se pueden prefabricar con estos colorantes, la migración o resolución de algunas escalas de ADN puede verse afectada. Por lo tanto, algunas escalas de ADN pueden requerir optimización\/dilución al procesarse en geles prefabricados con estos colorantes. Para obtener resultados óptimos, siga atentamente las recomendaciones y protocolos del fabricante del colorante, especialmente en lo que respecta a las cantidades de carga. Recomendamos utilizar nuestra escala de ADN Plus de 1 kb para tinciones seguras (NEB n.° N0559) al utilizar SYBR o GelRed como colorantes prefabricados, ya que esta escala de ADN se optimizó específicamente para esta aplicación. Además, evite utilizar colorantes de carga que contengan SDS, ya que este podría causar un patrón de bandas anormal en los geles prefabricados. Recomendamos utilizar el colorante de carga de gel púrpura (6X), sin SDS (NEB n.° B7025) para esta aplicación. P: ¿Por qué mi escalera de ADN flota fuera de los pocillos? ¿Por qué no se ven bandas en la línea de gel de mi escalera de ADN? R: Si la escalera de ADN lista para cargar o el colorante de carga 6X que viene con la escalera se ha congelado en algún momento, el Ficoll formará un gradiente de densidad en el vial al descongelarse. Cualquier volumen pipeteado desde la parte superior del vial contendrá solo una pequeña cantidad de agente densificador y flotará fuera de los pocillos. Para evitar esto, mezcle bien al recibirlo y antes de usarlo. P: ¿Cuáles son las diferencias entre las cuatro versiones de las escaleras de ADN de 1 kb Plus (anteriormente llamada escalera de ADN de 2 logs), de 100 pb y de 1 kb que vende NEB? R: Estas escaleras vienen en cuatro formatos. Elija entre la escalera convencional, la versión Quick-Load® que utiliza colorante púrpura no fluorescente (NEB n.° B7024) o azul de bromofenol como colorante de adhesión, o TriDye™, que contiene tres colorantes que sirven como colorante visual. Ayuda a monitorizar el progreso de la migración durante la electroforesis en gel de agarosa. Las versiones de carga rápida también incluyen un vial de colorante de carga gratuito.","brand":"New England Biolabs","offers":[{"title":"Default Title","offer_id":46835532169385,"sku":"N0469S","price":0.99,"currency_code":"USD","in_stock":true}],"url":"https:\/\/iright.com\/es\/products\/neb-n0469s","provider":"Iright","version":"1.0","type":"link"}