{"product_id":"neb-r0148l","title":"Laboratorios biológicos de Nueva Inglaterra, R0148L, MboII","description":"MboII ha sido reformulado con albúmina recombinante (rAlbúmina) a partir del lote n.º 10240211. \u003cb\u003eCategorías relacionadas\u003c\/b\u003e Endonucleasas de restricción \u003cb\u003eAplicaciones\u003c\/b\u003e HM Digestión con enzimas de restricción \u003cb\u003eUnidad\u003c\/b\u003e \u003cb\u003ede especificación\u003c\/b\u003e Definición Una unidad se define como la cantidad de enzima necesaria para digerir 1 µg de ADN λ (dam-) en 1 hora a 37 °C en un volumen de reacción total de 50 μl. \u003cb\u003eCondiciones de reacción\u003c\/b\u003e Tampón rCutSmart™ 1X Incubar a 37 °C Tampón rCutSmart™ 1X Acetato de potasio 50 mM Tris-acetato 20 mM Acetato de magnesio 10 mM Albúmina recombinante 100 µg\/ml (pH 7,9 a 25 °C) \u003cb\u003eActividad en tampones\u003c\/b\u003e NE Tampón NE™ r1.1: 100 % Tampón NE™ r2.1: 100 % Tampón NE™ r3.1: 50 % Tampón rCutSmart™: 100 % \u003cb\u003eCompatibilidad del diluyente\u003c\/b\u003e Diluyente C \u003cb\u003eTampón de almacenamiento\u003c\/b\u003e Tris-HCl 10 mM NaCl 250 mM DTT 1 mM EDTA 0,1 mM 200 µg\/ml Albúmina recombinante 50 % Glicerol 0,15 % Triton® X-100 pH 7,4 a 25 °C \u003cb\u003eInactivación por calor\u003c\/b\u003e 65 °C durante 20 minutos \u003cb\u003eSensibilidad a la metilación\u003c\/b\u003e dam methylation: Bloqueada por superposición dcm methylation: No sensible CpG methylation: No sensible \u003cb\u003ePreguntas frecuentes\u003c\/b\u003e P: ¿Por qué es difícil ligar el ADN cortado con MboII? R: MboII produce fragmentos de ADN que tienen una extensión 3' de una sola base que son más difíciles de ligar que los fragmentos de extremos romos. P: ¿Se recomienda la digestión prolongada de MboII? R: La digestión prolongada no es beneficiosa porque la enzima no es estable en la reacción. P: Probé su enzima de restricción en el ADN sustrato recomendado por NEB y parece estar activo, sin embargo, no digiere mi ADN. ¿Cuál podría ser la razón? R: La calidad y la limpieza del ADN son factores principales que pueden afectar la actividad enzimática. Las enzimas de restricción activas en el tampón rCutSmart®, pero no tan activas en el tampón NE r2.1 o r3.1 (nuestros tampones con mayor concentración de sal), pueden ser inhibidas por la sal presente en la reacción. Los procedimientos de purificación de ADN que utilizan columnas de centrifugación pueden generar soluciones de ADN con niveles significativos de sal que pueden transferirse a la reacción e inhibir la actividad enzimática. Para evitar esto, recomendamos que la solución de ADN añadida a la reacción no supere el 25 % del volumen total de reacción. Esto se puede lograr ajustando el volumen total de reacción según corresponda. P: ¿Qué enzimas de restricción NEB se suministran con el colorante de carga de gel morado (6X)? R: Todas las enzimas de restricción HF y la mayoría de las enzimas de restricción NEB sin HF se suministran con el colorante de carga de gel morado (6X). Las enzimas de restricción no HF que vienen suministradas con el tinte púrpura son: AatII AsiSI BsmBI-v2 EagI MboI NlaIII PvuI SmaI Acil AvrII BspHI EcoRI MboII NotI RsaI SpeI AfeI BamHI BsrGI EcoRV MluI NspI SacI StuI AflII BbsI ClaI Esp3I FseI MseI PacI SacII AgeI BglII DdeI HaeIII MspI PciI SalI XbaI AluI BsaI DpnI HindIII NcoI PmeI SapI XhoI ApaI BseYI DpnII HpaI NdeI PsiI-v2 SfaNI XmaI ApeKI BsiWI DraI KpnI NheI PstI SfiI XmnI AscI * Todas las enzimas de restricción HF también se suministran con tinte de carga en gel, morado (6X) P: ¿Esta enzima es sensible a ¿Metilación de dam, dcm o CpG de mamíferos? R: Sí. Esta enzima no puede cortar los sitios de reconocimiento bloqueados por la metilación de dam superpuesta. Para obtener información actualizada sobre la sensibilidad a la metilación, visite Dam-Dcm y metilación de CpG o REBASE. P: ¿Pueden darme más información sobre la transición de BSA a albúmina recombinante (albúmina recombinante) en los tampones NEB? R: NEB se complace en anunciar la transición de los tampones de reacción con BSA (NEBuffer 1.1, 2.1, 3.1 y CutSmart® Buffer) a tampones con albúmina recombinante (NEBuffer r1.1, r2.1, r3.1 y rCutSmart™ Buffer). También estamos en proceso de adaptar todas las formulaciones de enzimas de restricción para que contengan albúmina recombinante. Creemos que dejar de usar productos con ingredientes de origen animal es un paso en la dirección correcta y podemos ofrecer esta mejora al mismo precio.","brand":"New England Biolabs","offers":[{"title":"Default Title","offer_id":46835532988585,"sku":"R0148L","price":0.99,"currency_code":"USD","in_stock":true}],"url":"https:\/\/iright.com\/es\/products\/neb-r0148l","provider":"Iright","version":"1.0","type":"link"}