{"product_id":"neb-r0526s","title":"Laboratorios biológicos de Nueva Inglaterra, R0526S, AseI","description":"AseI ha sido reformulado y ahora también incluye albúmina recombinante (rAlbúmina) a partir del lote n.º 10237499. \u003cb\u003eCategorías relacionadas\u003c\/b\u003e Endonucleasas de restricción: A,, Enzimas de restricción calificadas que ahorran tiempo \u003cb\u003eAplicaciones\u003c\/b\u003e Clonación rápida: acelere sus flujos de trabajo de clonación con reactivos de NEB,, \u003cb\u003eEspecificación\u003c\/b\u003e de digestión con enzimas de restricción \u003cb\u003eDefinición de unidad\u003c\/b\u003e Una unidad se define como la cantidad de enzima necesaria para digerir 1 µg de ADN λ en 1 hora a 37 °C en un volumen de reacción total de 50 μl. \u003cb\u003eCondiciones de reacción\u003c\/b\u003e 1X NEBuffer™ r3.1 Incubar a 37 °C 1X NEBuffer™ r3.1 100 mM NaCl 50 mM Tris-HCl 10 mM MgCl2 100 µg\/ml Albúmina recombinante (pH 7,9 a 25 °C) \u003cb\u003eActividad en NEBuffers\u003c\/b\u003e NEBuffer™ r1.1: \u0026lt;10 % NEBuffer™ r2.1: 50 % NEBuffer™ r3.1: 100 % Tampón rCutSmart™: 10 % \u003cb\u003eCompatibilidad del diluyente\u003c\/b\u003e Diluyente B \u003cb\u003eTampón de almacenamiento\u003c\/b\u003e 10 mM Tris-HCl 500 mM KCl 1 mM DTT 0,1 mM EDTA 200 µg\/ml Albúmina recombinante 50 % Glicerol pH 7,4 a \u003cb\u003eInactivación por calor\u003c\/b\u003e a 25 °C a 65 °C durante 20 minutos \u003cb\u003eSensibilidad a la metilación\u003c\/b\u003e Metilación en dam: No sensible Metilación en dcm: No sensible Metilación en CpG: No sensible \u003cb\u003ePreguntas frecuentes\u003c\/b\u003e P: ¿Qué es la actividad estrella y cómo se puede evitar? R: Se ha demostrado que, en condiciones extremas no estándar, las endonucleasas de restricción son capaces de escindir secuencias que son similares, pero no idénticas, a su secuencia de reconocimiento definida. Esta especificidad alterada o relajada se ha denominado actividad \"estrella\". Se ha sugerido que la actividad estrella puede ser una propiedad general de las endonucleasas de restricción y que cualquier endonucleasa de restricción puede ser capaz de escindir sitios no canónicos en ciertas condiciones extremas. La manera en que se altera la especificidad de una enzima depende de la enzima y de las condiciones empleadas para inducir la actividad estrella. Los tipos más comunes de actividad alterada son las sustituciones de bases individuales, el truncamiento de las bases externas en la secuencia de reconocimiento y el mellado de cadena sencilla. La actividad estrella es completamente controlable en la gran mayoría de los casos y generalmente no es una preocupación cuando se realizan digestas de endonucleasas de restricción. Las enzimas de New England Biolabs no exhibirán actividad estrella cuando se usen bajo las condiciones recomendadas en sus NEBuffers suministrados. A continuación se enumeran las condiciones de reacción que se sabe que inducen o inhiben la actividad estrella. Condiciones que contribuyen a la actividad estrella 1. Alta concentración de glicerol [\u0026gt; 5% v\/v] 2. Alta proporción de unidades a µg de ADN [varía con cada enzima, usualmente \u0026gt;100 unidades\/µg] 3. Baja fuerza iónica [\u0026lt; 25 mM] 4. Alto pH [\u0026gt; pH 8.0] 5. Presencia de solventes orgánicos [DMSO, etanol, etilenglicol, dimetilacetamida, dimetilformamida, sulfalano] 6. Sustitución de Mg++ con otros cationes divalentes [Mn++, Cu++, Co++, Zn++] Inhibición de la actividad estrella Si le preocupa la actividad estrella, le recomendamos las siguientes pautas. 1. Use la menor cantidad de unidades posible para lograr una digestión completa. Esto evita la sobredigestión y reduce la concentración final de glicerol en la reacción. 2. Asegúrese de que la reacción esté libre de cualquier disolvente orgánico, como alcoholes, que pueda estar presente en la preparación de ADN. 3. Aumente la fuerza iónica del tampón de reacción a 100-150 mM (siempre que la enzima no se vea inhibida por un alto contenido de sal). 4. Disminuya el pH del tampón de reacción a pH 7.0. 5. Use Mg++ como catión divalente. P: ¿Tengo que configurar las digestaciones con enzimas calificadas Time-Saver™ durante 5-15 minutos? ¿Puedo digerir durante más tiempo? R: Las enzimas Time-Saver™ de NEB tienen la ventaja de actuar rápidamente (5-15 minutos), pero también están diseñadas y calificadas para soportar digestaciones nocturnas sin degradación del ADN. P: ¿Esta enzima es sensible a la metilación de CpG de DAM, DCM o mamíferos? R: No. Esta enzima no es sensible a la metilación de DAM, DCM ni a la metilación de CpG de mamíferos. Para obtener información actualizada sobre la sensibilidad a la metilación, visite Dam-DCM y metilación de CpG o REBASE. P: ¿Pueden darme más información sobre la transición de BSA a albúmina recombinante (albúmina recombinante) en los tampones NEB? R: NEB se complace en anunciar que hemos cambiado los tampones de reacción con BSA (NEBuffer 1.1, 2.1, 3.1 y CutSmart® Buffer) a tampones con albúmina recombinante (NEBuffer r1.1, r2.1, r3.1 y rCutSmart™ Buffer). También estamos en proceso de adaptar todas las formulaciones de enzimas de restricción para que contengan albúmina recombinante. Creemos que dejar de usar productos de origen animal es un paso en la dirección correcta y podemos ofrecer esta mejora al mismo precio.","brand":"New England Biolabs","offers":[{"title":"Default Title","offer_id":46835527352489,"sku":"R0526S","price":0.99,"currency_code":"USD","in_stock":true}],"url":"https:\/\/iright.com\/es\/products\/neb-r0526s","provider":"Iright","version":"1.0","type":"link"}