{"product_id":"neb-r0582s","title":"Laboratorios biológicos de Nueva Inglaterra, R0582S, TspRI","description":"TspRI ha sido reformulado con albúmina recombinante (rAlbúmina) a partir del lote n.º 10201942. \u003cb\u003eCategorías relacionadas\u003c\/b\u003e Endonucleasas de restricción TZ,, Enzimas de restricción calificadas que ahorran tiempo \u003cb\u003eAplicaciones\u003c\/b\u003e Clonación rápida: acelere sus flujos de trabajo de clonación con reactivos de NEB,, \u003cb\u003eEspecificación\u003c\/b\u003e de digestión con enzimas de restricción \u003cb\u003eDefinición de unidad\u003c\/b\u003e Una unidad se define como la cantidad de enzima necesaria para digerir 1 µg de ADN λ en 1 hora a 65 °C en un volumen de reacción total de 50 μl. \u003cb\u003eCondiciones de reacción\u003c\/b\u003e Tampón rCutSmart™ 1X Incubar a 65 °C Tampón rCutSmart™ 1X Acetato de potasio 50 mM Tris-acetato 20 mM Acetato de magnesio 10 mM Albúmina recombinante 100 µg\/ml (pH 7,9 a 25 °C) \u003cb\u003eActividad en tampones NE\u003c\/b\u003e Tampón NE™ r1.1: 25 % Tampón NE™ r2.1: 50 % Tampón NE™ r3.1: 25 % Tampón rCutSmart™: 100 % \u003cb\u003eCompatibilidad del diluyente\u003c\/b\u003e Diluyente B \u003cb\u003eTampón de almacenamiento\u003c\/b\u003e Tris-HCl 10 mM NaCl 200 mM DTT 1 mM EDTA 0,1 mM 200 µg\/ml Albúmina recombinante 50 % Glicerol pH 7,4 @ 25 °C \u003cb\u003eInactivación por calor\u003c\/b\u003e Sin \u003cb\u003esensibilidad a la metilación\u003c\/b\u003e Metilación de dam: No sensible Metilación de dcm: No sensible Metilación de CpG: No sensible \u003cb\u003eActividad a temperatura\u003c\/b\u003e a 37 °C: 10 % \u003cb\u003ePreguntas frecuentes\u003c\/b\u003e P: ¿Los sitios de reconocimiento degenerados deben ser palindrómicos? R: La mayoría de los sitios de reconocimiento de enzimas de restricción son palindrómicos e incluyen solo pares de bases específicos (es decir, EcoRI reconoce GAATTC). Sin embargo, algunas enzimas tienen sitios degenerados, lo que significa que contienen uno o más pares de bases que no están específicamente definidos (es decir, BsrFI-v2 reconoce RCCGGY, donde R = A o G e Y = C o T). Para enzimas degeneradas, cualquier base representada por el código de una sola letra puede estar presente en cualquier ubicación en el sitio de reconocimiento para que ocurra la escisión. Por ejemplo, BsrFI-v2 reconoce todas las siguientes secuencias: ACCGGC, ACCGGT, GCCGGC, GCCGGT. P: ¿Cómo se puede inactivar esta enzima? R: Para inactivar las enzimas que no se pueden eliminar por calor, recomendamos una extracción con fenol seguida de una precipitación con etanol o una columna de centrifugación comercial diseñada para purificar ADN. P: ¿Tengo que preparar las digestivas con enzimas calificadas Time-Saver™ durante 5 a 15 minutos? ¿Puedo digerir durante más tiempo? R: Las enzimas Time-Saver™ de NEB tienen la ventaja de actuar rápidamente (5 a 15 minutos), pero también están diseñadas y calificadas para soportar digestores nocturnos sin degradar el ADN. P: Probé su enzima de restricción en el ADN sustrato recomendado por NEB y parece estar activa; sin embargo, no digiere mi ADN. ¿Cuál podría ser la razón? R: La calidad y la limpieza del ADN son factores importantes que pueden afectar la actividad enzimática. Las enzimas de restricción activas en el tampón rCutSmart®, pero no tan activas en el tampón NE r2.1 o r3.1 (nuestros tampones con mayor concentración de sal), pueden verse inhibidas por la sal en la reacción. Los procedimientos de purificación de ADN que utilizan columnas de centrifugación pueden generar soluciones de ADN con niveles significativos de sal que pueden pasar a la reacción e inhibir la actividad enzimática. Para evitarlo, recomendamos que la solución de ADN añadida a la reacción no supere el 25 % del volumen total de reacción. Esto se puede lograr ajustando el volumen total de reacción según corresponda. P: ¿Es esta enzima sensible a la metilación de DAM, DCM o CpG de mamíferos? R: No. Esta enzima no es sensible a la metilación de DAM, DCM ni CpG de mamíferos. Para obtener información actualizada sobre la sensibilidad a la metilación, visite Dam-DCM y metilación de CpG o REBASE. P: ¿Pueden darme más información sobre el cambio de BSA a albúmina recombinante (rAlbúmina) en los tampones NE? A: NEB se complace en anunciar que hemos cambiado los tampones de reacción con BSA (NEBuffer 1.1, 2.1, 3.1 y CutSmart® Buffer) por tampones con albúmina recombinante (NEBuffer r1.1, r2.1, r3.1 y rCutSmart™ Buffer). También estamos en proceso de adaptar todas las formulaciones de enzimas de restricción para que contengan albúmina recombinante. Creemos que dejar de usar productos con ingredientes de origen animal es un paso en la dirección correcta y podemos ofrecer esta mejora al mismo precio.","brand":"New England Biolabs","offers":[{"title":"Default Title","offer_id":46835526041769,"sku":"R0582S","price":0.99,"currency_code":"USD","in_stock":true}],"url":"https:\/\/iright.com\/es\/products\/neb-r0582s","provider":"Iright","version":"1.0","type":"link"}