{"product_id":"neb-r0583l","title":"Laboratorios biológicos de Nueva Inglaterra, R0583L, Tsp45I","description":"\u003cb\u003eCategorías relacionadas\u003c\/b\u003e Endonucleasas de restricción \u003cb\u003eAplicaciones de\u003c\/b\u003e TZ Digestión con enzimas de restricción Unidad \u003cb\u003ede especificación\u003c\/b\u003e \u003cb\u003eDefinición\u003c\/b\u003e Una unidad se define como la cantidad de enzima necesaria para digerir 1 µg de ADN λ en 1 hora a 65 °C en un volumen de reacción total de 50 μl. \u003cb\u003eCondiciones de reacción\u003c\/b\u003e Tampón rCutSmart™ 1X Incubar a 65 °C Tampón rCutSmart™ 1X Acetato de potasio 50 mM Tris-acetato 20 mM Acetato de magnesio 10 mM Albúmina recombinante 100 µg\/ml (pH 7,9 a 25 °C) \u003cb\u003eActividad en tampones\u003c\/b\u003e NE Tampón NE™ r1.1: 100 % Tampón NE™ r2.1: 50 % Tampón NE™ r3.1: \u0026lt;10 % Tampón rCutSmart™: 100 % \u003cb\u003eCompatibilidad del diluyente\u003c\/b\u003e Diluyente A \u003cb\u003eTampón de almacenamiento\u003c\/b\u003e Tris-HCl 20 mM DTT 0,1 mM EDTA 200 µg\/ml BSA 50 % Glicerol 0,15 % Triton® X-100 pH 7,4 a 25 °C \u003cb\u003eInactivación por calor\u003c\/b\u003e Sin \u003cb\u003esensibilidad a la metilación\u003c\/b\u003e Metilación de dam: no sensible Metilación de dcm: no sensible Metilación de CpG: no sensible \u003cb\u003eActividad a temperatura\u003c\/b\u003e a 37 °C: 10 % \u003cb\u003ePreguntas frecuentes\u003c\/b\u003e P: ¿Los sitios de reconocimiento degenerados deben ser palindrómicos? R: La mayoría de los sitios de reconocimiento de enzimas de restricción son palindrómicos e incluyen solo pares de bases específicos (es decir, EcoRI reconoce GAATTC). Sin embargo, algunas enzimas tienen sitios degenerados, lo que significa que contienen uno o más pares de bases que no están específicamente definidos (es decir, BsrFI-v2 reconoce RCCGGY, donde R = A o G e Y = C o T). Para las enzimas degeneradas, cualquier base representada por el código de una sola letra puede estar presente en cualquier ubicación en el sitio de reconocimiento para que se produzca la escisión. Por ejemplo, BsrFI-v2 reconoce todas las siguientes secuencias: ACCGGC, ACCGGT, GCCGGC, GCCGGT. P: ¿Cómo se puede inactivar esta enzima? R: Para inactivar las enzimas que no se pueden eliminar por calor, recomendamos una extracción con fenol seguida de una precipitación con etanol o una columna de centrifugación comercial diseñada para purificar ADN. P: Probé su enzima de restricción en el ADN sustrato recomendado por NEB y parece estar activa; sin embargo, no digiere mi ADN. ¿Cuál podría ser la razón? R: La calidad y la limpieza del ADN son factores importantes que pueden afectar la actividad enzimática. Las enzimas de restricción activas en el tampón rCutSmart®, pero no tan activas en el tampón NE r2.1 o r3.1 (nuestros tampones con mayor concentración de sal), pueden verse inhibidas por la sal presente en la reacción. Los procedimientos de purificación de ADN que utilizan columnas de centrifugación pueden generar soluciones de ADN con niveles significativos de sal que pueden transferirse a la reacción e inhibir la actividad enzimática. Para evitar esto, recomendamos que la solución de ADN añadida a la reacción no supere el 25 % del volumen total de la reacción. Esto se puede lograr ajustando el volumen total de la reacción según corresponda. P: ¿Es esta enzima sensible a la metilación de CpG de DAM, DCM o mamíferos? R: No. Esta enzima no es sensible a la metilación de DAM, DCM ni a la metilación de CpG de mamíferos. Para obtener información actualizada sobre la sensibilidad a la metilación, visite Dam-DCM y metilación de CpG o REBASE. P: ¿Pueden darme más información sobre la transición de BSA a albúmina recombinante (albúmina recombinante) en los tampones NEB? R: NEB se complace en anunciar que hemos cambiado los tampones de reacción con BSA (NEBuffer 1.1, 2.1, 3.1 y CutSmart® Buffer) a tampones con albúmina recombinante (NEBuffer r1.1, r2.1, r3.1 y rCutSmart™ Buffer). También estamos en proceso de adaptar todas las formulaciones de enzimas de restricción para que contengan albúmina recombinante. Creemos que dejar de usar productos de origen animal es un paso en la dirección correcta y podemos ofrecer esta mejora al mismo precio.","brand":"New England Biolabs","offers":[{"title":"Default Title","offer_id":46835542491305,"sku":"R0583L","price":0.99,"currency_code":"USD","in_stock":true}],"url":"https:\/\/iright.com\/es\/products\/neb-r0583l","provider":"Iright","version":"1.0","type":"link"}