{"product_id":"neb-r0596s","title":"Laboratorios Biológicos de Nueva Inglaterra, R0596S, BciVI","description":"BciVI ha sido reformulado con albúmina recombinante (rAlbúmina) a partir del lote n.º 10317355. \u003cb\u003eCategorías relacionadas\u003c\/b\u003e Endonucleasas de restricción B,, Enzimas de restricción calificadas que ahorran tiempo \u003cb\u003eAplicaciones\u003c\/b\u003e \u003cb\u003eEspecificación\u003c\/b\u003e de digestión con enzimas de restricción \u003cb\u003eDefinición de unidad\u003c\/b\u003e Una unidad se define como la cantidad de enzima necesaria para digerir 1 µg de ADN λ en 1 hora a 37 °C en un volumen de reacción total de 50 μl. \u003cb\u003eCondiciones de reacción\u003c\/b\u003e Tampón rCutSmart™ 1X Incubar a 37 °C Tampón rCutSmart™ 1X Acetato de potasio 50 mM Tris-acetato 20 mM Acetato de magnesio 10 mM Albúmina recombinante 100 µg\/ml (pH 7,9 a 25 °C) \u003cb\u003eActividad en tampones\u003c\/b\u003e NE Tampón NE™ r1.1: 100 % Tampón NE™ r2.1: 25 % Tampón NE™ r3.1: \u0026lt;10 % Tampón rCutSmart™: 100 % \u003cb\u003eCompatibilidad del diluyente\u003c\/b\u003e Diluyente C \u003cb\u003eTampón de almacenamiento\u003c\/b\u003e Tris-HCl 10 mM NaCl 250 mM DTT 1 mM EDTA 0,1 mM 200 µg\/ml Albúmina recombinante 50 % Glicerol 0,15 % Triton® X-100 pH 7,4 a 25 °C \u003cb\u003eInactivación por calor\u003c\/b\u003e 80 °C durante 20 minutos \u003cb\u003eSensibilidad a la metilación\u003c\/b\u003e dam methylation: No sensible dcm methylation: No sensible CpG Metilación: No sensible \u003cb\u003ePreguntas frecuentes\u003c\/b\u003e P: ¿La sal inhibe BciVI? R: La actividad disminuye por encima de 50 mM de NaCl. Se recomienda un lavado con etanol al 70 % para el ADN miniprep. P: ¿Se recomienda la digestión prolongada de BciVI? R: La digestión prolongada no es beneficiosa porque la enzima no es estable en la reacción. P: ¿Por qué es difícil ligar el ADN cortado con BciVI? R: Los salientes de un solo par de bases son sustratos pobres para la ADN ligasa T4: se anela muy mal y son tan difíciles de ligar como los fragmentos de ADN con extremos romos. Además, para AlwI el saliente no está restringido a ningún nucleótido en particular; las cuatro bases están representadas de forma aproximadamente igual. En consecuencia, cualquier saliente dado es compatible con solo el 25% de los otros salientes presentes. Esto reduce la eficiencia de la ligadura en relación con los salientes generados por las enzimas de restricción que dejan solo salientes mutuamente compatibles. La eficiencia de la ligadura se puede aumentar utilizando nuestra mezcla maestra de ligasa Blunt\/TA. P: ¿El sitio de reconocimiento es no palindrómico? R: Sí. La secuencia de reconocimiento se puede leer como GTATCC o GGATAC. P: ¿Tengo que configurar las digestaciones con enzimas calificadas Time-Saver™ durante 5-15 minutos? ¿Puedo digerir más tiempo? R: Las enzimas Time-Saver™ de NEB tienen la ventaja de trabajar rápido (5-15 minutos), pero también están diseñadas y calificadas para soportar digestores nocturnos sin degradación del ADN. P: Probé su enzima de restricción en el ADN sustrato recomendado por NEB y parece estar activa, sin embargo, no digiere mi ADN. ¿Cuál podría ser la razón? R: La calidad y la limpieza del ADN son factores principales que pueden afectar la actividad enzimática. Las enzimas de restricción activas en el tampón rCutSmart®, pero no tan activas en el tampón NE r2.1 o r3.1 (nuestros tampones con mayor concentración de sal), pueden ser inhibidas por la sal presente en la reacción. Los procedimientos de purificación de ADN que utilizan columnas de centrifugación pueden generar soluciones de ADN con niveles significativos de sal que pueden transferirse a la reacción e inhibir la actividad enzimática. Para evitar esto, recomendamos que la solución de ADN añadida a la reacción no supere el 25 % del volumen total de reacción. Esto se puede lograr ajustando el volumen total de reacción según corresponda. P: ¿Es esta enzima sensible a la metilación de dam, dcm o CpG de mamíferos? R: No. Esta enzima no es sensible a la metilación de dam, dcm o CpG de mamíferos. Para obtener información actualizada sobre la sensibilidad a la metilación, visite Dam-Dcm y metilación de CpG o REBASE. P: En el caso de las enzimas almacenadas a -80 °C, ¿se ve afectada su actividad tras múltiples ciclos de congelación\/descongelación? R: Las siguientes enzimas mantuvieron su actividad completa tras 10 ciclos de congelación-descongelación. Si necesita más de 10 ciclos, recomendamos dividir la enzima en alícuotas más pequeñas y congelar cada alícuota a -80 °C. Cac8I EagI-HF I-SceI KasI NlaIII. Nota: FseI mantuvo su actividad completa solo durante 5 ciclos de congelación-descongelación.","brand":"New England Biolabs","offers":[{"title":"Default Title","offer_id":46835539771561,"sku":"R0596S","price":0.99,"currency_code":"USD","in_stock":true}],"url":"https:\/\/iright.com\/es\/products\/neb-r0596s","provider":"Iright","version":"1.0","type":"link"}