{"product_id":"qiagen-204345","title":"Qiagen, 204345, Kit de PCR de sonda QuantiTect (1000)\n icono_0368_ls_gen_ecológico-s","description":"\u003cp\u003e Para reacciones de 1000 x 50 µl: 25 ml de 2x QuantiTect Probe PCR Master Mix, 20 ml de agua sin ARNasa\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Características\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e - Detección de alta sensibilidad de objetivos con bajo número de copias\u003cbr\u003e\n - qPCR utilizando sondas específicas de secuencia o SYBR Green\u003cbr\u003e \n- Cuantificación precisa sobre varios registros de plantilla\u003cbr\u003e\n - No es necesario optimizar las condiciones de reacción y ciclismo.\u003cbr\u003e\n - Detección de hasta 5 objetivos en el mismo tubo\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Detalles del producto\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Los kits de PCR QuantiTect (kits de qPCR) permiten la cuantificación sensible de dianas de ADNg y ADNc mediante PCR en tiempo real y RT-PCR de dos pasos utilizando sondas específicas de secuencia o detección con SYBR Green I. Los kits de PCR en tiempo real también permiten la cuantificación fiable de hasta 5 dianas de ADNg o ADNc en un solo tubo mediante PCR multiplex, PCR en tiempo real o RT-PCR de dos pasos. La combinación de un sistema de inicio en caliente y un exclusivo tampón de PCR en la mezcla maestra lista para usar garantiza una qPCR de alta sensibilidad en cualquier termociclador en tiempo real sin necesidad de optimización. La mezcla de dNTP incluye dUTP, lo que permite el tratamiento opcional con UNG. Para mayor comodidad, las mezclas maestras de los kits de PCR QuantiTect se pueden almacenar a 2–8 °C.\u003c\/p\u003e\n\n\n \u003cp\u003eHay dos formatos de kit disponibles para PCR multiplex utilizando sondas específicas de secuencia: el kit QuantiTect Multiplex PCR para cicladores que requieren colorante ROX para la normalización de la fluorescencia y el kit QuantiTect Multiplex PCR NoROX para todos los demás cicladores.\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Actuación\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Detección de la secuencia de translocación t(8;14) (20 copias): Detección de la secuencia de ADNc de GAPDH (10 6 copias)\u003cbr\u003e\n PCR triplex con 105 copias de NFKB: 34,31\u003cbr\u003e\n PCR singleplex correspondientes: 34,07\u003cbr\u003e\n PCR triplex con 104 copias de NFKB: 34,61\u003cbr\u003e\n PCR singleplex correspondientes: 34,00\u003cbr\u003e\n PCR triplex con 103 copias de NFKB: 35,17\u003cbr\u003e\n PCR singleplex correspondientes: 34,43\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Detección de CSBG: Detección de GAPDH\u003cbr\u003e\n Mezcla de plantillas 1: 1400 copias\u003cbr\u003e\n Valores de CT para PCR triplex: 27,73\u003cbr\u003e\n Valores de CT para PCR singleplex: 27,08\u003cbr\u003e\n Mezcla de plantillas 2: 140 copias\u003cbr\u003e\n Valores de CT para PCR triplex: 31,11\u003cbr\u003e\n Valores de CT para PCR singleplex: 30,66\u003cbr\u003e\n Mezcla de plantillas 3: 14 copias\u003cbr\u003e\n Valores de CT para PCR triplex: 34,74\u003cbr\u003e\n Valores de CT para PCR singleplex: 33,84\u003c\/p\u003e\n\n\n \u003cp\u003eLa ADN polimerasa HotStarTaq incluida en los kits de PCR cuantitativa QuantiTect aumenta la especificidad de la reacción de PCR al proporcionar el inicio en caliente más estricto en comparación con otras polimerasas.\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Los kits de PCR QuantiTect SYBR Green permiten una cuantificación específica en un amplio rango lineal (véase la figura \"Cuantificación específica en un amplio rango lineal\"). Al combinarse con el kit de transcripción inversa QuantiTect y los ensayos de cebadores QuantiTect, los kits de PCR QuantiTect SYBR Green ofrecen resultados sensibles y fiables (véase la figura \"Cuantificación específica y sensible\").\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Los kits de PCR QuantiTect Probe ofrecen resultados sensibles y fiables en combinación con el kit de transcripción inversa QuantiTect (véase la figura \"Alta sensibilidad, eficiencia y amplio rango dinámico\"). La exclusiva composición del tampón de PCR permite a los kits de PCR QuantiTect Probe proporcionar una cuantificación sensible de dianas de ADN con bajo número de copias, así como una cuantificación precisa en un amplio rango lineal (véase la figura \"Amplio rango dinámico en PCR en tiempo real\").\u003c\/p\u003e\n\n\n \u003cp\u003eLa mezcla maestra para PCR multiplex QuantiTect garantiza que los productos de PCR en una reacción multiplex se amplifiquen con la misma eficiencia y sensibilidad que los productos de PCR en las reacciones de amplificación simple correspondientes (consulte la tabla “Valores de ciclo umbral (C Τ ) comparables con PCR triplex y singleplex” y la figura “Resultados comparables con PCR cuádruples y singleplex”.\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Con los kits se pueden detectar tan solo 10 copias de un gen diana, incluso si el número de copias del gen de referencia en la misma reacción es hasta 10 6 veces mayor (ver la figura “Detección de 10 copias del gen diana con exceso del gen de referencia” y la tabla correspondiente “QPCR triplex cuantitativa exitosa de objetivos de abundancia baja y alta”).\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Principio\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Componente: Características\u003cbr\u003e\n ADN polimerasa HotStarTaq: activación de 15 min a 95ºC\u003cbr\u003e\n Tampón PCR QuantiTect SYBR Green: combinación equilibrada de iones NH 4 + y K +\u003cbr\u003e\n Mezcla de dNTP: incluye dUTP, que reemplaza parcialmente a dTTP y permite el tratamiento UNG opcional de las reacciones.\u003cbr\u003e \nColorante SYBR Green I: Produce una fuerte señal fluorescente al unirse al ADN bicatenario.\u003cbr\u003e\n Colorante ROX: para la normalización de señales fluorescentes en instrumentos Applied Biosystems y, opcionalmente, Agilent\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Componente: Características\u003cbr\u003e\n ADN polimerasa HotStarTaq: activación de 15 min a 95ºC\u003cbr\u003e\n Tampón PCR de sonda QuantiTect: combinación equilibrada de iones NH 4 + y K +\u003cbr\u003e\n Mezcla de dNTP: incluye dUTP, que reemplaza parcialmente a dTTP y permite el tratamiento UNG opcional de las reacciones.\u003cbr\u003e\n Colorante ROX: para la normalización de señales fluorescentes en instrumentos Applied Biosystems y, opcionalmente, Agilent\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Componente: Características\u003cbr\u003e\n ADN polimerasa HotStarTaq: activación de 15 min a 95ºC\u003cbr\u003e\n Tampón PCR multiplex QuantiTect: combinación equilibrada de iones NH 4 + y K +\u003cbr\u003e\n Factor sintético MP: análisis multiplexado fiable de hasta 4 genes en el mismo tubo\u003cbr\u003e\n Mezcla de dNTP: incluye dUTP, que reemplaza parcialmente a dTTP y permite el tratamiento UNG opcional de las reacciones.\u003cbr\u003e\n Colorante ROX*: normaliza las señales fluorescentes en los instrumentos Applied Biosystems y, opcionalmente, Agilent\u003c\/p\u003e\n\n\n \u003cp\u003eLos kits de PCR QuantiTect SYBR Green contienen una mezcla maestra optimizada y lista para usar para la cuantificación en tiempo real de dianas de ADNc altamente específicas y sensibles mediante SYBR Green I (véase la tabla \"Componentes del kit de PCR 2x QuantiTect SYBR Green\"). El colorante fluorescente SYBR Green I presente en la mezcla maestra permite el análisis de diversas dianas sin necesidad de sintetizar sondas marcadas específicas para cada diana. Una combinación equilibrada de iones K+ y NH₄₃ en el tampón de PCR promueve la hibridación de cebadores específicos y permite una alta especificidad y sensibilidad de la PCR (véase la figura \"Hibridación de cebadores específicos\"). Además, la ADN polimerasa HotStarTaq proporciona un arranque en caliente riguroso, lo que previene la formación de productos inespecíficos.\u003c\/p\u003e\n\n\n \u003cp\u003eLos kits de PCR QuantiTect Probe contienen una mezcla maestra optimizada y lista para usar para la cuantificación en tiempo real, altamente específica y sensible, de dianas de ADNg y ADNc mediante sondas específicas de secuencia (véase la tabla \"Componentes del kit de PCR 2x QuantiTect Probe\"). Los kits están diseñados para su uso con todo tipo de sondas específicas de secuencia, incluyendo la detección de sondas de hidrólisis (p. ej., TaqMan® y otras sondas de doble marcado), sondas FRET y balizas moleculares. Los kits de PCR QuantiTect Probe contienen un tampón de PCR único con una combinación equilibrada de iones K+ y NH₄+, que promueven la hibridación de cebadores específicos, lo que permite una alta especificidad y sensibilidad de la PCR (véase la figura \"Hibridación de cebadores específicos\"). Además, la ADN polimerasa HotStarTaq proporciona un arranque en caliente riguroso, lo que previene la formación de productos inespecíficos.\u003c\/p\u003e\n\n\n \u003cp\u003eLos kits de PCR multiplex QuantiTect permiten realizar RT-PCR multiplex de dos pasos con éxito desde el primer intento (véase el diagrama de flujo \"Kits multiplex de QIAGEN\"). La mezcla maestra optimizada garantiza que los productos de PCR en una reacción multiplex se amplifiquen con la misma eficiencia y sensibilidad que los productos de PCR en las reacciones de amplificación única correspondientes. Con el kit, se pueden detectar tan solo 10 copias de un gen diana.\u003c\/p\u003e\n\n\n \u003cp\u003eLa amplificación de los genes de referencia y diana en la misma reacción, en lugar de hacerlo por separado, aumenta la fiabilidad de la cuantificación génica al minimizar los errores de manipulación. La mezcla maestra para PCR multiplex QuantiTect contiene una combinación equilibrada de iones K+ y NH₄, así como el exclusivo factor sintético MP. Estos factores, en conjunto, promueven una hibridación estable y eficiente de cebadores y sondas con el ácido nucleico molde, lo que permite una alta eficiencia de PCR (véase la tabla \"Componentes del kit 2x QuantiTect Multiplex PCR\"). Además, la ADN polimerasa HotStarTaq proporciona un arranque en caliente riguroso, lo que previene la formación de productos inespecíficos.\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Las mezclas maestras de los kits de PCR QuantiTect también contienen dUTP, lo que permite el pretratamiento con uracil-N-glicosilasa (UNG) antes de comenzar la PCR, lo que garantiza que cualquier producto de PCR contaminante no afecte las reacciones de PCR posteriores.\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Procedimiento\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Tinte ROX: Kit\u003cbr\u003e\n Se suministra en mezcla maestra: Kit de PCR multiplex QuantiTect\u003cbr\u003e\n Ausente de la mezcla maestra: Kit QuantiTect Multiplex PCR NoROX\u003c\/p\u003e\n\n\n \u003cp\u003eSi es necesario, las reacciones pueden pretratarse con uracil-N-glicosilasa (UNG) para eliminar el arrastre de productos de PCR de reacciones anteriores. Para obtener resultados óptimos en la RT-PCR de dos pasos en tiempo real, recomendamos sintetizar ADNc con el kit de transcripción inversa QuantiTect. Este kit permite una síntesis rápida de ADNc en tan solo 20 minutos, con eliminación integrada de la contaminación del ADN genómico.\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Los kits de PCR QuantiTect SYBR Green y Probe eliminan la necesidad de optimizar las condiciones de reacción, lo cual puede ser tedioso y lento. Simplemente añada los cebadores y el molde de ADN a la mezcla maestra de PCR lista para usar e inicie la reacción. Siga el protocolo del manual para obtener resultados rápidos y fiables en cualquier termociclador en tiempo real.\u003c\/p\u003e\n\n\n \u003cp\u003eSe garantizan resultados altamente específicos en el análisis de expresión génica al utilizar los kits de PCR QuantiTect SYBR Green en combinación con los ensayos de cebadores QuantiTect. Estos son conjuntos de cebadores de genoma completo, validados bioinformáticamente, para detectar transcripciones de humanos, ratones, ratas y muchas otras especies. Los ensayos de cebadores QuantiTect se pueden solicitar fácilmente en línea en GeneGlobe.\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Los kits de PCR multiplex QuantiTect contienen mezclas maestras listas para usar que eliminan la necesidad de optimizar las condiciones de reacción y ciclado. El manual incluye un protocolo único compatible con todos los cicladores en tiempo real disponibles y también incluye los colorantes recomendados.\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Los kits están disponibles con o sin el colorante de referencia pasivo ROX en la mezcla maestra, lo que permite su uso en prácticamente cualquier termociclador en tiempo real (véase la tabla «Cómo elegir el kit de PCR multiplex QuantiTect adecuado»). Gracias a las concentraciones optimizadas de ROX, se detectan incluso números bajos de copias mediante el análisis automático de datos.\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Aplicaciones\u003c\/p\u003e\n\n\n \u003cp\u003eLos kits de PCR QuantiTect pueden utilizarse para el análisis de la expresión génica de ADNc o la cuantificación de ADNg en cualquier termociclador en tiempo real, incluyendo instrumentos de Applied Biosystems, Bio-Rad, Cepheid, Eppendorf, Roche y Agilent. Para el Rotor-Gene Q y otros termocicladores Rotor-Gene, recomendamos el uso de los kits de PCR Rotor-Gene SYBR Green, Rotor-Gene Probe PCR o Rotor-Gene Multiplex PCR, especialmente diseñados para el ciclado rápido en estos instrumentos.\u003c\/p\u003e","brand":"Qiagen","offers":[{"title":"Default Title","offer_id":46646698639529,"sku":"204345","price":0.99,"currency_code":"USD","in_stock":true}],"url":"https:\/\/iright.com\/es\/products\/qiagen-204345","provider":"Iright","version":"1.0","type":"link"}