{"product_id":"revvity-62kb03redc","title":"Revvity, 62KB03REDC, ligando rojo de sunitinib HTRF, 1 nmol","description":"\u003cp\u003e Descripción general\u003cbr\u003e\n Este compuesto se deriva del sunitinib, un conocido inhibidor de las familias PDGF y VEGF RTK. El sunitinib, un inhibidor de quinasas competitivo con ATP, se utiliza como fármaco para tratar el carcinoma de células renales y los tumores del estroma gastrointestinal resistentes al imatinib. Se ha demostrado que se une con una afinidad \u0026lt;100 nM a aproximadamente el 18 % de las quinasas (tanto RTK como Ser\/Thr). Por lo tanto, resulta útil para abordar múltiples quinasas en la plataforma de ensayo de unión a quinasas HTRF. El colorante fluorescente «d2» utilizado absorbe con su máximo cerca de 650 nm y fluoresce cerca de 670 nm. Se utiliza como molécula aceptora en ensayos HTRF.\u003cbr\u003e\n Sunitinib-Red se suministra como una solución de 25 µM en DMSO.\u003cbr\u003e\n Los ensayos HTRF ofrecen muchas ventajas sobre otras tecnologías:\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Formato homogéneo de adición y lectura\u003cbr\u003e\n Sin pasos de lavado\u003cbr\u003e\n Fondo bajo\u003cbr\u003e\n Miniaturización sencilla desde microplacas de 96 o 384 pocillos a formatos de ensayo de alta densidad, como placas de 384 pocillos de bajo volumen y de 1536 pocillos.\u003cbr\u003e \nSeñal estable, que proporciona flexibilidad en el tiempo de lectura o tamaño de los ensayos.\u003cbr\u003e\n Cómo funciona\u003cbr\u003e\n Principio del ensayo de determinación de Kd\u003cbr\u003e\n La unión de Sunitinib-Red se detecta en un formato de ensayo sándwich utilizando el Anti Tag marcado con criptato de europio (donante), que se une a la quinasa marcada, y un trazador fluorescente rojo marcado con d2 (aceptor).\u003cbr\u003e\n El principio de detección se basa en la tecnología HTRF®. La relación HTRF (665\/620) aumentará al añadir más trazador y se saturará en función de la constante de disociación (Kd) del trazador a la quinasa marcada.\u003cbr\u003e\n Para saber si Sunitinib-Red es el trazador más adecuado para la quinasa marcada que le interesa, le recomendamos que pruebe los kits Kinase Binding Discovery. \u003c\/p\u003e\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\n\n\n\n\u003cp\u003e\u003cbr\u003e\n Protocolo de ensayo para la determinación de Kd\u003cbr\u003e\n Los experimentos de unión de saturación de Sunitinib-Red se pueden realizar en placas de 96 o 384 pocillos (volumen final de 20 µL).\u003cbr\u003e \nPrimero, se prepara una dilución seriada de entre 0 y 1 µM de Sunitinib-Red en el tampón de unión a quinasas en una placa de 96 pocillos sin unión. A continuación, se dispensan 5 µL de tampón de unión a quinasas en la placa final de 96 o 384 pocillos. A continuación, se añaden 5 µL de quinasa marcada, seguidos de 5 µL de Eu-criptato anti-etiqueta. Finalmente, se añaden 5 µL de la solución trazadora roja.\u003cbr\u003e\n La relación HTRF se mide después de 1 hora de incubación.\u003cbr\u003e\n Principio del ensayo de determinación de IC50\/Ki\u003cbr\u003e\n La unión de Sunitinib-Red se detecta en un formato de ensayo sándwich utilizando un anticuerpo específico Anti-GST, 6HIS o estreptavidina marcado con criptato de europio (donante), que se une a la quinasa marcada, y un Sunitinib fluorescente rojo marcado con d2 (aceptor).\u003cbr\u003e\n El principio de detección se basa en la tecnología HTRF®. La proporción HTRF (665\/620) aumentará al añadir más Sunitinib-Red y se saturará en función de la constante de disociación (Kd) de Sunitinib-Red con la quinasa marcada.\u003cbr\u003e \nCuando se añade un inhibidor de la quinasa, Sunitinib-Red se desplazará y la señal HTRF desaparecerá, dependiendo de la dosis. \u003c\/p\u003e\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\n\n\n\n\u003cp\u003e\u003cbr\u003e\n Protocolo de ensayo para la determinación de IC50\/Ki\u003cbr\u003e\n La evaluación farmacológica de los inhibidores de interés se puede realizar en placas de 96 o 384 pocillos.\u003cbr\u003e\n Primero, se prepara una dilución seriada de inhibidor entre 40 µM y 0,23 nM, y se dispensan 5 µL de cada concentración en la placa. A continuación, se añaden 5 µL de quinasa marcada, seguidos de 5 µL de Eu-criptato anti-marcador. Finalmente, se añaden 5 µL de solución de Sunitinib-Red, preparada al cuádruple de la concentración final. La razón HTRF se mide tras 1 h de incubación.\u003cbr\u003e\n Los análisis de los datos arrojan curvas dosis-respuesta típicas que oscilan entre 10 µM y 56 pM, lo que permite evaluar los valores de CI50\/Ki del inhibidor de interés. Aplicación: Ensayo enzimático bioquímico.\u003cbr\u003e\n Marca-HTRF\u003cbr\u003e\n Modalidad de detección-HTRF\u003cbr\u003e \nGrupo de productos: reactivo fluorescente\u003cbr\u003e\n Condiciones de envío - Envío en hielo seco\u003cbr\u003e\n Clase objetivo: quinasas\u003cbr\u003e\n Tecnología-TR-FRET\u003cbr\u003e\n Área terapéutica: Metabolismo\/Diabetes, Neurociencia, Oncología e Inflamación\u003cbr\u003e\n Tamaño de la unidad: 1 nmol\u003c\/p\u003e","brand":"Revvity","offers":[{"title":"Default Title","offer_id":46775319429289,"sku":"62KB03REDC","price":0.99,"currency_code":"USD","in_stock":true}],"url":"https:\/\/iright.com\/es\/products\/revvity-62kb03redc","provider":"Iright","version":"1.0","type":"link"}