{"product_id":"revvity-alsu-cirak-a500","title":"Revvity, ALSU-CIRAK-A500, kit de detección del complejo humano IRAK1\/IRAK4 AlphaLISA, 500 puntos de ensayo","description":"\u003cp\u003e Descripción general\u003cbr\u003e \nEl complejo IRAK1\/IRAK4 es un módulo de señalización crucial en las vías TLR e IL-1R que media la respuesta inmunitaria innata a patógenos. Tras la activación del receptor, MYD88 recluta a IRAK4, que a su vez recluta y fosforila a IRAK1, formando un complejo quinasa activo. IRAK4 fosforila a IRAK1 en múltiples sitios, lo que desencadena la autofosforilación y la activación completa. El complejo activado recluta a TRAF6, lo que induce la activación de las vías NF-κB y MAPK. Se están desarrollando inhibidores duales de IRAK1\/IRAK4 como terapias antiinflamatorias para enfermedades autoinmunes y linfomas con mutación en MYD88.\u003cbr\u003e\n El complejo AlphaLISA SureFire Ultra Human IRAK1 \/ IRAK4 es un inmunoensayo tipo sándwich para la detección cuantitativa del complejo IRAK1 \/ IRAK4 en lisados ​​celulares, utilizando tecnología Alpha.\u003cbr\u003e\n Formatos:\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e El kit HV (alto volumen) contiene reactivos para ejecutar 100 pocillos en formato de 96 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 60 μL.\u003cbr\u003e\n El kit de 500 puntos contiene suficientes reactivos para ejecutar 500 pocillos en formato de 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 20 μL.\u003cbr\u003e \nEl kit de 10 000 puntos contiene suficientes reactivos para ejecutar 10 000 pocillos en formato de 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 20 μL.\u003cbr\u003e\n El kit de 50.000 puntos contiene suficientes reactivos para ejecutar 50.000 pocillos en formato de 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 20 μL.\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Los kits AlphaLISA SureFire Ultra son compatibles con:\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Lisados ​​de células y tejidos\u003cbr\u003e\n Moduladores de anticuerpos\u003cbr\u003e\n Anticuerpos bioterapéuticos\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Los kits AlphaLISA SureFire Ultra se pueden utilizar para:\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Ensayos de quinasas celulares\u003cbr\u003e\n Estudios de activación de receptores\u003cbr\u003e\n Cribado de alto rendimiento para estudios preclínicos\u003cbr\u003e\n Cómo funciona\u003cbr\u003e\n Principio del ensayo de detección de complejos proteicos AlphaLISA SureFire Ultra\u003cbr\u003e\n El ensayo complejo AlphaLISA SureFire Ultra mide las interacciones proteína-proteína celulares (PPI).\u003cbr\u003e \nEl ensayo utiliza dos anticuerpos que reconocen la proteína 1 y la proteína 2, respectivamente. Los ensayos AlphaLISA requieren dos tipos de microesferas: aceptoras y donantes. Las microesferas aceptoras están recubiertas con un agente patentado CaptSure™ para inmovilizar específicamente el primer anticuerpo del ensayo, marcado con una etiqueta CaptSure. Las microesferas donantes están recubiertas con estreptavidina para capturar el segundo anticuerpo, que está biotinilado. En presencia del complejo proteico, los dos anticuerpos acercan las microesferas donadoras y aceptoras, por lo que el oxígeno singlete transfiere energía para excitar la microesfera aceptora, lo que permite la generación de una señal alfa luminiscente. La cantidad de luz emitida es directamente proporcional a la cantidad de PPI presente en la muestra. \u003c\/p\u003e\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\n\n\n\n\u003cp\u003e\u003c\/p\u003e\n\n\n\n\u003cp\u003eProtocolo de ensayo de dos placas para detección ultracompleja AlphaLISA SureFire\u003cbr\u003e \nEl protocolo de dos placas implica el cultivo y tratamiento de las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis, y la posterior transferencia de los lisados ​​a una placa Optiplate de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección complejos AlphaLISA SureFire Ultra. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia de las células. Además, los lisados ​​de un solo pocillo pueden utilizarse para medir múltiples dianas. \u003c\/p\u003e\n\n\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\n\n\n\n\n\n\n\n\u003cp\u003e Protocolo de ensayo de una placa para la detección de complejos proteicos AlphaLISA SureFire Ultra\u003cbr\u003e\n La detección del complejo proteico con reactivos AlphaLISA SureFire Ultra se puede realizar en una sola placa, utilizada para cultivo, tratamiento y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización, manteniendo la robusta calidad de AlphaLISA SureFire Ultra.\u003cbr\u003e\n Sensibilidad del ensayo\u003cbr\u003e\n Sensibilidad del ensayo: dilución del lisado celular\u003cbr\u003e \nEl lisado celular se preparó a partir de células Karpas 299 a una concentración de 2 x 106 células\/ml y se estimuló con 10 ng\/ml de IL-1b durante 10 minutos en HBSS + BSA al 0,1 %. Las células se lisaron añadiendo tampón de lisis 5X durante 10 minutos a temperatura ambiente con agitación.\u003cbr\u003e\n El lisado se diluyó en serie en tampón de lisis y los niveles del complejo IRAK1\/IRAK4 se evaluaron con AlphaLISA SureFire Ultra. Para la detección, se transfirieron 10 µL de lisado a una placa OptiPlate blanca de 384 pocillos, seguidos de 5 µL de mezcla aceptora y se incubaron durante 1 hora a temperatura ambiente. Finalmente, se añadieron 5 µL de mezcla donadora a cada pocillo y se incubaron durante 1 hora a temperatura ambiente en oscuridad. La placa se leyó en un Envision con la configuración estándar de AlphaLISA.\u003cbr\u003e\n Se indica el número aproximado de células por punto de datos. La línea punteada representa el fondo del ensayo. El ensayo puede detectar el complejo IRAK1\/IRAK4 hasta 500 células por punto de datos.\u003cbr\u003e\n Aplicación: Señalización celular\u003cbr\u003e\n Compatible con automatización: Sí\u003cbr\u003e\n Marca AlphaLISA SureFire Ultra\u003cbr\u003e\n Modalidad de detección alfa\u003cbr\u003e\n Tiempo de protocolo: 2 h a temperatura ambiente\u003cbr\u003e\n Volumen de muestra: 10 µL\u003cbr\u003e \nCondiciones de envío - Envío en Blue Ice\u003cbr\u003e\n Objetivo-IRAK1 \/ IRAK4\u003cbr\u003e\n Clase objetivo: fosfoproteínas\u003cbr\u003e\n Especie objetivo: humanos\u003cbr\u003e\n Tecnología-Alfa\u003cbr\u003e\n Área terapéutica-Inflamación\u003cbr\u003e\n Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo\u003c\/p\u003e","brand":"Revvity","offers":[{"title":"Default Title","offer_id":46774629367977,"sku":"ALSU-CIRAK-A500","price":0.99,"currency_code":"USD","in_stock":true}],"url":"https:\/\/iright.com\/es\/products\/revvity-alsu-cirak-a500","provider":"Iright","version":"1.0","type":"link"}