{"product_id":"revvity-alsu-pfoxo1-a10k","title":"Revvity, ALSU-PFOXO1-A10K, kit de detección de fosfo-FOXO1 (Ser256) humano y murino AlphaLISA, 10 000 puntos de ensayo","description":"\u003cp\u003e Descripción general\u003cbr\u003e\n Forkhead Box O1 (FOXO1) es un factor de transcripción que regula genes implicados en el metabolismo de la glucosa, la detención del ciclo celular, la apoptosis y la resistencia al estrés oxidativo. La actividad de FOXO1 está controlada por la fosforilación mediada por AKT, que promueve la exclusión nuclear y la degradación proteasomal. FOXO1 desfosforilado se transloca al núcleo y activa genes diana, como la glucosa-6-fosfatasa, PEPCK y p27Kip1. FOXO1 desempeña un papel crucial en la gluconeogénesis hepática y funciona como supresor tumoral en el cáncer. La desregulación de FOXO1 está implicada en la diabetes tipo 2 y el cáncer, lo que lo convierte en una diana terapéutica para trastornos metabólicos y neoplasias malignas.\u003cbr\u003e \nAlphaLISA SureFire Ultra Human and Mouse Phospho-FOXO1 (Ser256) es un inmunoensayo tipo sándwich para la detección cuantitativa de fosfo-FOXO1 (Ser256) en lisados ​​celulares, utilizando tecnología Alpha.\u003cbr\u003e\n Formatos:\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e El kit HV (alto volumen) contiene reactivos para ejecutar 100 pocillos en formato de 96 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 60 μL.\u003cbr\u003e\n El kit de 500 puntos contiene suficientes reactivos para ejecutar 500 pocillos en formato de 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 20 μL.\u003cbr\u003e\n El kit de 10 000 puntos contiene suficientes reactivos para ejecutar 10 000 pocillos en formato de 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 20 μL.\u003cbr\u003e\n El kit de 50.000 puntos contiene suficientes reactivos para ejecutar 50.000 pocillos en formato de 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 20 μL.\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Los kits AlphaLISA SureFire Ultra son compatibles con:\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Lisados ​​de células y tejidos\u003cbr\u003e\n Moduladores de anticuerpos\u003cbr\u003e\n Anticuerpos bioterapéuticos\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Los kits AlphaLISA SureFire Ultra se pueden utilizar para:\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Ensayos de quinasas celulares\u003cbr\u003e\n Estudios de activación de receptores\u003cbr\u003e\n Cribado de alto rendimiento para estudios preclínicos\u003cbr\u003e\n Cómo funciona\u003cbr\u003e\n Principio del ensayo Phospho-AlphaLISA SureFire Ultra\u003cbr\u003e \nEl ensayo Phospho-AlphaLISA SureFire Ultra mide un objetivo proteico cuando se fosforila en un residuo específico.\u003cbr\u003e\n El ensayo utiliza dos anticuerpos que reconocen el epítopo fosforilado y un epítopo distal de la proteína diana. Los ensayos AlphaLISA requieren dos tipos de microesferas: aceptoras y donantes. Las microesferas aceptoras están recubiertas con un agente patentado CaptSure™ para inmovilizar específicamente el anticuerpo específico del ensayo, marcado con una etiqueta CaptSure. Las microesferas donantes están recubiertas con estreptavidina para capturar uno de los anticuerpos de detección, que está biotinilado. En presencia de proteína fosforilada, los dos anticuerpos acercan las microesferas donadora y aceptora, por lo que el oxígeno singlete transfiere energía para excitar la microesfera aceptora, lo que permite la generación de una señal alfa luminiscente. La cantidad de emisión de luz es directamente proporcional a la cantidad de fosfoproteína presente en la muestra. \u003c\/p\u003e\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\n\n\n\n\u003cp\u003e\u003c\/p\u003e\n\n\n\n \u003cp\u003eProtocolo de ensayo de dos placas Phospho-AlphaLISA SureFire Ultra\u003cbr\u003e\n El protocolo de dos placas implica el cultivo y tratamiento de las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis, y la posterior transferencia de los lisados ​​a una placa OptiPlate™ de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección Phospho-AlphaLISA SureFire Ultra. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia celular. Además, los lisados ​​de un solo pocillo pueden utilizarse para medir múltiples dianas. \u003c\/p\u003e\n\n\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\n\n\n\n\n\n\n\n\u003cp\u003e Protocolo de ensayo de una placa Phospho-AlphaLISA SureFire Ultra\u003cbr\u003e\n La detección de la proteína diana fosforilada con los reactivos AlphaLISA SureFire Ultra se puede realizar en una sola placa, utilizada para cultivo, tratamiento y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado para HTS, permite la miniaturización manteniendo la calidad de AlphaLISA SureFire Ultra.\u003cbr\u003e\n Sensibilidad del ensayo\u003cbr\u003e\n Sensibilidad del ensayo: lisado celular\u003cbr\u003e \nEl lisado celular se preparó a partir de células HEK293 cultivadas hasta confluencia en un matraz T175 y se lizaron en 3 ml de tampón de lisis durante 10 minutos a temperatura ambiente con agitación.\u003cbr\u003e\n El lisado se diluyó en serie en tampón de lisis y se analizaron los niveles de fosfo (Ser256) y FOXO1 total utilizando los respectivos kits AlphaLISA SureFire Ultra. Para la detección, se transfirieron 10 µL de lisado a una placa OptiPlate blanca de 384 pocillos, seguidos de 5 µL de mezcla aceptora y se incubaron durante 1 hora a temperatura ambiente. Finalmente, se añadieron 5 µL de mezcla donadora a cada pocillo y se incubaron durante 1 hora a temperatura ambiente en oscuridad. La placa se leyó en un Envision con la configuración estándar de AlphaLISA.\u003cbr\u003e\n El número aproximado de células por punto de datos se indica en el gráfico. La línea punteada representa el fondo del ensayo. Este ensayo puede detectar fosfo (Ser256) en aproximadamente 2500 células por punto de datos.\u003cbr\u003e\n Aplicación: Señalización celular\u003cbr\u003e\n Compatible con automatización: Sí\u003cbr\u003e\n Marca AlphaLISA SureFire Ultra\u003cbr\u003e\n Modalidad de detección alfa\u003cbr\u003e\n Tiempo de protocolo: 2 h a temperatura ambiente\u003cbr\u003e\n Volumen de muestra: 10 µL\u003cbr\u003e\n Condiciones de envío - Envío en Blue Ice\u003cbr\u003e\n Objetivo-FOXO1\u003cbr\u003e \nClase objetivo: fosfoproteínas\u003cbr\u003e\n Especie objetivo: ratón humano\u003cbr\u003e\n Tecnología-Alfa\u003cbr\u003e\n Área terapéutica-Neurociencia metabólica oncológica\u003cbr\u003e\n Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo\u003c\/p\u003e","brand":"Revvity","offers":[{"title":"Default Title","offer_id":46774620651689,"sku":"ALSU-PFOXO1-A10K","price":0.99,"currency_code":"USD","in_stock":true}],"url":"https:\/\/iright.com\/es\/products\/revvity-alsu-pfoxo1-a10k","provider":"Iright","version":"1.0","type":"link"}