{"product_id":"revvity-alsu-tatr-a-hv","title":"Revvity, ALSU-TATR-A-HV, kit de detección de ATR total en humanos y ratones AlphaLISA, 100 puntos de ensayo","description":"\u003cp\u003e Descripción general\u003cbr\u003e \nLa Ataxia Telangiectasia y la proteína relacionada con Rad3 (ATR) son serina\/treonina quinasas que actúan como regulador principal de la respuesta al daño del ADN, particularmente en respuesta al estrés replicativo. La ATR se activa mediante ADN monocatenario recubierto de RPA, lo que conduce a la fosforilación de efectores posteriores, como CHK1, p53 y H2AX. Tras su activación, la ATR inicia los puntos de control del ciclo celular, estabiliza las horquillas de replicación bloqueadas y promueve la reparación del ADN. Las mutaciones hipomórficas en la ATR causan el síndrome de Seckel, mientras que las células cancerosas a menudo se vuelven dependientes de la ATR para su supervivencia debido al elevado estrés replicativo. Se están desarrollando inhibidores de la ATR como terapias contra el cáncer, mostrando letalidad sintética con pérdida de ATM o mutaciones de BRCA.\u003cbr\u003e\n AlphaLISA SureFire Ultra Human and Mouse Total ATR es un inmunoensayo tipo sándwich para la detección cuantitativa de ATR total en lisados ​​celulares, utilizando tecnología Alpha.\u003cbr\u003e\n Formatos:\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e El kit HV (alto volumen) contiene reactivos para ejecutar 100 pocillos en formato de 96 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 60 μL.\u003cbr\u003e \nEl kit de 500 puntos contiene suficientes reactivos para ejecutar 500 pocillos en formato de 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 20 μL.\u003cbr\u003e\n El kit de 10 000 puntos contiene suficientes reactivos para ejecutar 10 000 pocillos en formato de 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 20 μL.\u003cbr\u003e\n El kit de 50.000 puntos contiene suficientes reactivos para ejecutar 50.000 pocillos en formato de 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 20 μL.\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Los kits AlphaLISA SureFire Ultra son compatibles con:\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Lisados ​​de células y tejidos\u003cbr\u003e\n Moduladores de anticuerpos\u003cbr\u003e\n Anticuerpos bioterapéuticos\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Los kits AlphaLISA SureFire Ultra se pueden utilizar para:\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Ensayos de quinasas celulares\u003cbr\u003e\n Estudios de activación de receptores\u003cbr\u003e\n Cribado de alto rendimiento para estudios preclínicos\u003cbr\u003e\n Cómo funciona\u003cbr\u003e\n Principio del ensayo Total-AlphaLISA SureFire Ultra\u003cbr\u003e\n El ensayo Total-AlphaLISA SureFire Ultra mide el nivel de expresión de una proteína objetivo en un lisado celular.\u003cbr\u003e \nEl ensayo Total-AlphaLISA SureFire Ultra utiliza dos anticuerpos que reconocen dos epítopos distales diferentes en la proteína diana. Los ensayos AlphaLISA requieren dos tipos de microesferas: aceptoras y donantes. Las microesferas aceptoras están recubiertas con un agente patentado CaptSure™ para inmovilizar específicamente el anticuerpo específico del ensayo, marcado con una etiqueta CaptSure. Las microesferas donantes están recubiertas con estreptavidina para capturar uno de los anticuerpos de detección, que está biotinilado. En presencia de la proteína diana, los dos anticuerpos acercan las microesferas donadoras y aceptoras, por lo que el oxígeno singlete transfiere energía para excitar la microesfera aceptora, lo que permite la generación de una señal alfa luminiscente. La cantidad de luz emitida es directamente proporcional a la cantidad de proteína presente en la muestra. \u003c\/p\u003e\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\n\n\n\n\u003cp\u003e\u003c\/p\u003e\n\n\n\n\u003cp\u003eProtocolo de ensayo de dos placas Total-AlphaLISA SureFire Ultra\u003cbr\u003e \nEl protocolo de dos placas implica el cultivo y tratamiento de las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis, y la posterior transferencia de los lisados ​​a una placa OptiPlate™ de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección Total-AlphaLISA SureFire Ultra. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia celular. Además, los lisados ​​de un solo pocillo pueden utilizarse para medir múltiples dianas. \u003c\/p\u003e\n\n\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\n\n\n\n\n\n\n\n\u003cp\u003e Protocolo de ensayo de una placa Total-AlphaLISA SureFire Ultra\u003cbr\u003e\n La detección de la proteína diana total con los reactivos AlphaLISA SureFire Ultra se puede realizar en una sola placa, utilizada para cultivo, tratamiento y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo la calidad de AlphaLISA SureFire Ultra.\u003cbr\u003e\n Versatilidad de ensayos\u003cbr\u003e\n Expresión de ATR en varias líneas celulares\u003cbr\u003e \nLas células adherentes se cultivaron hasta confluencia en un matraz T175 en medio completo y se lisaron con tampón de lisis a una densidad de 1 x 106 células\/ml. Las células en suspensión se recogieron, se lavaron con HBSS y se lisaron con tampón de lisis a una densidad de 3,2 x 106 células\/ml.\u003cbr\u003e\n Los niveles totales de ATR se evaluaron con AlphaLISA SureFire Ultra. Para la detección, se transfirieron 10 µL de lisado celular (10 000 células adherentes y 32 000 células en suspensión) a una placa OptiPlate blanca de 384 pocillos, seguido de 5 µL de mezcla aceptora y se incubó durante 1 hora a temperatura ambiente. Finalmente, se añadieron 5 µL de mezcla donante a cada pocillo y se incubó durante 1 hora a temperatura ambiente en oscuridad. La placa se leyó en un Envision con la configuración estándar de AlphaLISA. Se detectó la expresión de ATR en una amplia gama de líneas celulares humanas y murinas.\u003cbr\u003e\n Sensibilidad del ensayo\u003cbr\u003e\n Sensibilidad del ensayo ATR: dilución del lisado celular\u003cbr\u003e \nEl lisado celular se preparó a partir de células HeLa cultivadas hasta confluencia en matraces T175 a 37 °C y 5 % de CO₂. Cada matraz se trató con etopósido a 2 µM durante 18 horas y se lisó en 3 ml de tampón de lisis durante 10 minutos a temperatura ambiente con agitación.\u003cbr\u003e\n El lisado se diluyó en serie en tampón de lisis y ATR fosfo (Thr1989) y los niveles totales se evaluaron con AlphaLISA SureFire Ultra. Para la detección, se transfirieron 10 µL de lisado celular a una placa OptiPlate blanca de 384 pocillos, seguido de 5 µL de mezcla aceptora y se incubó durante 1 hora a temperatura ambiente. Finalmente, se añadieron 5 µL de mezcla donadora a cada pocillo y se incubó durante 1 hora a temperatura ambiente en oscuridad. La placa se leyó en un Envision con la configuración estándar de AlphaLISA.\u003cbr\u003e\n Se indica el número aproximado de células por punto de datos. La línea punteada representa el fondo del ensayo. Este ensayo puede detectar la expresión de ATR en menos de 1000 células por punto de datos.\u003cbr\u003e\n Aplicación: Señalización celular\u003cbr\u003e\n Compatible con automatización: Sí\u003cbr\u003e\n Marca AlphaLISA SureFire Ultra\u003cbr\u003e\n Modalidad de detección alfa\u003cbr\u003e\n Tiempo de protocolo: 2 h a temperatura ambiente\u003cbr\u003e\n Volumen de muestra: 30 µL\u003cbr\u003e \nCondiciones de envío - Envío en Blue Ice\u003cbr\u003e\n Objetivo-ATR\u003cbr\u003e\n Clase objetivo: fosfoproteínas\u003cbr\u003e\n Especie objetivo: ratón humano\u003cbr\u003e\n Tecnología-Alfa\u003cbr\u003e\n Área Terapéutica-Oncología\u003cbr\u003e\n Tamaño de la unidad: 100 puntos de ensayo\u003c\/p\u003e","brand":"Revvity","offers":[{"title":"Default Title","offer_id":46774583918761,"sku":"ALSU-TATR-A-HV","price":0.99,"currency_code":"USD","in_stock":true}],"url":"https:\/\/iright.com\/es\/products\/revvity-alsu-tatr-a-hv","provider":"Iright","version":"1.0","type":"link"}