{"product_id":"revvity-alsu-tbraf-a10k","title":"Revvity, ALSU-TBRAF-A10K, kit AlphaLISA de detección de B-Raf total en humanos y ratones, 10 000 puntos de ensayo","description":"\u003cp\u003e Descripción general\u003cbr\u003e\n B-Raf es una serina\/treonina-proteína quinasa, miembro de la familia de las quinasas RAF, que actúa aguas abajo de RAS en la vía de señalización MAPK\/ERK. Transmite señales mitogénicas desde la membrana celular hasta el núcleo, regulando así procesos celulares como la proliferación, la diferenciación y la supervivencia. La mutación BRAF V600E produce la activación constitutiva de la quinasa y es un factor desencadenante común en melanomas, cáncer colorrectal y carcinoma de tiroides. Los inhibidores dirigidos contra la mutación BRAF han demostrado eficacia clínica, aunque la resistencia suele desarrollarse mediante la reactivación de MAPK o mecanismos de derivación. La investigación en curso explora terapias combinadas para prolongar la respuesta y superar la resistencia.\u003cbr\u003e\n El kit de detección total de B-Raf en humanos y ratones AlphaLISA SureFire Ultra es un inmunoensayo tipo sándwich para la detección cuantitativa de B-Raf total en lisados ​​celulares, utilizando tecnología Alpha.\u003cbr\u003e\n Formatos:\u003c\/p\u003e\n\n\n \u003cp\u003eEl kit HV (alto volumen) contiene reactivos para ejecutar 100 pocillos en formato de 96 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 60 μL.\u003cbr\u003e\n El kit de 500 puntos contiene suficientes reactivos para ejecutar 500 pocillos en formato de 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 20 μL.\u003cbr\u003e\n El kit de 10 000 puntos contiene suficientes reactivos para ejecutar 10 000 pocillos en formato de 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 20 μL.\u003cbr\u003e\n El kit de 50.000 puntos contiene suficientes reactivos para ejecutar 50.000 pocillos en formato de 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 20 μL.\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Los kits AlphaLISA SureFire Ultra son compatibles con:\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Lisados ​​de células y tejidos\u003cbr\u003e\n Moduladores de anticuerpos\u003cbr\u003e\n Anticuerpos bioterapéuticos\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Los kits AlphaLISA SureFire Ultra se pueden utilizar para:\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Ensayos de quinasas celulares\u003cbr\u003e\n Estudios de activación de receptores\u003cbr\u003e\n Cribado de alto rendimiento para estudios preclínicos\u003cbr\u003e\n Cómo funciona\u003cbr\u003e\n Principio del ensayo Total-AlphaLISA SureFire Ultra\u003c\/p\u003e\n\n\n\n\u003cp\u003e El ensayo Total-AlphaLISA SureFire Ultra mide el nivel de expresión de una proteína objetivo en un lisado celular.\u003c\/p\u003e\n\n\n\n     \u003cp\u003eEl ensayo Total-AlphaLISA SureFire Ultra utiliza dos anticuerpos que reconocen dos epítopos distales diferentes en la proteína diana. Los ensayos AlphaLISA requieren dos tipos de microesferas: aceptoras y donantes. Las microesferas aceptoras están recubiertas con un agente patentado CaptSure™ para inmovilizar específicamente el anticuerpo específico del ensayo, marcado con una etiqueta CaptSure. Las microesferas donantes están recubiertas con estreptavidina para capturar uno de los anticuerpos de detección, que está biotinilado. En presencia de la proteína diana, los dos anticuerpos acercan las microesferas donadoras y aceptoras, por lo que el oxígeno singlete transfiere energía para excitar la microesfera aceptora, lo que permite la generación de una señal alfa luminiscente. La cantidad de luz emitida es directamente proporcional a la cantidad de proteína presente en la muestra. \u003c\/p\u003e\n\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\n\n\n\n\n\u003cp\u003e\u003c\/p\u003e\n\n\n\n\n\n\u003cp\u003eProtocolo de ensayo de dos placas Total-AlphaLISA SureFire Ultra\u003c\/p\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n             \u003cp\u003eEl protocolo de dos placas implica el cultivo y tratamiento de las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis, y la posterior transferencia de los lisados ​​a una placa OptiPlate™ de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección Total-AlphaLISA SureFire Ultra. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia celular. Además, los lisados ​​de un solo pocillo pueden utilizarse para medir múltiples dianas. \u003c\/p\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\n\n\n\n\n\n\n\n\n\u003cp\u003e Protocolo de ensayo de una placa Total-AlphaLISA SureFire Ultra\u003c\/p\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cp\u003e La detección de la proteína diana total con los reactivos AlphaLISA SureFire Ultra se puede realizar en una sola placa, utilizada para cultivo, tratamiento y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo la calidad de AlphaLISA SureFire Ultra.\u003cbr\u003e\n Versatilidad de ensayos\u003cbr\u003e\n Expresión de B-Raf en varias líneas celulares\u003cbr\u003e \nLas líneas celulares adherentes se sembraron en una placa de 96 pocillos (40.000 células\/pocillo) y se incubaron durante la noche a 37 °C y 5 % de CO₂. Las células se lisaron con 100 µL de tampón de lisis durante 10 minutos a temperatura ambiente con agitación (350 rpm).\u003cbr\u003e\n Las líneas celulares en suspensión se sembraron en una placa de 96 pocillos (400 000 células\/pocillo) y se lisaron con 100 µL de tampón de lisis durante 10 minutos a temperatura ambiente con agitación (350 rpm).\u003cbr\u003e\n Los niveles totales de B-Raf se evaluaron mediante el ensayo AlphaLISA SureFire Ultra. Para la detección, las líneas celulares en suspensión se diluyeron 1:10 en tampón de lisis. A continuación, se transfirieron 10 µL (aproximadamente 4000 células) de lisado celular a una placa OptiPlate blanca de 384 pocillos, seguido de 5 µL de mezcla aceptora y se incubó durante 1 hora a temperatura ambiente. Finalmente, se añadieron 5 µL de mezcla donadora a cada pocillo y se incubó durante 1 hora a temperatura ambiente en oscuridad. La placa se leyó en un analizador Envision con la configuración estándar de AlphaLISA.\u003cbr\u003e\n La proteína B-Raf total se expresa en una amplia gama de tipos de células, con una expresión particularmente alta en MOLT-4, Ramos y la línea celular de ratón NIH\/3T3.\u003cbr\u003e \nAplicación: Señalización celular\u003cbr\u003e\n Compatible con automatización: Sí\u003cbr\u003e\n Marca AlphaLISA SureFire Ultra\u003cbr\u003e\n Modalidad de detección alfa\u003cbr\u003e\n Kit de grupo de productos\u003cbr\u003e\n Tiempo de protocolo: 2 h a temperatura ambiente\u003cbr\u003e\n Volumen de muestra: 10 µL\u003cbr\u003e\n Condiciones de envío - Envío en Blue Ice\u003cbr\u003e\n Objetivo-B-Raf\u003cbr\u003e\n Clase objetivo: fosfoproteínas\u003cbr\u003e\n Especie objetivo: ratón humano\u003cbr\u003e\n Tecnología-Alfa\u003cbr\u003e\n Área Terapéutica-Oncología\u003cbr\u003e\n Tamaño de la unidad: 10 000 puntos de ensayo\u003c\/p\u003e","brand":"Revvity","offers":[{"title":"Default Title","offer_id":46774587293865,"sku":"ALSU-TBRAF-A10K","price":0.99,"currency_code":"USD","in_stock":true}],"url":"https:\/\/iright.com\/es\/products\/revvity-alsu-tbraf-a10k","provider":"Iright","version":"1.0","type":"link"}