{"product_id":"revvity-alsu-tfoxo1-a500","title":"Revvity, ALSU-TFOXO1-A500, kit AlphaLISA para la detección de FOXO1 total en humanos y ratones, 500 puntos de ensayo","description":"\u003cp\u003e Descripción general\u003cbr\u003e \nForkhead Box O1 (FOXO1) es un factor de transcripción que regula genes implicados en el metabolismo de la glucosa, la detención del ciclo celular, la apoptosis y la resistencia al estrés oxidativo. La actividad de FOXO1 está controlada por la fosforilación mediada por AKT, que promueve la exclusión nuclear y la degradación proteasomal. FOXO1 desfosforilado se transloca al núcleo y activa genes diana, como la glucosa-6-fosfatasa, PEPCK y p27Kip1. FOXO1 desempeña un papel crucial en la gluconeogénesis hepática y funciona como supresor tumoral en el cáncer. La desregulación de FOXO1 está implicada en la diabetes tipo 2 y el cáncer, lo que lo convierte en una diana terapéutica para trastornos metabólicos y neoplasias malignas.\u003cbr\u003e\n AlphaLISA SureFire Ultra Human and Mouse Total FOXO1 es un inmunoensayo tipo sándwich para la detección cuantitativa de FOXO1 total en lisados ​​celulares, utilizando tecnología Alpha.\u003cbr\u003e\n Formatos:\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e El kit HV (alto volumen) contiene reactivos para ejecutar 100 pocillos en formato de 96 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 60 μL.\u003cbr\u003e \nEl kit de 500 puntos contiene suficientes reactivos para ejecutar 500 pocillos en formato de 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 20 μL.\u003cbr\u003e\n El kit de 10 000 puntos contiene suficientes reactivos para ejecutar 10 000 pocillos en formato de 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 20 μL.\u003cbr\u003e\n El kit de 50.000 puntos contiene suficientes reactivos para ejecutar 50.000 pocillos en formato de 384 pocillos, utilizando un volumen de reacción de 20 μL.\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Los kits AlphaLISA SureFire Ultra son compatibles con:\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Lisados ​​de células y tejidos\u003cbr\u003e\n Moduladores de anticuerpos\u003cbr\u003e\n Anticuerpos bioterapéuticos\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Los kits AlphaLISA SureFire Ultra se pueden utilizar para:\u003c\/p\u003e\n\n\n\u003cp\u003e Ensayos de quinasas celulares\u003cbr\u003e\n Estudios de activación de receptores\u003cbr\u003e\n Cribado de alto rendimiento para estudios preclínicos\u003cbr\u003e\n Cómo funciona\u003cbr\u003e\n Principio del ensayo Total-AlphaLISA SureFire Ultra\u003cbr\u003e\n El ensayo Total-AlphaLISA SureFire Ultra mide el nivel de expresión de una proteína objetivo en un lisado celular.\u003cbr\u003e \nEl ensayo Total-AlphaLISA SureFire Ultra utiliza dos anticuerpos que reconocen dos epítopos distales diferentes en la proteína diana. Los ensayos AlphaLISA requieren dos tipos de microesferas: aceptoras y donantes. Las microesferas aceptoras están recubiertas con un agente patentado CaptSure™ para inmovilizar específicamente el anticuerpo específico del ensayo, marcado con una etiqueta CaptSure. Las microesferas donantes están recubiertas con estreptavidina para capturar uno de los anticuerpos de detección, que está biotinilado. En presencia de la proteína diana, los dos anticuerpos acercan las microesferas donadoras y aceptoras, por lo que el oxígeno singlete transfiere energía para excitar la microesfera aceptora, lo que permite la generación de una señal alfa luminiscente. La cantidad de luz emitida es directamente proporcional a la cantidad de proteína presente en la muestra. \u003c\/p\u003e\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\n\n\n\n\u003cp\u003e\u003c\/p\u003e\n\n\n\n\u003cp\u003eProtocolo de ensayo de dos placas Total-AlphaLISA SureFire Ultra\u003cbr\u003e \nEl protocolo de dos placas implica el cultivo y tratamiento de las células en una placa de 96 pocillos antes de la lisis, y la posterior transferencia de los lisados ​​a una placa OptiPlate™ de 384 pocillos antes de añadir los reactivos de detección Total-AlphaLISA SureFire Ultra. Este protocolo permite monitorizar la viabilidad y la confluencia celular. Además, los lisados ​​de un solo pocillo pueden utilizarse para medir múltiples dianas. \u003c\/p\u003e\n\n\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\u003cbr\u003e\n\n\n\n\n\n\n\n\n\n\n\n\u003cp\u003e Protocolo de ensayo de una placa Total-AlphaLISA SureFire Ultra\u003cbr\u003e\n La detección de la proteína diana total con los reactivos AlphaLISA SureFire Ultra se puede realizar en una sola placa, utilizada para cultivo, tratamiento y lisis. No requiere lavado. Este protocolo, diseñado por HTS, permite la miniaturización manteniendo la calidad de AlphaLISA SureFire Ultra.\u003cbr\u003e\n Versatilidad de ensayos\u003cbr\u003e\n Expresión de FOXO1 en varias líneas celulares\u003cbr\u003e \nLas células adherentes se cultivaron hasta confluencia en un matraz T175 a 37 °C y 5 % de CO₂, y se lisaron con tampón de lisis a una densidad de 0,5 x 10⁻ células\/ml. Las células en suspensión se recogieron, se lavaron con HBSS y se lisaron con tampón de lisis a una densidad de 1,6 x 10⁻ células\/ml.\u003cbr\u003e\n Los niveles de FOXO1 se evaluaron mediante el ensayo AlphaLISA SureFire Ultra. Para la detección, se transfirieron 10 µL de lisado celular a una placa OptiPlate blanca de 384 pocillos, seguidos de 5 µL de mezcla aceptora y se incubaron durante 1 hora a temperatura ambiente. Finalmente, se añadieron 5 µL de mezcla donante a cada pocillo y se incubaron durante 1 hora a temperatura ambiente en oscuridad. La placa se leyó en un analizador Envision con la configuración estándar de AlphaLISA.\u003cbr\u003e\n La proteína FOXO1 total se expresa en una amplia gama de tipos de células con alta expresión en las líneas celulares Ramos, C2C12 y Hep G2.\u003cbr\u003e\n Sensibilidad del ensayo\u003cbr\u003e\n Sensibilidad del ensayo: lisado celular\u003cbr\u003e\n El lisado celular se preparó a partir de células HEK293 sembradas en matraces T175 y cultivadas hasta la confluencia y luego se lisó con 3 ml de tampón de lisis durante 10 minutos a temperatura ambiente con agitación.\u003cbr\u003e \nLos lisados ​​se diluyeron en serie en tampón de lisis y se analizaron los niveles de fosfo (Ser256) y FOXO1 total utilizando los respectivos kits AlphaLISA SureFire Ultra. Para la detección, se transfirieron 10 µL de lisado a una placa OptiPlate blanca de 384 pocillos, seguidos de 5 µL de mezcla aceptora y se incubaron durante 1 hora a temperatura ambiente. Finalmente, se añadieron 5 µL de mezcla donadora a cada pocillo y se incubaron durante 1 hora a temperatura ambiente en oscuridad. La placa se leyó en un Envision con la configuración estándar de AlphaLISA.\u003cbr\u003e\n El número aproximado de células por punto de datos se indica en el gráfico. La línea punteada representa el fondo del ensayo. Este ensayo puede detectar la expresión de FOXO1 en menos de 1250 células por punto de datos.\u003cbr\u003e\n Aplicación: Señalización celular\u003cbr\u003e\n Compatible con automatización: Sí\u003cbr\u003e\n Marca AlphaLISA SureFire Ultra\u003cbr\u003e\n Modalidad de detección alfa\u003cbr\u003e\n Tiempo de protocolo: 2 h a temperatura ambiente\u003cbr\u003e\n Volumen de muestra: 10 µL\u003cbr\u003e\n Condiciones de envío - Envío en Blue Ice\u003cbr\u003e\n Objetivo-FOXO1\u003cbr\u003e\n Clase objetivo: fosfoproteínas\u003cbr\u003e\n Especie objetivo: ratón humano\u003cbr\u003e\n Tecnología-Alfa\u003cbr\u003e\n Área terapéutica-Neurociencia metabólica oncológica\u003cbr\u003e\n Tamaño de la unidad: 500 puntos de ensayo\u003c\/p\u003e","brand":"Revvity","offers":[{"title":"Default Title","offer_id":46774620848297,"sku":"ALSU-TFOXO1-A500","price":0.99,"currency_code":"USD","in_stock":true}],"url":"https:\/\/iright.com\/es\/products\/revvity-alsu-tfoxo1-a500","provider":"Iright","version":"1.0","type":"link"}