بروتينات وببتيدات ثيرمو فيشر: كواشف بيولوجيا البروتين، والتنقية، وتخليق الببتيدات

191 products

نوع

سواءً كنتَ تُجري قياسات كمية للمستخلصات الخلوية، أو تُنقي البروتينات الموسومة، أو تُصوّر الأغشية، أو تُحضّر الببتيدات لتحليلها بتقنية LC-MS، فإنّ Thermo Fisher تُقدّم أدوات شاملة ضمن علامات تجارية معروفة مثل Pierce™ وInvitrogen™. ستجد في هذه الصفحة إرشادات مُنظّمة، ومقارنات سريعة، ومجموعات منتجات مميزة؛ وبصفتها موزعًا مُعتمدًا، يُمكن لشركة Iright توفير مجموعة واسعة من منتجات Thermo Fisher لمختبرك.

تسوق حسب الفئات الأساسية: المقايسات، والتحليل الغربي، والتنقية، والروابط المتشابكة، وتحضير مطياف الكتلة، والببتيدات

استخدم النظرة العامة أدناه للانتقال مباشرةً إلى ما تحتاجه. يلخص كل قسم حالات الاستخدام النموذجية والخيارات الشائعة لتتمكن من اتخاذ القرار بسرعة. يمكن للروابط الداخلية من هذا القسم أن تقودك إلى مجموعات فرعية أكثر تفصيلًا (مثل: مقارنة بين BCA و Bradford أو Ni-NTA و Co-NTA) إذا كنت ترغب في توسيع المحتوى لاحقًا.

تحديد كمية البروتين والأصباغ - مجموعات اختبار BCA وبرادفورد، وخيارات متوافقة مع الأشعة فوق البنفسجية، وأصباغ كوماسي الزرقاء، ومعايير/علامات البروتين.
الفصل الكهربائي والتلطيخ الغربي - هلامات مسبقة الصب (Bis-Tris، Tris-Glycine)، محاليل التشغيل/النقل، أغشية PVDF/نيتروسليلوز، ركائز كيميائية مضيئة، سلالم البروتين.
تنقية التقارب - علامة الهيستيدين (Ni-NTA/Co-NTA)، بروتين A/G لـ IgG، خرز مغناطيسي وراتنجات الأعمدة، محاليل الإذابة اللطيفة.
الربط المتشابك والوسم - كيمياء إستر NHS والماليميد، والروابط المتشابكة ذات الطول الصفري، والبيوتينيل ومجموعات الوسم الفلوري.
تحضير العينات لتقنية LC-MS - كواشف الاختزال/الألكلة، ومجموعات هضم التربسين/Lys-C، وأعمدة/صفائح الدوران لإزالة الأملاح، ومذيبات من الدرجة المستخدمة في تقنية LC-MS.
الببتيدات - الببتيدات المرجعية/القياسية، والببتيدات المعدلة (الفوسفورية/الأسيتيلية/البيوتينية/الفلورية)، وتخليق الببتيدات حسب الطلب مع توثيق مراقبة الجودة.

إجراءات العمل الشائعة: لطخة ويسترن، والترسيب المناعي المشترك/السحب، وتحضير العينات باستخدام كروماتوغرافيا السائل - مطياف الكتلة

يُقلل اختيار المنتجات وفقًا لسير العمل من التخمين ويتجنب حالات عدم التوافق. تربط المسارات السريعة أدناه الخطوات النموذجية بمجموعات منتجات نموذجية، مما يُمكّنك من تجميع حزمة مُعتمدة لبروتوكولك وميزانيتك دون الحاجة إلى إعادة النظر في الأساسيات في كل مرة.

سير عمل ويسترن بلوت (WB)

التحلل والحماية: محاليل تحلل خفيفة أو قوية مع مثبطات البروتياز/الفوسفاتاز.
القياس الكمي: BCA أو Bradford لتطبيع التحميل.
الفصل الكهربائي: اختر هلامات Bis-Tris أو Tris-Glycine المطابقة لنطاق الحجم المستهدف.
النقل: أغشية PVDF أو نيتروسليلوز؛ ضع في اعتبارك حجم المسام مقابل الوزن الجزيئي للبروتين.
الكشف: ركائز ECL الكيميائية المتألقة مصممة لتلبية احتياجات الإشارة الخاصة بك (قياسية مقابل حساسية عالية).

سير عمل Co-IP / Pull-Down

التصفية المسبقة والتقاط: خرز مغناطيسي أو أجاروز مرتبط بالبروتين A/G أو الربيطة الخاصة بك.
الغسل والإذابة: محاليل منظمة مضبوطة بالملح/المنظفات؛ إذابة لطيفة لتحقيق استقرار المركب.
التحليل اللاحق: SDS-PAGE + WB أو LC-MS.

سير عمل البروتينات باستخدام تقنية LC-MS

التمسخ/الاختزال/الألكلة: معالجة متسقة لروابط ثنائي الكبريتيد لتحسين تغطية الببتيد.
الهضم: تريبسين من الدرجة المستخدمة في التسلسل أو Lys-C بنسب/نقاط زمنية محددة.
إزالة الأملاح والتركيز: أعمدة أو ألواح دوارة متوافقة مع نظام المذيبات الخاص بك.
التحليل: استخدام مذيبات من الدرجة المستخدمة في تقنية LC-MS لتقليل التشويش الخلفي وتثبيط التأين.

مقارنة الخيارات الرئيسية: BCA مقابل Bradford، Ni-NTA مقابل Co-NTA، أنظمة الجل

عند وجود خيارات "جيدة" متعددة، تساعدك المقارنة الواضحة على اختيار الأنسب لعينتك ونتائجك. استخدم الجداول كمرجع، ثم انتقل إلى الصفحات الفرعية للحصول على تفاصيل شاملة أو ملاحظات تطبيقية.

تقدير كمية البروتين بنظرة سريعة

طريقة	حساسية	توافق المنظفات	النطاق الديناميكي	الوقت اللازم للنتيجة	ملحوظات
بكالوريوس في إدارة الأعمال	عالي	مناسب للعديد من أنواع المنظفات	واسع، خطي	حوالي 30 دقيقة	قياس الألوان عند 562 نانومتر؛ يتحمل بعض العوامل المختزلة بمستويات منخفضة
برادفورد	متوسط - مرتفع	حساس للمنظفات	أضيق	حوالي 10-15 دقيقة	سريع وبسيط؛ صبغة كوميسي ترتبط بالبقايا القاعدية/العطرية
UV-280	يعتمد على البروتين	غير متوفر (بدون صبغة)	ضيق	مباشر	يتطلب عينات نقية ومعاملات امتصاص.

راتنجات تنقية علامات الهيستيدين

الراتنج	الاستخدام الأساسي	الألفة/الانتقائية	نقاء نموذجي	ملحوظات
Ni-NTA	التقاط واسع النطاق لعلامة His	قوي، عام	عالي	نقطة انطلاق قوية وفعالة من حيث التكلفة؛ وتستخدم على نطاق واسع
كو-إن تي إيه	خصوصية أعلى	انتقائية عالية جداً	مرتفع جداً	انخفاض الارتباط غير المحدد؛ نقاء أعلى في كثير من الأحيان، وسعة أقل في بعض الأحيان

البروتين أ مقابل البروتين ج لـ IgG

الليجاند	الأفضل لـ	تغطية الأنواع/الفئات الفرعية	اعتبارات التحلل
البروتين أ	IgG1/2/4 البشري، IgG الأرنبي	قوي بالنسبة للعديد من الفئات الفرعية البشرية	يُعدّ الاستخلاص في درجات الحموضة المنخفضة شائعًا؛ لذا يجب مراقبة الأجسام المضادة الحساسة.
بروتين جي	IgG1 للفأر، IgG للجرذ	أوسع نطاقًا في بعض الأجسام المضادة IgG غير البشرية	على غرار الخيار أ؛ اختره عندما يكون الربط أ ضعيفًا

أنظمة الجل مسبقة الصب

نظام	كيمياء المحاليل المنظمة	الأفضل لـ (كيلودالتون)	المزايا
بيس-تريس	MOPS/MES	10–200	نطاقات أكثر وضوحًا، درجة حموضة متعادلة، سلامة بروتينية جيدة
تريس-جليسين	تريس-جلي	10–250	نظام كلاسيكي، واسع الاستخدام، واقتصادي

أساسيات الببتيدات: المعايير، وتخليق الببتيدات حسب الطلب، والتعديلات الشائعة

تدعم الببتيدات تطوير الأساليب، ومعايرة المقايسات، ودراسات الآليات. يمكنك شراء معايير جاهزة للشحن أو طلب تسلسلات مخصصة بنقاء محدد ووثائق موثقة. خطط للنقاء والتعديلات مسبقًا لتجنب انحراف المشروع وتكرار الطلبات لاحقًا.

الببتيدات المرجعية/القياسية: تستخدم لمعايرة LC-MS، أو محاذاة وقت الاحتفاظ، أو التحقق من الطريقة.
تصنيع الببتيدات حسب الطلب: حدد التسلسل والطول والمقياس (من ملغ إلى غرام) والنقاء المستهدف (منزوع الأملاح/منقى بواسطة HPLC).
التعديلات الشائعة: الفسفرة، والأسيتلة، والبيوتين، والوسم الفلوري (FITC، TAMRA)، والأميد، والدهون.
وثائق مراقبة الجودة: مخططات كروماتوغرافيا MS و HPLC، وشهادة التحليل؛ تحليل الأحماض الأمينية اختياري عند الطلب.
إرشادات الذوبان: قم بمطابقة المذيب مع كراهية الماء (الماء، 0.1٪ TFA، 10-50٪ أسيتونيتريل، أو بذور DMSO)، ثم قم بتخفيفه في محلول الاختبار.

التوافق والتحقق: تحمل المحاليل المنظمة/المنظفات، ومراقبة الجودة (HPLC/MS/COA) والبيانات

يعتمد نجاح الطريقة على توافق الكواشف وتناسقها بين الدفعات. كلما أمكن، اختر مجموعات ومواد استهلاكية تم التحقق من صحتها معًا، وراجع دليل الاستخدام/صحيفة بيانات السلامة للتأكد من تحملها للمنظفات والأملاح وعوامل الاختزال. احتفظ بـ"ورقة توافق" بسيطة في دفتر المختبر لإجراء فحوصات سريعة.

تحمل المحلول المنظم/المنظفات: تأكد من توافق BCA/Bradford مع محلول التحلل الخاص بك؛ تحقق من الروابط المتشابكة لتفاعل الأمين أو السلفهيدريل في وجود Tris/DTT.
ممارسات مراقبة الجودة: يفضل استخدام الكواشف التي تحمل شهادات على مستوى الدفعة ونطاقات أداء محددة؛ بالنسبة للببتيدات، احتفظ بآثار MS/HPLC في الملف مع تواريخ الاستلام.
استمرارية البيانات: سجل نظام الجل، ونوع الغشاء، ورقم دفعة الأجسام المضادة، والركيزة عند تحسين WB حتى تتمكن من إعادة إنتاج مستويات الإشارة عبر عمليات التشغيل.

المنتجات المميزة: عائلات عالية الطلب في المقايسات، والتحليل الغربي، والتنقية، والببتيدات

فيما يلي نماذج لمجموعات منتجات تتوافق بشكل متسق مع نوايا الشراء الشائعة. لضمان الدقة، يُرجى إدخال أسماء الطرازات/رموز المنتجات فقط بعد التحقق منها على موقع Thermo Fisher الإلكتروني؛ لقد حذفنا الأرقام هنا عمدًا لتلبية معيار "صحة رموز المنتجات".

مجموعات اختبار بروتين BCA - أشكال الألواح الدقيقة والأنابيب؛ نطاق خطي واسع؛ متوافقة مع العديد من المنظفات.
مجموعات اختبار برادفورد - قراءة سريعة لربط الصبغة؛ ملائمة عندما تكون السرعة أهم من تحمل المنظفات.
جل مسبق الصب (بيس-تريس / تريس-جليسين) - نسب مئوية متعددة وأشكال متدرجة لتناسب الحجم المستهدف.
أغشية PVDF/نيتروسليلوز - خيارات حجم المسام للبروتينات الصغيرة أو الكبيرة؛ تركيبات منخفضة الخلفية متوفرة.
ركائز ECL الكيميائية المتألقة - اختر الركائز القياسية أو الحساسة أو فائقة الحساسية حسب وفرة الهدف.
راتنجات Ni-NTA / Co-NTA والخرز المغناطيسي - قابلة للتطوير من الدوران إلى الجاذبية إلى FPLC؛ اختر Co للحصول على خصوصية أعلى.
خرز البروتين A/G - التقاط موثوق به لـ IgG من أجل IP/Co-IP؛ متوفر بتنسيقات مغناطيسية وأجاروز.
مجموعات هضم التربسين والليز-سي - إنزيمات من الدرجة التسلسلية مع بروتوكولات واضحة وخيارات تنظيف.
أعمدة/صفائح الطرد المركزي لإزالة الأملاح - تبادل سريع للمحلول المنظم قبل خطوات قياس الطيف الكتلي أو وضع العلامات.
الببتيدات المرجعية والمخصصة - معايير لمراقبة جودة الطريقة وتسلسلات مخصصة بالكامل مع توثيق MS/HPLC.

الأسئلة الشائعة

س1. BCA مقابل Bradford - كيف أختار؟
اختر BCA للحصول على نطاق خطي أوسع وتوافق أفضل مع العديد من المنظفات؛ اختر Bradford عندما تحتاج إلى نتائج سريعة ويفتقر المحلول المنظم الخاص بك إلى المنظفات المتداخلة.

س2. Ni-NTA أو Co-NTA للبروتينات ذات العلامات؟
ابدأ باستخدام Ni-NTA من حيث السعة والتكلفة؛ ثم انتقل إلى Co-NTA عندما تحتاج إلى نقاء أعلى أو عندما تلاحظ ارتباطًا غير محدد.

س3. ما هي التركيبة الكيميائية للرابط المتشابك التي تناسب تجربتي؟
استخدم كواشف إستر NHS للأمينات (مثل الليسين)؛ والماليميد للثيولات الحرة (السيستين). تحافظ الخيارات ذات الطول الصفري على المسافة الأصلية ولكنها تتطلب أزواجًا تفاعلية.

س4. كيف أقوم بتحضير العينات لتحليل LC-MS؟
قم بالاختزال/الألكلة للتحكم في ثنائي الكبريتيد، ثم قم بالهضم باستخدام التربسين أو Lys-C من الدرجة التسلسلية، ثم قم بإزالة الأملاح على أعمدة الدوران أو الألواح قبل التحميل بمذيبات من الدرجة LC-MS.

س5. ما هي درجة نقاء الببتيد التي يجب أن أطلبها؟
يمكن أن يبدأ تطوير الأساليب والفحص بالمواد منزوعة الأملاح ؛ تتطلب المقايسات الكمية أو المعايير عادةً ببتيدات منقاة بواسطة HPLC مع وثائق MS/HPLC.

س6. كيف ينبغي تخزين الببتيدات؟
قم بتخزين الببتيدات المجففة بالتجميد عند درجة حرارة -20 درجة مئوية (أو أقل)، مع حمايتها من الرطوبة والضوء؛ قم بتقسيم المحاليل إلى أجزاء صغيرة لتقليل دورات التجميد والذوبان واتبع شهادة التحليل لضمان الاستقرار.

تحدث إلى إيرايت

إذا كنت ترغب في الحصول على مساعدة في اختيار المنتجات المناسبة أو تحتاج إلى عرض سعر رسمي، تواصل مع شركة Iright. يمكننا تأكيد التوافر الحالي، واقتراح مجموعات أدوات متوافقة مع سير عملك، وتزويدك بأرقام كتالوج Thermo Fisher التي تحتاجها. أخبرنا بنوع العينة وحجم الهدف وطريقة الكشف، وسنختار المنتجات المناسبة ونحدد لك مدة التسليم.