كواشف تحضير وفصل الخلايا من شركة BD (خلايا الدم المحيطية أحادية النواة، المغناطيسية، تحليل خلايا الدم الحمراء)

تحتاج إلى معلقات خلوية نقية ومتجانسة قبل إجراء أي تحليل تدفق خلوي أو اختبار وظيفي ذي مغزى. تجمع هذه المجموعة أدوات التحضير والفصل الأكثر استخدامًا من BD، بدءًا من عزل الخلايا الليمفاوية أحادية النواة في الدم المحيطي (PBMC) في الأنابيب المغلقة (CPT™) وصولًا إلى إثراء الخلايا المغناطيسي (BD IMag™)، وتحليل كريات الدم الحمراء، والتثبيت/النفاذية، مما يُمكّنك من توحيد إجراءات ما قبل التحليل والحصول على بيانات قابلة للتكرار. بصفتنا موزعًا معتمدًا، توفر Iright خيارات متنوعة من منتجات BD وعروض أسعار سريعة الاستجابة لتناسب سير عمل مختبرك.

مقدمة: تحضير وفصل خلايا BD لقياس التدفق الخلوي

يجب أن يقلل تحضير العينات من التباين، لا أن يزيده. ستجد هنا طرقًا عملية للانتقال من الدم الكامل أو المعلقات المختلطة إلى مجموعات الخلايا المستهدفة ذات الحيوية العالية والنمط الظاهري المحفوظ، والجاهزة لتحليل التدفق الخلوي، أو الزراعة، أو قراءة الخلايا المفردة. يمكن لـ Iright مساعدتك في مقارنة الصيغ، والتحقق من أوقات التسليم، وضمان التوافق عبر سير عمل BD الخاص بك.

نظرة عامة على عائلة المنتجات: عزل الخلايا الليمفاوية أحادية النواة من الدم المحيطي CPT™، التصوير بالرنين المغناطيسي BD™، تحليل خلايا الدم الحمراء، التثبيت/التثبيت الدائم

تغطي مجموعة منتجات BD المسارات الرئيسية للتحليل المسبق التي ستختارها على الأرجح في عملك اليومي. يُسهّل أنبوب CPT™ المغلق عزل الخلايا الليمفاوية أحادية النواة من الدم المحيطي (PBMC) داخل أنبوب التجميع الأساسي؛ ويتيح BD IMag™ الاختيار المغناطيسي الإيجابي أو السلبي؛ ويعمل تحلل كريات الدم الحمراء على تنقية الدم الكامل بعد التلوين؛ بينما يدعم Cytofix/Cytoperm™ التلوين الخلوي الداخلي القوي مع الحفاظ على خصائص التشتت. تتيح لك هذه الخيارات مجتمعةً تحقيق التوازن بين النقاء والإنتاجية ومتطلبات المعالجة اللاحقة.

دليل الاختيار: نوع العينة ← الخلايا المستهدفة ← الطريقة (CPT، تحلل خلايا الدم الحمراء، المغناطيسية)

يبدأ كل بروتوكول بقيود. استخدم هذا المنطق السريع لاختيار مسار البداية، ثم قم بتحسينه بمواصفات على مستوى المنتج.

• الدم الكامل → الخلايا أحادية النواة في الدم المحيطي للتنميط المناعي أو التخزين الحيوي : اختر CPT™ (سيترات الصوديوم أو الهيبارين) لفصل الخلايا أحادية النواة داخل أنبوب مغلق؛ هذا يقلل من التعامل المفتوح ويوحد عملية الاستخلاص.
  
• تنظيف سريع للكريات البيضاء بعد التلوين باستخدام الدم الكامل : استخدم محلول تحلل كريات الدم الحمراء BD Pharm Lyse™ (10×، قائم على كلوريد الأمونيوم) لإزالة كريات الدم الحمراء مع الحفاظ على كريات الدم البيضاء قابلة للحياة.
  
• قم بإثراء مجموعة فرعية (مثل خلايا CD4 T) لإجراء فحوصات وظيفية : استخدم مجموعات إثراء BD IMag™ مع مغناطيس فصل الخلايا BD IMag™ للاختيار غير المتأثر (السلبي) أو الإيجابي، مع الحفاظ على الحواتم السطحية للتدفق متعدد الألوان.
  
• الأهداف داخل الخلايا (السيتوكينات، عوامل النسخ) : قم بتثبيتها ونفاذيتها باستخدام محاليل أو مجموعة BD Cytofix/Cytoperm™ للحفاظ على التألق ودقة اللوحة.

نصيحة: عند الحاجة إلى قراءات وظيفية، يُفضّل استخدام التحديد السلبي (الخلايا غير المعالجة) بدلاً من التحديد الإيجابي لتقليل تشوهات ارتباط المستقبلات. يوفر BD IMag™ مجموعات إثراء "-DM" مُعتمدة لمجموعات فرعية بشرية شائعة.

مقارنة الحلول: CPT™ مقابل فيكول، الاختيار الإيجابي مقابل الاختيار السلبي، التثبيت/الدائم

غالباً ما يعتمد اختيار المسارات على الاتساق وجودة الخلايا ووقت التدريب العملي. يوضح الجدول الاختلافات العملية التي ستشعر بها أثناء العمل.

سيناريو	أفضل مسار BD مناسب	ما ستجنيه	الاعتبارات
الخلايا الليمفاوية أحادية النواة في الدم المحيطي المعيارية للتدفق/الزراعة	سي بي تي™ سترات الصوديوم/الهيبارين	الفصل في أنبوب مغلق، عدد أقل من عمليات النقل، تباين أقل بين المشغلين	يتطلب إعدادات طرد مركزي متوافقة؛ ويحدد شكل الأنبوب (4 مل مقابل 8 مل) حجم السحب.
تنظيف سريع للدم الكامل الملطخ	فارم لايس™ (10×)	إزالة فعالة لخلايا الدم الحمراء، وفصل جيد بين الخلايا الليمفاوية والحطام في مخططات التدفق	ليس مثبتًا؛ تظل قابلية البقاء على قيد الحياة بعد ذلك عالية، لكن التلوين داخل الخلايا لا يزال بحاجة إلى تثبيت/نفاذية منفصلة.
مجموعة فرعية عالية النقاء لتحليلات الوظائف	اختيار سلبي BD IMag™	خلايا سليمة مع مستقبلات محفوظة؛ سير عمل مغناطيسي بسيط	يتطلب الأمر مغناطيسًا ومجموعة إثراء محددة لمجموعتك الفرعية.
لوحات الأهداف داخل الخلايا	سايتوفيكس/سايتوبرم™	كيمياء تثبيت/نفاذية مثبتة، متوفرة في شكل مجموعة أدوات	اختر الحلول المجمعة مقابل الحلول المستقلة بناءً على مدى تعقيد اللوحة وحجم الدفعة.

المنتجات الشائعة والمواصفات الرئيسية: أنابيب CPT™، مغناطيس BD IMag™، جهاز تحليل خلايا الدم الحمراء، Cytofix/Cytoperm™

فيما يلي نماذج من المنتجات المطلوبة بكثرة مع أرقامها في كتالوج BD (تم التحقق منها). استخدمها كنقاط انطلاق لإعداد طريقة الطلب.

عزل الخلايا الليمفاوية المحيطية أحادية النواة في الأنابيب المغلقة (CPT™) :

• أنبوب BD Vacutainer® CPT™ - سترات الصوديوم، 4 مل (13×100 مم) - رقم المنتج 362760. أنبوب زجاجي محكم الإغلاق مع حاجز هلامي ومحلول Ficoll™ Hypaque™؛ فصل الخلايا الليمفاوية أحادية النواة في الدم المحيطي (PBMC) بشكل موحد في الأنبوب الأساسي.
  
• BD Vacutainer® CPT™— سترات الصوديوم، 8 مل (16×125 مم) — رقم المنتج 362761. حجم سحب أكبر لإنتاجية أعلى من الخلايا الليمفاوية أحادية النواة في الدم المحيطي (PBMC) في ظل نفس سير العمل المغلق.
  
• BD Vacutainer® CPT™—هيبارين الصوديوم، 8 مل — رقم المنتج 362753. نسخة تحتوي على الهيبارين للمختبرات التي تفضل الهيبارين على السترات.
  

الفصل المغناطيسي للخلايا (BD IMag™) :

• مغناطيس فصل الخلايا BD IMag™ — رقم الكتالوج 552311. حامل مغناطيسي دائم من العناصر الأرضية النادرة لأنابيب 12×75 مم أو 17×100 مم؛ يتيح عمليات اختيار سريعة موجبة/سالبة باستخدام جزيئات BD IMag™.
  
• مجموعة BD IMag™ لإثراء الخلايا اللمفاوية التائية CD4 البشرية - DM — رقم المنتج 557939. مجموعة كواشف للاختيار السلبي للخلايا التائية CD4 من الخلايا اللمفاوية المحيطية أحادية النواة، مصممة للاستخدام على مغناطيس IMag.
  
• مجموعة BD IMag™ لإثراء الخلايا التائية الساذجة CD4 البشرية - DM - رقم المنتج 558521. إثراء غير معالج للخلايا التائية الساذجة CD4⁺ عبر دورات اختيار سلبية متكررة.
  

تحلل كريات الدم الحمراء والتلوين داخل الخلايا:

• محلول التحلل BD Pharm Lyse™ (10×)، 100 مل - رقم المنتج 555899. تحلل كريات الدم الحمراء باستخدام كلوريد الأمونيوم؛ وتبقى كريات الدم البيضاء قابلة للحياة لإجراء التحليل اللاحق.
  
• مجموعة محلول التثبيت/النفاذية BD Cytofix/Cytoperm™، تكفي لـ 250 اختبارًا - رقم المنتج 554714. تتضمن المجموعة محلول Cytofix/Cytoperm™ (رقم المنتج 554722) ومحلول Perm/Wash (رقم المنتج 554723) لتلوين الخلايا الداخلية بشكل قوي.

سير العمل وأفضل الممارسات: عزل الخلايا الليمفاوية أحادية النواة في الدم المحيطي باستخدام خطوات CPT™ وBD IMag™

تتحقق النتائج المتسقة من خلال تقليل التعامل المفتوح ومعايرة المغناطيسات/أجهزة الطرد المركزي. تعكس التدفقات العامة التالية إرشادات شركة BD؛ لذا يُرجى دائمًا اتباع تعليمات الاستخدام الخاصة بكل منتج.

عزل الخلايا أحادية النواة من الدم المحيطي باستخدام نظام CPT™ المغلق : اسحب الدم الكامل مباشرةً في أنبوب CPT™؛ اقلبه برفق وفقًا لتعليمات الاستخدام؛ ثم قم بالطرد المركزي بحيث يشكل الجل حاجزًا بين الخلايا أحادية النواة (في البلازما) وخلايا الدم الحمراء/الخلايا المحببة؛ انقل أو اسكب الجزء الغني بالخلايا أحادية النواة لغسله وعدّه. يقلل هذا الأسلوب المغلق من التباين اليدوي مقارنةً بطبقات فيكول المفتوحة، وهو مناسب تمامًا لجمع عينات الأبحاث السريرية المتكررة.

تقنية BD IMag™ للاختيار السلبي (مثال: خلايا CD4 التائية) : قم بوسم الخلايا الليمفاوية المحيطية أحادية النواة (PBMCs) باستخدام كواشف التخصيب المناسبة "-DM"؛ ضع الأنابيب في المغناطيس 552311 للاحتفاظ بالخلايا غير المرغوب فيها الموسومة؛ اجمع الجزء غير المعالج؛ كرر عملية الاختيار إذا لزم الأمر لزيادة إنتاجية الخلايا الساذجة. حافظ على ثبات درجات الحرارة والأوقات؛ تجنب الخلط المفرط للحفاظ على المستضدات.

تحلل كريات الدم الحمراء (التنظيف بعد التلوين) : خفف محلول Pharm Lyse™ إلى تركيز 1×، ثم عالج الدم الكامل الملون لتحليل كريات الدم الحمراء، ثم اغسله واجمعه. ستلاحظ تحسنًا في فصل الخلايا الليمفاوية عن الحطام في تحليل التشتت الأمامي/الجانبي مع الحفاظ على حيوية كريات الدم البيضاء لمزيد من المعالجة.

التلوين داخل الخلايا : قم بالتثبيت والنفاذية باستخدام محاليل Cytofix/Cytoperm™ (أو مجموعة) قبل إضافة الأجسام المضادة داخل الخلايا؛ يتم استخدام هذه الكيمياء على نطاق واسع لتحقيق استقرار إشارات الفلورة وإمكانية الوصول إلى الإبيتوب للسيتوكينات وعوامل النسخ.

الأسئلة الشائعة: عزل الخلايا الليمفاوية أحادية النواة في الدم المحيطي، والاختيار المغناطيسي، وتحليل كريات الدم الحمراء، والتثبيت/النفاذية

لتوفير وقتك، إليك إجابات موجزة على الأسئلة التي نسمعها في أغلب الأحيان - مُحسّنة وفقًا لغرض البحث واحتياجات المختبرات الواقعية.

س1. CPT™ مقابل فيكول المفتوح - لماذا نختار CPT؟
يُجري جهاز CPT™ فصلًا للكثافة داخل الأنبوب الرئيسي، مما يُسهّل التعامل معه ويُقلّل من التباين بين المُشغّلين. وهو مثالي للأبحاث متعددة المواقع أو عالية الإنتاجية حيث تُعدّ قابلية التكرار أمرًا بالغ الأهمية، مع خيارات سترات بحجم 4 مل (362760) و8 مل (362761) وأنبوب هيبارين بحجم 8 مل (362753).

س2. متى يجب عليّ استخدام التحديد المغناطيسي السلبي مقابل التحديد المغناطيسي الإيجابي؟
استخدم تقنية الانتقاء السلبي للخلايا "غير المعالجة" عندما تكون القراءات الوظيفية أو سلامة المستقبلات بالغة الأهمية؛ واستخدم تقنية الانتقاء الإيجابي عندما تحتاج إلى أقصى قدر من النقاء بسرعة ويكون تعديل المستقبلات مقبولاً. توفر BD IMag™ مجموعات إثراء معتمدة لكلا الطريقتين، وتُستخدم على المغناطيس 552311.

س3. هل يقوم Pharm Lyse™ بإصلاح الخلايا؟
لا، Pharm Lyse™ هو محلول تحلل يحتوي على كلوريد الأمونيوم ولا يحتوي على مواد تثبيت؛ تبقى الكريات البيضاء حية بعد تحلل الكريات الحمراء، وهو أمر مفيد قبل الزراعة أو أي معالجة أخرى. أما تثبيت/نفاذية الأهداف داخل الخلايا فهو خطوة منفصلة باستخدام Cytofix/Cytoperm™.

س4. ما الذي تحتويه مجموعة Cytofix/Cytoperm™ مقارنةً بالمحاليل؟
تتضمن مجموعة 554714 محلول Cytofix/Cytoperm™ (554722) و Perm/Wash (554723) لتسهيل سير العمل داخل الخلايا؛ يمكنك أيضًا الحصول على المحاليل بشكل فردي اعتمادًا على الإنتاجية وتصميم اللوحة.

س5. هل أنابيب CPT™ مخصصة للتشخيص المختبري؟
تم تصميم CPT™ لجمع الدم الكامل والفصل اللاحق للخلايا أحادية النواة لإجراء الفحص التشخيصي في المختبر - تحقق دائمًا من الملصق التنظيمي المحلي على صفحة BD الخاصة بمنطقتك واتبع تعليمات الاستخدام.

تحدث إلى إيرايت

أخبرنا بنوع عينتك، والخلايا المستهدفة، والتحليل اللاحق. سنؤكد لك رمز المنتج (SKU) الخاص بشركة BD (الحجم، ومضاد التخثر، ومجموعة العينات الفرعية)، ونشاركك أوقات التسليم الحالية، ونوصي بالملحقات (الحوامل، والمخاريط، والمرشحات) التي تضمن اتساق عملية التحضير. إذا كنت بصدد إنشاء برنامج متعدد المواقع، فيمكننا توحيد تنسيقات CPT™ ومجموعات IMag™ بين المواقع لتبسيط إجراءات التشغيل القياسية.