Product Description
التحضير والتخزين: يُحفظ في درجة حرارة -20 درجة مئوية، بعيدًا عن الضوء. لا يحتوي هذا المستحضر على مواد حافظة، لذا يجب التعامل معه في ظروف معقمة. يُذاب تمامًا عند درجة حرارة 4 درجات مئوية قبل الاستخدام الأول. تُوزع حصص بحجم 25 مل (أو الأحجام المطلوبة للاستخدام لمرة واحدة) من المحلول المنظم الكامل في عبوات معقمة وتُحفظ عند درجة حرارة -20 درجة مئوية. يبقى المحلول المنظم الكامل مستقرًا عند درجة حرارة -20 درجة مئوية لمدة 6 أشهر. تُعتبر كل حصة للاستخدام لمرة واحدة، ويجب استخدامها بالكامل في يوم إذابتها لضمان فعاليتها المثلى (تجنب تكرار دورات التجميد والإذابة).
إجراءات التحليل الموصى بها: قياس التدفق الخلوي (التلوين المناعي الفلوري المباشر): 1. قم بإذابة محلول الفرز المسبق BD FACS™ بالكامل عند درجة حرارة 4 مئوية. 2. حضّر معلقات الخلايا المفردة من الأنسجة أو نخاع العظم أو الدم المحيطي أو مزارع الخلايا باستخدام البروتوكولات القياسية. 3. اغسل الخلايا مرتين بمحلول الفرز المسبق البارد الكامل. أعد تعليق الخلايا المترسبة في محلول الفرز المسبق البارد ليصل التركيز النهائي إلى حوالي 1 × 10⁷ خلية/مل. أ. إذا لزم الأمر، خفف الأجسام المضادة الفلورية إلى تركيزاتها المثلى المحددة مسبقًا في محلول الفرز المسبق الكامل. 4. أضف الكمية المناسبة من الجسم المضاد المقترن إلى معلق الخلايا. حضّن لمدة 20 دقيقة على الجليد بعيدًا عن الضوء. ب. يمكن زيادة وقت التلوين (≥ 45 دقيقة) اعتمادًا على قوة ارتباط الجسم المضاد المقترن بالفلور. ٥. اغسل الخلايا مرتين بمحلول الفرز المسبق الكامل. ثم قم بطرد الخلايا مركزياً عند ٣٠٠ × جم لمدة ٥ دقائق. بعد كل عملية طرد مركزي، اسحب السائل الطافي بعناية أو اقلب الأنابيب وجففها من كريات الخلايا. ٦. أعد تعليق كريات الخلايا في محلول الفرز المسبق الكامل، وانقل الخلايا المصبوغة إلى الأنابيب المناسبة لتحليل التدفق الخلوي و/أو الفرز (على سبيل المثال، اضبط الحجم النهائي لتوفير حوالي ٥ × ١٠⁶ خلية/مل). ٧. افرز الخلايا فوراً وفقاً لبروتوكول فرز مُحسَّن. ملاحظة ١: يمكن إضافة إنزيم DNase II إلى محلول الفرز المسبق للمساعدة في منع تكتل معلقات الخلايا التي تحتوي على نسبة عالية من موت الخلايا. وجود الحمض النووي الحر في معلق الخلايا قد يُساهم في تكتل الخلايا. إنزيم DNase I غير متوافق مع محلول الفرز المسبق نظراً لضرورة وجود الكاتيونات لكي يعمل. يحتوي إنزيم DNase II على مستويات من السموم الداخلية، وقد تختلف هذه المستويات باختلاف الدفعة. بحسب تطبيقك، قد ترغب في إضافة إنزيم DNase II إلى محلول الفرز المسبق. مع ذلك، قد تحتاج أيضًا إلى تحديد ما إذا كانت مستويات الإندوتوكسين مناسبة لتطبيقك. ملاحظة 2: لا يحتوي محلول الفرز المسبق على مضادات حيوية. يمكن إضافة المضادات الحيوية إليه حسب الحاجة. ملاحظة 3: يمكن استخدام محلول الفرز المسبق أيضًا للتلوين المناعي الفلوري غير المباشر للخلايا. في هذه الحالة، كرر الخطوتين 4 و5 باستخدام كواشف الخطوة الثانية عند استخدام الأجسام المضادة الأولية غير الموسومة أو الموسومة بالبيوتين. ملاحظة 4: يمكن أيضًا استخدام محلول الفرز المسبق للتلوين المناعي الفلوري للمستضدات السطحية التي تعبر عنها الخلايا المراد تثبيتها وتلوينها مناعيًا فلوريًا للكشف عن المستضدات داخل الخلوية مثل السيتوكينات وعوامل النسخ. يمكن إعادة تعليق الخلايا المصبوغة بمستضدات داخلية وحفظها (أي عند درجة حرارة 4 مئوية، بعيدًا عن الضوء) في محلول الفرز المسبق قبل تحليلها بتقنية قياس التدفق الخلوي. ملاحظة 5: محلول الفرز المسبق ليس محلول تجميع بعد الفرز. يُرجى تجميع الخلايا في محلول/وسط مناسب للتطبيقات اللاحقة. ملاحظة 6: محلول الفرز المسبق متوافق مع أصباغ حيوية الخلايا الشائعة الاستخدام مثل 7-AAD.
إشعارات المنتج: يُرجى مراجعة www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية. Alexa Fluor® علامة تجارية مسجلة لشركة Molecular Probes, Inc.، يوجين، أوريغون. Accutase علامة تجارية مسجلة لشركة Innovative Cell Technologies, Inc. Ficoll-Paque علامة تجارية لشركة Amersham Biosciences Limited. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية، وتقع في الولايات المتحدة.
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924