مجموعة CST، 12810S، PTMScan® Cleaved Caspase Substrate Motif [DE(T/S/A)D]

برنامج PTMScan للدراسة في مجال البحث. معلومات استخدام المنتج تُحلل الخلايا في محلول منظم يحتوي على اليوريا، وتُهضم البروتينات الخلوية بواسطة إنزيمات البروتياز، ثم تُنقى الببتيدات الناتجة باستخدام استخلاص الطور الصلب ذي الطور المعكوس. بعد ذلك، تُخضع الببتيدات لتنقية المناعة باستخدام جسم مضاد PTMScan® Motif مرتبط بخرزات بروتين A أجاروز. تُزال الببتيدات غير المرتبطة بالغسل، وتُستخلص الببتيدات الحاملة لتعديلات ما بعد الترجمة (PTM) باستخدام حمض مخفف. تُجرى عملية تنقية الطور المعكوس على رؤوس دقيقة لإزالة الأملاح وفصل الببتيدات عن الجسم المضاد قبل تركيز الببتيدات المُثرية لتحليلها بتقنية LC-MS/MS. توصي شركة CST باستخدام محلول PTMScan® IAP رقم 9993 المرفق مع المجموعة. تخزين تُزوَّد حبيبات الأجسام المضادة في محلول منظم IAP يحتوي على 50% جلسرين. يُحفظ في درجة حرارة -20 درجة مئوية. لا تُقسِّم الأجسام المضادة إلى أجزاء. بروتوكول البروتوكولات المتاحة: PTMScan خلفية الاستماتة عملية فيزيولوجية ينتج عنها موت خلوي مُبرمج ومنظم بدقة، وهي جزء طبيعي من النمو والتطور في الكائنات متعددة الخلايا. تُعد الكاسبازات، وهي بروتيازات سيستين موجهة بحمض الأسبارتيك، أساسية في آلية الاستماتة (1). يبدأ مسار داخلي سلسلة الاستماتة من إشارات تنشأ داخل الخلية، مثل تلف الحمض النووي، بينما يبدأ مسار خارجي الاستماتة استجابةً لإشارات خارج الخلية، مثل FasL. في كلتا الحالتين، تبدأ الكاسبازات البادئة، مثل كاسباز-8 و9، في شطر الركائز اللاحقة التي تشمل الكاسبازات المنفذة، مثل كاسباز-3، وهو أبرز كاسباز منفذ (2، 3). تُضخّم هذه الكاسبازات المنفذة سلسلة الاستماتة لاستهداف العديد من البروتينات الحيوية اللازمة لوظيفة الخلية الطبيعية. إلى جانب دورها في بيولوجيا النمو، فإن تنظيم موت الخلايا المبرمج له آثار واسعة النطاق على دراسة السرطان وأمراض المناعة الذاتية والأمراض المعدية، من بين أمراض أخرى (4). في البروتينوم البشري، توجد آلاف المواقع المعروفة أو المحتملة لانقسام الكاسبيز، وجميعها تنقسم عند بقايا حمض الأسبارتيك، أو في حالات نادرة، عند بقايا حمض الجلوتاميك. تحتوي الشظايا الناتجة التي تحتوي على أسبارتات في الطرف الكربوكسيلي عمومًا على النمط XEXD مع بعض الاختلافات (5). توفر مجموعة PTMScan Cleaved Caspase Substrate Motif [DE(T/S/A)D] طريقة فريدة وحساسة لتحديد كمية مئات من ركائز الكاسبيز المنقسمة، بما في ذلك كاسبيز-3 و7، وNEDD1، وHDAC3، وMCM4، وNotch1، وeIF2B، وraptor، وBid، وSmad6، وNFAT90، وPTEN، من بين أمراض أخرى. أسماء بديلة كاسباز؛ زخرفي