CST، 47972S، لوحة قياس التدفق الخلوي لعلامات الخلايا التائية الأساسية للفأر

مجموعة أدوات فحص لدراسة CD4 في الفئران / غرانزيم ب / CD3 إبسيلون في الفئران / FOXP3 / CD3G في الفئران / CD8A في مجال البحث. معلومات استخدام المنتج جميع الأجسام المضادة في هذه المجموعة متوافقة مع مجموعة تثبيت/نفاذية عامل النسخ FoxP3 رقم 43481، ويمكن استخدامها في مزيج تلوين واحد على الخلايا المثبتة والمنفذة. قبل التثبيت وحضانة الأجسام المضادة، نوصي بإضافة صبغة حيوية قابلة للتثبيت، مثل صبغة Ghost Dye Violet 510 Fixable Viability Dye، لتمكين تحديد الخلايا الميتة واستبعادها من التحليل. استراتيجية تحديد مجموعات فرعية أساسية من الخلايا التائية: في حال استخدام صبغة حيوية قابلة للتثبيت، يتم أولاً تحديد الخلايا الحية. ثم يتم تحديد الخلايا اللمفاوية بناءً على التشتت الأمامي والجانبي. الخلايا التائية المساعدة التقليدية هي خلايا CD3+CD4+ ضمن نطاق الخلايا اللمفاوية. الخلايا التائية التنظيمية CD3+CD4+ إيجابية لتعبير FoxP3. الخلايا التائية السامة التقليدية هي خلايا CD3+CD8+ ضمن نطاق الخلايا اللمفاوية. يمكن أن تكون كل من خلايا CD3+CD4+ وCD3+CD8+ إيجابية لتعبير جزيء Granzyme B السام. تخزين تُزوَّد الأجسام المضادة وحيدة النسيلة للفئران CD3 (17A2) (مُقترن بـ PE)، وCD4 (RM4-5) (مُقترن بـ violetFluor™ 450)، وFoxP3 (3G3) (مُقترن بـ APC)، وCD8α (2.43) (مُقترن بـ PE-Cy7®) في محلول يحتوي على 10 ملي مولار من NaH₂PO₄، و150 ملي مولار من NaCl، و0.09% من NaN₃، و0.1% من الجيلاتين، عند درجة حموضة 7.2. أما الأجسام المضادة وحيدة النسيلة للأرانب Granzyme B (D2H2F) (مُقترن بـ Alexa Fluor® 488) فتُزوَّد في محلول PBS (عند درجة حموضة 7.2)، يحتوي على أقل من 0.1% من أزيد الصوديوم و2 ملغم/مل من BSA. يُحفظ في درجة حرارة 4 درجات مئوية. لا تُقسِّم الأجسام المضادة إلى أجزاء. يُحفظ بعيدًا عن الضوء. لا يُجمَّد. جميع مكونات هذه المجموعة مستقرة وفقًا للتاريخ المطبوع على ملصق العبوة الخارجية عند تخزينها في درجة الحرارة الموصى بها. يُرجى الرجوع إلى ملصقات المنتج أو بيانات المنتج أو صفحات الويب لمعرفة تواريخ "الأفضل قبل" المحددة لكل مكون على حدة. بروتوكول البروتوكولات المتاحة: قياس التدفق الخلوي (مثبت/منفذ) النوعية / الحساسية يكشف كل جسم مضاد في لوحة قياس التدفق الخلوي لعلامات الخلايا التائية الأساسية للفئران عن المستويات الداخلية لبروتينه المستهدف. تشمل هذه الأجسام المضادة: الجسم المضاد أحادي النسيلة للفئران CD3 (17A2) (مقترن بـ PE)، والجسم المضاد أحادي النسيلة للفئران CD4 (RM4-5) (مقترن بـ violetFluor 450)، والجسم المضاد أحادي النسيلة للفئران CD8 alpha (2.43) (مقترن بـ PE-Cy7). التفاعل مع الأنواع: الفأر المصدر / التنقية تم تنقية الأجسام المضادة وحيدة النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. ثم تم ربط الأجسام المضادة المنقاة في ظل ظروف مثالية، مع إزالة الصبغة غير المتفاعلة من المستحضر.