CST، 50561S، جسم مضاد Cas9 (C. jejuni)

جسم مضاد متعدد النسائل لدراسة بروتين Cas9 (بكتيريا العطيفة الصائمية). مُعتمد للاستخدام في تقنية التلطيخ الغربي. يتميز هذا الجسم المضاد عالي التخصص والمُعتمد بدقة داخلية، وهو جاهز للشحن (رقم CST 50561). معلومات استخدام المنتج اللطخة الغربية: 1:1000 تخزين يُزوَّد المنتج في محلول يحتوي على 10 ملي مولار من هيبس الصوديوم (الأس الهيدروجيني 7.5)، و150 ملي مولار من كلوريد الصوديوم، و100 ميكروغرام/مل من ألبومين المصل البقري، و50% من الجلسرين. يُحفظ في درجة حرارة -20 درجة مئوية. لا تُقسِّم الأجسام المضادة إلى أجزاء. بروتوكول البروتوكولات المتاحة: لطخة ويسترن النوعية / الحساسية Cas9 ( التفاعل مع الأنواع: من المتوقع أن يتفاعل مع جميع الأنواع المصدر / التنقية تُنتَج الأجسام المضادة متعددة النسائل عن طريق تحصين الحيوانات بببتيد اصطناعي يُطابق الأحماض الأمينية المحيطة بالحمض الأميني فالين 965 في بروتين Cas9. وتُنقّى الأجسام المضادة باستخدام كروماتوغرافيا تقارب البروتين A والببتيد. خلفية يُعدّ البروتين المرتبط بتقنية كريسبر 9 (Cas9) نوكليازًا للحمض النووي موجهًا بواسطة الحمض النووي الريبي، وهو جزء من نظام المناعة المضادة للفيروسات كريسبر الذي يوفر مناعة تكيفية ضد المادة الوراثية خارج الكروموسومات (1). تتضمن آلية عمل كريسبر المضادة للفيروسات ثلاث خطوات: (أ) اكتساب البكتيريا المضيفة للحمض النووي الغريب؛ (ب) تخليق ونضج الحمض النووي الريبي لكريسبر (crRNA)، يليه تكوين معقدات بروتين نوكلياز الحمض النووي الريبي-كاس؛ (ج) تثبيط الهدف من خلال تعرف المعقد على الحمض النووي الغريب وقطعه بواسطة نشاط نوكلياز كاس (2). يوفر نظام المناعة المضادة للفيروسات كريسبر/كاس من النوع الثاني أداة فعالة لتحرير الجينوم بدقة، وله إمكانات لتنظيم الجينات المحددة والتطبيقات العلاجية (3). يجب إدخال بروتين Cas9 وحمض نووي ريبي موجه يتكون من اندماج بين crRNA و crRNA المنشط (tracrRNA) في الخلية أو التعبير عنهما فيها. يُوجّه تسلسلٌ من 20 نيوكليوتيدًا في الطرف 5' من الحمض النووي الريبوزي الدليلي إنزيم Cas9 إلى موقع هدف محدد على الحمض النووي. ونتيجةً لذلك، يُمكن "برمجة" Cas9 لقطع مواقع مختلفة من الحمض النووي في الخلايا والكائنات الحية. وقد استُخدمت أدوات تحرير الجينوم CRISPR/Cas9 في العديد من الكائنات الحية، بما في ذلك خلايا الفئران والبشر (4، 5). تُشير الدراسات البحثية إلى إمكانية استخدام CRISPR لتوليد أليلات طافرة أو جينات مُبلِّغة في الخلايا الجذعية الجنينية للقوارض والرئيسيات (6-8). يُعد Cas9 ( ) نظيرًا لـ Cas9 أصغر حجمًا، ولكنه بنفس كفاءة نظيره الأكثر شيوعًا، Cas9 ( ) (9). أسماء بديلة Cas9 iso3؛ cas9، كامبيلوباكتر جيجوني سلالة جيجوني النمط المصلي O:2؛ Cj1523c؛ إنزيم نووي داخلي مرتبط بتقنية كريسبر Cas9 مواصفة التفاعل: الكل الحساسية: للخلايا المنقولة فقط الوزن الجزيئي (كيلودالتون): 60، 70 المصدر: أرنب