مجموعة الأجسام المضادة وحيدة النسيلة CST، 5561S، PTMScan® Phospho-Akt Substrate (RXXS*/T*) Motif 1

برنامج PTMScan للدراسة في مجال البحث. معلومات استخدام المنتج تُحلل الخلايا في محلول منظم يحتوي على اليوريا، وتُهضم البروتينات الخلوية بواسطة إنزيمات البروتياز، ثم تُنقى الببتيدات الناتجة باستخدام استخلاص الطور الصلب ذي الطور المعكوس. بعد ذلك، تُخضع الببتيدات لتنقية المناعة باستخدام جسم مضاد PTMScan® Motif مرتبط بخرزات بروتين A أجاروز. تُزال الببتيدات غير المرتبطة بالغسل، وتُستخلص الببتيدات الحاملة لتعديلات ما بعد الترجمة (PTM) باستخدام حمض مخفف. تُجرى عملية تنقية الطور المعكوس على رؤوس دقيقة لإزالة الأملاح وفصل الببتيدات عن الجسم المضاد قبل تركيز الببتيدات المُثرية لتحليلها بتقنية LC-MS/MS. توصي شركة CST باستخدام محلول PTMScan® IAP رقم 9993 المرفق مع المجموعة. تخزين تُزوَّد حبيبات الأجسام المضادة في محلول منظم IAP يحتوي على 50% جلسرين. يُحفظ في درجة حرارة -20 درجة مئوية. لا تُقسِّم الأجسام المضادة إلى أجزاء. بروتوكول البروتوكولات المتاحة: PTMScan خلفية يلعب Akt دورًا محوريًا في تنظيم الاستجابات الخلوية الهامة، بما في ذلك نمو الخلايا وبقائها، وتكوين الأوعية الدموية، وتنظيم النسخ (2-4). وهو ينتمي إلى فئة مهمة من الكينازات، تُعرف باسم كينازات Arg الموجهة أو كينازات عائلة AGC، والتي تشمل كيناز البروتين المعتمد على cAMP (PKA)، وكيناز البروتين المعتمد على cGMP (PKG)، وكيناز البروتين C، وAkt، وكيناز p70 S6، وRSK. تشترك هذه الكينازات في خصوصية الركيزة التي تتميز بوجود Arg في الموضع -3 بالنسبة إلى Ser أو Thr المُفسفر (5،6). يشترك كل من Akt وp70S6 kinase وRSK في خصوصية تجاه الأرجينين في الموضع -5 (تسلسل التعرف RXRXXS/T) (7). في دراسة حديثة للبروتينات الفوسفورية (8) شارك في تأليفها علماء من مجموعة اكتشاف مواقع CST، تم تحديد أكثر من 300 ركيزة نهائية لكينازات عائلة AGC التي تتعرف على النمط RXRXXS/T باستخدام تقنية PhosphoScan وأجسام مضادة لركائز Phospho-Akt. تُعد أجسام CST™ المضادة هذه أدوات فعالة لدراسة تنظيم الفسفرة بواسطة Akt وكينازات أخرى موجهة للأرجينين، بالإضافة إلى اكتشاف أدوية الكينازات عالية الإنتاجية. في هذا التحليل، PTMScan (RXXS أسماء بديلة akt1؛ akt2؛ akt3؛ نمط