CST، 6211S، SignalSilence® Akt siRNA I

siRNA لدراسة Akt2/Akt3/Akt1 في مجال البحث. معلومات استخدام المنتج توصي شركة CST بإجراء عملية نقل الجينات باستخدام 100 نانومتر من SignalSilence® Akt siRNA I قبل 48 إلى 72 ساعة من تحلل الخلايا. لإجراء عملية نقل الجينات، اتبع البروتوكول المقدم من الشركة المصنعة لكاشف نقل الجينات. لا تتردد في الاتصال بشركة CST لأي استفسارات حول الاستخدام. تحتوي كل قارورة على ما يعادل 100 عملية نقل جينات، وهو ما يتوافق مع تركيز نهائي لـ siRNA يبلغ 100 نانومتر لكل عملية نقل جينات في صفيحة ذات 24 بئراً بحجم إجمالي 300 ميكرولتر لكل بئر. تخزين يُزوَّد منتج SignalSilence® siRNA في ماء خالٍ من إنزيم RNase. قسّم المنتج إلى حصص صغيرة وخزّنها في درجة حرارة -20 درجة مئوية. خلفية يلعب بروتين Akt، المعروف أيضًا باسم PKB أو Rac، دورًا حاسمًا في تنظيم بقاء الخلية وموتها المبرمج (1-3). يُفعَّل هذا البروتين كيناز بواسطة الأنسولين وعوامل النمو والبقاء المختلفة ليعمل ضمن مسار حساس للوورتمنين يتضمن كيناز PI3 (2، 3). يُفعَّل Akt عن طريق ارتباط الفوسفوليبيد وفسفرة حلقة التنشيط عند Thr308 بواسطة PDK1 (4)، وعن طريق الفسفرة داخل الطرف الكربوكسيلي عند Ser473. وقد تم تحديد PDK2، الذي كان عصيًا على التحديد سابقًا، والمسؤول عن فسفرة Akt عند Ser473، على أنه هدف الراباميسين في الثدييات (mTOR) ضمن مركب غير حساس للراباميسين مع ريكتور وSin1 (5، 6). يعزز Akt بقاء الخلية عن طريق تثبيط الموت المبرمج من خلال فسفرة وتعطيل العديد من الأهداف، بما في ذلك Bad (7)، وعوامل النسخ من نوع forkhead (8)، وc-Raf (9)، وcaspase-9. يُعدّ فوسفاتاز PTEN مُنظِّمًا سلبيًا رئيسيًا لمسار إشارات PI3K/Akt (10). LY294002 هو مُثبِّط نوعي لكيناز PI3 (11). من وظائف Akt الأساسية الأخرى تنظيم تخليق الجليكوجين من خلال فسفرة وتثبيط GSK-3α وβ (12، 13). قد يلعب Akt أيضًا دورًا في تحفيز الأنسولين لنقل الجلوكوز (12). بالإضافة إلى دوره في البقاء وتخليق الجليكوجين، يُشارك Akt في تنظيم دورة الخلية عن طريق منع فسفرة وتحلل السيكلين D1 بوساطة GSK-3β (14)، وعن طريق التنظيم السلبي لمثبطات كينازات السيكلين المعتمدة p27 Kip1 (15) وp21 Waf1/Cip1 (16). كما يلعب Akt دورًا حاسمًا في نمو الخلية من خلال فسفرة mTOR مباشرةً في مُركَّب حساس للراباميسين يحتوي على رابتور (17). والأهم من ذلك، أن بروتين Akt يقوم بفسفرة وتعطيل بروتين تيوبرين (TSC2)، وهو مثبط لبروتين mTOR ضمن مركب mTOR-raptor (18، 19). وقد استُخدم الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA) لكبح بروتين Akt بشكلٍ خاص في خلايا CHO وخلايا 3T3-L1 الدهنية (20). أسماء بديلة أكت؛ akt1; akt2; akt3; بي كي بي؛ سيرنا مواصفة التفاعل: H