CST، 62248S، PTMScan® Control Peptides Phospho-Akt (RXXS*/T*)

مستخلصات الخلايا للدراسة في مجال البحث. معلومات استخدام المنتج يُستخدم مع بروتوكول مجموعة PTMScan® من شركة Cell Signaling Technology بدءًا من خطوة تنقية المناعة (IAP). نظرًا لأن الكمية المثلى من ببتيدات التحكم PTMScan® Phospho-Akt (RXXS*/T*) لتجارب كل مستخدم تعتمد على عوامل خاصة، مثل حساسية مطياف الكتلة، يمكن للمستخدمين تخفيف هذه الببتيدات حسب الحاجة. 1. قسّم ببتيدات التحكم PTMScan® Phospho-Akt (RXXS*/T*) إلى حصص صغيرة للتخزين كوحدات للاستخدام الفردي عند درجة حرارة -20 درجة مئوية، أو استخدمها مباشرةً. 2. أعد تعليق ببتيدات العينة في المحلول المنظم والحجم المناسبين، على سبيل المثال، 1.4 مل من محلول PTMScan® IAP المنظم (1X). 3. صفِّ ببتيدات العينة بالطرد المركزي. 4. انقل ببتيدات العينة المصفاة إلى أنابيب تحتوي على خرز IAP. ٥. أضف ١٠ ميكرولتر من محلول PTMScan® Control Peptides Phospho-Akt (RXXS*/T*) إلى خرز IAP والببتيدات المأخوذة منها العينة، واخلط جيدًا. ٦. تابع إجراءات PTMScan® أو PTMScan® HS بعد ساعتين من الحضانة. ٧. اكشف عن PTMScan® Control Peptides Phospho-Akt (RXXS*/T*) في ملف بيانات LCMS. تخزين هذا المنتج مستقر لمدة 24 شهرًا عند تخزينه في درجة حرارة -20 درجة مئوية. قسّم المنتج إلى حصص صغيرة لتجنب دورات التجميد والذوبان المتكررة. خلفية يلعب Akt دورًا محوريًا في تنظيم الاستجابات الخلوية الهامة، بما في ذلك نمو الخلايا وبقائها، وتكوين الأوعية الدموية، وتنظيم النسخ (1-3). وهو ينتمي إلى فئة مهمة من الكينازات، تُعرف باسم كينازات Arg الموجهة أو كينازات عائلة AGC، والتي تشمل كيناز البروتين المعتمد على cAMP (PKA)، وكيناز البروتين المعتمد على cGMP (PKG)، وكيناز البروتين C، وAkt، وكيناز p70 S6، وRSK. تشترك هذه الكينازات في خصوصية الركيزة التي تتميز بوجود Arg في الموضع -3 بالنسبة إلى Ser أو Thr المُفسفر (4، 5). كما يشترك كل من Akt وكيناز p70 S6 وRSK في خصوصية Arg في الموضع -5 (تسلسل التعرف RXRXXS/T) (6). في دراسة حديثة للبروتينات الفوسفورية (7) شارك في تأليفها علماء من مجموعة اكتشاف المواقع في شركة Cell Signaling Technology، تم تحديد أكثر من 300 ركيزة نهائية لكينازات عائلة AGC التي تتعرف على النمط RXRXXS/T باستخدام تقنية PTMScan وأجسام مضادة لركائز Phospho-Akt. تُعد هذه الأجسام المضادة من شركة Cell Signaling Technology أدوات فعالة لدراسة تنظيم الفسفرة بواسطة Akt وكينازات أخرى موجهة للأرجينين، بالإضافة إلى اكتشاف أدوية الكينازات عالية الإنتاجية. في هذا التحليل، تم استخدام PTMScan (RXXS