BD، 553656، BD Pharmingen™ مضاد الهامستر النقي CD154

الاسم البديل: ربيطة CD40؛ CD40L؛ gp39؛ Ly-62؛ Tnfsf5؛ T-BAM؛ HIGM1؛ IMD3
التفاعل: الفأر (اختبار مراقبة الجودة)
النمط المتماثل: الهامستر الأرمني IgG3، κ
المستضد: مستنسخ الخلايا التائية المساعدة من النوع الأول D1.6 من الفئران المنشطة
التطبيق: قياس التدفق الخلوي (يتم اختباره بشكل روتيني)، الحجب، الكيمياء المناعية النسيجية - المجمدة (تم الإبلاغ عنها)
التركيز: 0.5 ملغم/مل
RRID: AB_394976
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على ≤0.09% من أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي بواسطة كروماتوغرافيا التقارب. يُحفظ غير مخفف عند درجة حرارة 4 درجات مئوية.
إجراءات الفحص الموصى بها: للكشف عن CD154 في الفئران على الخلايا التائية المحيطية المنشطة، يُوصى بشدة بتنقية الخلايا التائية قبل تنشيطها. يُعبر عن CD154 في الفئران بشكل عابر على أسطح الخلايا التائية الطبيعية المنشطة وبعض سلالات الخلايا التائية، حيث يُكتشف أعلى مستوى له بعد 6-8 ساعات من التنشيط. يكفي التنشيط باستخدام الأجسام المضادة وحيدة النسيلة المضادة لـ CD3e المثبتة (مثل 145-2C11، رقم المنتج 557306/553058، أو 500A2، رقم المنتج 553238) لتحفيز التعبير عن CD154 على خلايا CD4+. وقد أُفيد أن خلايا CD8+ تُعبر عن CD154 فقط استجابةً للمعالجة بـ PMA/Ionomycin. لذلك، للكشف عن CD154، من الضروري استخدام محفزات التنشيط المناسبة وتلوين الخلايا في الوقت الأمثل للتعبير عن CD154. نوصي باستخدام مزيج IgG المضاد للهامستر والمُبَيتَن (رقم المنتج 554010) متبوعًا بكاشف "ساطع" في الخطوة الثانية، مثل Streptavidin-PE (رقم المنتج 554061)، للكشف الأمثل عن CD154.
ملاحظات المنتج: نظرًا لاختلاف التطبيقات، ينبغي على كل باحث معايرة الكاشف للحصول على أفضل النتائج. يُرجى الرجوع إلى www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. على الرغم من عدم تحديد أنماط الغلوبولين المناعي للهامستر بشكل دقيق، فقد قامت شركة BD Biosciences Pharmingen بتصنيف الأجسام المضادة وحيدة النسيلة من نوع IgG للهامستر الأرمني والسوري وفقًا لتفاعلها مع مجموعة من الأجسام المضادة وحيدة النسيلة للفئران المضادة للهامستر من نوع IgG. يمكن الاطلاع على جدول مجموعات IgG للهامستر، بعنوان "تفاعل الأجسام المضادة وحيدة النسيلة للفئران المضادة للهامستر من نوع IgG"، على الرابط التالي: http://www.bdbiosciences.com/documents/hamster_chart_11x17.pdf. يُعدّ أزيد الصوديوم مثبطًا عكسيًا لعملية الأيض التأكسدي؛ لذا، يجب عدم استخدام مستحضرات الأجسام المضادة التي تحتوي على هذه المادة الحافظة في مزارع الخلايا أو حقنها في الحيوانات. يمكن إزالة أزيد الصوديوم بغسل الخلايا المصبوغة أو الأجسام المضادة المرتبطة بالصفيحة، أو بغسل الأجسام المضادة الذائبة في محلول منظم خالٍ من أزيد الصوديوم. ولأن السموم الداخلية قد تؤثر أيضًا على نتائج الدراسات الوظيفية، نوصي باستخدام الأجسام المضادة من نوع NA/LE (خالية من الأزيد/منخفضة السموم الداخلية)، إن توفرت، للاستخدام في المختبر وفي الجسم الحي.