BD، 555063، خلايا التحكم الإيجابي للسيتوكين البشري HiCK-3 من BD Pharmingen™

التطبيق: التلوين داخل الخلايا (قياس التدفق الخلوي) (يتم اختباره بشكل روتيني)
التركيز: 5 × 10^6 خلية/مل
RRID: AB_2869017
محلول التخزين: مجمد في مصل بقري جنيني و10% من ثنائي ميثيل سلفوكسيد.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: يُحفظ المنتج في درجة حرارة -80 درجة مئوية قبل الاستخدام أو للتخزين طويل الأمد للمحاليل المركزة. يُذاب المنتج بسرعة ويُرجّ جيدًا قبل الاستخدام. تجنب تكرار تجميد المنتج وإذابته. لا يحتوي هذا المستحضر على مواد حافظة، لذا يجب التعامل معه في ظروف معقمة. بعد إذابة المنتج وإعادة تعليق الخلايا جيدًا باستخدام ماصة، يمكن إعادة تجميد حصص "الاستخدام الفردي" في درجة حرارة -80 درجة مئوية وتخزينها في أنابيب دقيقة من البولي بروبيلين لاستخدامها لاحقًا.
إجراءات التحليل الموصى بها: قياس التدفق الخلوي: خلايا HiCK-3 كعينة تحكم إيجابية للسيتوكينات. تحتوي معلقات الخلايا على إنترلوكين-1α، وإنترلوكين-1β، وإنترلوكين-6، وإنترلوكين-12 p40/70، وإنترلوكين-12 p70، وعامل نخر الورم (TNF) داخل الخلايا، والتي تراكمت ويمكن الكشف عنها بواسطة تحليل قياس التدفق الخلوي داخل الخلايا. يمكن استخدام هذه الخلايا كعينة تحكم إيجابية للتحقق من فعالية الأجسام المضادة للسيتوكينات و/أو إجراء التلوين بقياس التدفق الخلوي نفسه (مثل النفاذية). للتلوين بقياس التدفق الخلوي، يجب أولاً إذابة تحضير الخلايا المجمدة بسرعة وبحرص. بعد ذلك، يمكن نقل أجزاء من معلق الخلايا إلى حُفر دقيقة أو أنابيب. تُزوَّد خلايا HiCK-3 مثبتة وغير منفذة في ثنائي ميثيل سلفوكسيد (DMSO)، لذا يجب غسلها مرتين على الأقل بمحلول التلوين لإزالة DMSO. بعد ذلك، يجب نفاذ الخلايا عن طريق حضنها لمدة 10-15 دقيقة في محلول BD Perm/Wash™ (رقم المنتج 554723)، ثم طردها بالطرد المركزي حتى تصبح راسباً، ثم غسلها مرة واحدة على الأقل في محلول BD Perm/Wash™. بعد ذلك، يمكن تلوين الخلايا باستخدام أحد الصبغات التالية: PE Mouse Anti-Human IL-1α (رقم المنتج 554561)، أو PE Mouse Anti-Human IL-1β (رقم المنتج 340516)، أو PE Rat Anti-Human IL-6 (رقم المنتج 554697)، أو PE Mouse Anti-Human IL-12 p40/p70 (رقم المنتج 554575)، أو PE Rat Anti-Human IL-12 p70 (رقم المنتج 559325)، أو PE Mouse Anti-Human TNF (رقم المنتج 554513). ملاحظة: يمكن إظهار تلوين خلايا HiCK-3 بالأجسام المضادة النوعية للسيتوكينات عن طريق تحضين مسبق للأجسام المضادة النوعية للسيتوكينات المقترنة مع السيتوكين المؤتلف، أو عن طريق معالجة خلايا HiCK-3 مسبقًا بأجسام مضادة مانعة غير موسومة (منقاة). ينبغي على الباحثين ملاحظة أن التباين في تنشيط الخلايا قد يُسهم في عدم كفاية الحجب.
إشعارات المنتج: يحتوي هذا المنتج على دم بشري، أو مصل، أو خلايا، أو مواد مشتقة منها، وهي مواد قد تكون خطرة. لذا، يُرجى اتباع احتياطات السلامة العامة عند التعامل معه. تعامل مع المنتج كما لو كان قادرًا على نقل الأمراض. تم اختبار المواد المستخدمة في هذا المنتج باستخدام طرق معتمدة من إدارة الغذاء والدواء الأمريكية، وكانت نتائجها سلبية لفيروس نقص المناعة البشرية (HIV-1/HIV-2)، ومستضد سطح التهاب الكبد ب (HBSAG)، والأجسام المضادة لفيروس التهاب الكبد ج (HCV). مع ذلك، لا توجد طريقة اختبار معروفة تضمن بشكل كامل عدم نقل العينات البشرية للأمراض المعدية. عند التعامل مع المنتج أو التخلص منه، يُرجى اتباع الاحتياطات الموضحة في توصيات مراكز السيطرة على الأمراض والوقاية منها (CDC) وإدارة الغذاء والدواء الأمريكية (FDA) وتوصيات إدارة السلامة والصحة المهنية (OSHA) بشأن مسببات الأمراض المنقولة بالدم. قيود استخدام المنتج: هذا المنتج مخصص للاستخدام البحثي فقط. تُصنف المنتجات البحثية على أنها للاستخدام البحثي فقط (RUO) ولا تُستخدم في الإجراءات التشخيصية أو العلاجية. يوافق العميل على عدم استخدام المنتج لأغراض تسمح بتحديد هوية المتبرعين. يوافق العميل على إخطار قسم الخدمات الفنية في شركة BDB خلال خمسة (5) أيام عمل من علمه بأي عملية تحديد هوية أو إعادة تحديد هوية أي فرد فيما يتعلق بهذا المنتج. تجنب ملامسة الجلد والعينين. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية، وتقع في الولايات المتحدة. يرجى مراجعة الموقع الإلكتروني www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية.