BD، 555110، BD Pharmingen™ بروتين MCP-1 المُعاد تركيبه للفئران

التحضير والتخزين: يُحفظ المنتج في درجة حرارة -80 درجة مئوية قبل الاستخدام أو للتخزين طويل الأمد للمحاليل المركزة. يُذاب المنتج بسرعة ويُرج جيدًا قبل الاستخدام. تجنب تكرار تجميد المنتج وإذابته. لا يحتوي هذا المستحضر على مواد حافظة، لذا يجب التعامل معه في ظروف معقمة.
إجراءات التحليل الموصى بها: عند إذابة التجميد الأولي، يجب تقسيم بروتين MCP-1 المُعاد تركيبه من الفئران (MN 555110) إلى حصص في أنابيب دقيقة من البولي بروبيلين وتجميده عند درجة حرارة -80 درجة مئوية لاستخدامه لاحقًا. بدلاً من ذلك، يمكن تخفيف المنتج في محلول منظم محايد معقم يحتوي على ما لا يقل عن 0.5 - 10 ملغم/مل من بروتين حامل، مثل ألبومين بشري أو بقري، وتقسيمه إلى حصص وتخزينه عند درجة حرارة -80 درجة مئوية. للاستخدام في التحليلات البيولوجية المخبرية، يُوصى بتركيزات بروتين حامل تتراوح بين 0.5 و1 ملغم/مل. للاستخدام كمعيار في اختبار ELISA، يُوصى بتركيزات بروتين حامل تتراوح بين 5 و10 ملغم/مل. قد يؤدي عدم إضافة البروتين الحامل أو عدم التخزين في درجات الحرارة المحددة إلى فقدان الفعالية. يجب فحص البروتينات الحامل مسبقًا للتأكد من عدم وجود تأثيرات محتملة في النظام التجريبي لكل باحث. قد تؤثر البروتينات الحاملة سلبًا على نتائج التجارب نظرًا لسميتها، أو ارتفاع مستويات السموم الداخلية فيها، أو احتمالية تثبيطها. معيار ELISA: يُمكن استخدام بروتين MCP-1 المُعاد تركيبه من الفئران (MN 555110) كمعيار كمي لقياس مستويات بروتين MCP-1 في الفئران باستخدام مقايسة ELISA الساندويتشية، وذلك باستخدام الجسم المضاد C4 المُنقّى (رقم المنتج 555072) كجسم مضاد مُلتقط، والجسم المضاد B4 المُؤشّر بالبيوتين (رقم المنتج 555074) كجسم مضاد كاشف. وللحصول على منحنيات معيارية خطية، يُنصح الباحثون باستخدام تخفيفات مُضاعفة من بروتين MCP-1 المُعاد تركيبه من الفئران، تتراوح بين 2000 و5 بيكوغرام/مل، لتُضاف إلى كل صفيحة ELISA. لقياس بروتين MCP-1 في مصل أو بلازما الفئران، يُنصح بشدة باستخدام مجموعة BD OptEIA™ Rat MCP-1 (رقم المنتج 555130). التحليل البيولوجي: يُنصح الباحثون بأن تطبيق التحليل البيولوجي لا يُختبر بشكل روتيني لهذه المادة، ويُنصح بشدة بمعايرة هذه المادة وإدراج ضوابط مناسبة في التجارب ذات الصلة. وقد تم الإبلاغ سابقًا عن نطاق نشاط يشمل ED50 = 60 - 600 نانوغرام/مل باستخدام خلايا THP-1 كخلايا مؤشرة باستخدام اختبار تدفق الكالسيوم. ضابط حجب الربيطة للتلوين المناعي الفلوري للسيتوكينات: يمكن استخدام MCP-1 المُعاد تركيبه من الفئران كضابط حجب لإثبات خصوصية تلوين MCP-1 بواسطة الشكل المُقترن بـ PE (رقم المنتج 554443) من الجسم المضاد 2H5 المضاد لـ MCP-1 من الفئران. يُنصح الباحثون بأن تطبيق الحجب هذا لا يُختبر بشكل روتيني لهذه المادة. وقد وُصف سابقًا استخدام ضوابط التلوين للتلوين المناعي الفلوري وتحليل التدفق الخلوي للخلايا المنتجة للسيتوكينات (بروسين وآخرون).
ملاحظات المنتج: نظرًا لاختلاف التطبيقات، ينبغي على كل باحث معايرة الكاشف للحصول على أفضل النتائج. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية تقع في الولايات المتحدة. يُرجى مراجعة الموقع الإلكتروني www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية.