BD، 557643، BD Pharmingen™ PE-Cy™7 مضاد الفأر للإنترفيرون غاما البشري

الاسم البديل: IFNG؛ انترفيرون جاما. انترفيرون γ؛ إنترفيرون من النوع الثاني؛ ماف
التفاعل: الإنسان (اختبار مراقبة الجودة)، قرد الريسوس، قرد المكاك، قرد البابون (تم اختباره أثناء التطوير)
النمط المصلي: IgG1 الفأري، κ
مناعة: بروتين IFN-γ البشري المؤتلف
التطبيق: التلوين داخل الخلايا (قياس التدفق الخلوي) (يتم اختباره بشكل روتيني)
حجم العينة لكل اختبار: 5 ميكرولتر
RRID: AB_396760
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على BSA و ≤0.09% أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد. تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بـ PE-Cy7 في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة الجسم المضاد غير المرتبط وPE-Cy7 الحر.
إجراءات الفحص الموصى بها: التلوين المناعي الفلوري وتحليل التدفق الخلوي: يُعدّ الجسم المضاد B27 المقترن بـ PE-Cy7 (رقم المنتج 557643) مفيدًا للتلوين المناعي الفلوري متعدد الألوان وتحليل التدفق الخلوي لتحديد وحصر الخلايا المنتجة للإنترفيرون غاما (IFN-γ) ضمن مجموعات الخلايا المختلطة. ومن الضوابط المفيدة لإثبات خصوصية التلوين ما يلي: حجب الخلايا المثبتة بالفورمالديهايد والمنفذة بالصابونين مسبقًا باستخدام الجسم المضاد B27 غير الموسوم (رقم المنتج 554699) قبل التلوين. وقد وُصفت تقنية تلوين السيتوكينات داخل الخلايا وضوابط الحجب بالتفصيل من قِبل سي. بروسين ودي. ميتكالف. للاطلاع على المنهجية المحددة، يُرجى زيارة قسم البروتوكولات ضمن "التدفق داخل الخلايا" على موقعنا الإلكتروني: http://www.bdbiosciences.com/us/s/resources. التحييد: يُعدّ الجسم المضاد NA/LE B27 (رقم المنتج 554698) مفيدًا لتحييد النشاط الحيوي للإنترفيرون غاما البشري. الترسيب المناعي/التلطيخ الغربي: أُفيد بأن الجسم المضاد B27 مفيد في دراسات الترسيب المناعي. كما أُفيد بأنه لا يرتبط بالإنترفيرون غاما المُشوّه. يُرجى العلم بأن هذه التطبيقات لا تُختبر بشكل روتيني في شركة BD Biosciences Pharmingen.
ملاحظات المنتج: يجب استخدام عنصر تحكم متماثل النمط بنفس تركيز الجسم المضاد المطلوب. تم تخفيف هذا الكاشف مسبقًا للاستخدام بالحجم الموصى به لكل اختبار. نستخدم عادةً 1 × 10^6 خلية في عينة تجريبية بحجم 100 ميكرولتر (اختبار). مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية تقع في الولايات المتحدة. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد في الماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. APC-Cy7 هو فلوروكروم مزدوج يتكون من ألوفيوكوسيانين (APC)، الذي يتم إثارته بواسطة خطوط الليزر بين 595 و647 نانومتر ويعمل كمانح للطاقة، مقترنًا بصبغة السيانين Cy7™، التي تعمل كمستقبل للطاقة وتتألق عند 780 نانومتر. قامت شركة BD Biosciences Pharmingen بتحسين نقل طاقة الفلوركروم في APC-Cy7 إلى أقصى حد، مما أدى إلى زيادة شدة انبعاث الفلورة، وتقليل الانبعاث المتبقي من APC، وتقليل التعويض الإلكتروني المطلوب في أنظمة قياس التدفق الخلوي متعددة الليزر. ملاحظة: على الرغم من بذل قصارى الجهد لتقليل التباين بين الدفعات في الانبعاث المتبقي من APC، يُوصى بشدة باختبار كل دفعة للتحقق من وجود اختلافات في مقدار التعويض المطلوب، وإجراء فحوصات تحكم فردية للتعويض لكل مُقترن APC-Cy7. يتم جمع انبعاث الفلوركروم المزدوج APC-Cy7 في كاشف لأطوال موجية للفلورة تبلغ 750 نانومتر فأكثر. يُرجى مراعاة الاحتياطات التالية: يمكن أن يؤدي امتصاص الضوء المرئي إلى تغيير كبير في نقل الطاقة الذي يحدث في أي مُقترن فلوري مزدوج. لذا، نوصي باتخاذ احتياطات خاصة (مثل تغليف القوارير أو الأنابيب أو الحوامل بورق الألومنيوم) لمنع تعريض الكواشف المقترنة، بما في ذلك الخلايا المصبوغة بهذه الكواشف، لإضاءة الغرفة. للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يُرجى زيارة صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. تحذير: تُظهر بعض مُقترنات APC-Cy7 وPE-Cy7 تغيرات في طيف انبعاثها عند التعرض المطول للفورمالديهايد. إذا تعذر تحليل العينات المُثبتة خلال أربع ساعات، نوصي باستخدام مُثبت BD™ Stabilizing Fixative (رقم المنتج 338036). Cy هي علامة تجارية لشركة GE Healthcare. قد لا يكون التفاعل المتبادل بين الأنواع الذي تم اكتشافه أثناء تطوير المنتج قد تم تأكيده على جميع الأشكال و/أو التطبيقات. يُرجى مراجعة www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية.