BD، 558332، مزيج الأجسام المضادة لمجموعة فرعية من الخلايا اللمفاوية البائية للفئران من BD Pharmingen™، مع عنصر تحكم متماثل النمط؛ PE-Cy™7 CD45R/B220، وPE CD23 (FcεRII)، وAPC sIgM

التفاعل: الفأر (اختبار مراقبة الجودة)
التطبيق: قياس التدفق الخلوي (يتم اختباره بشكل روتيني)
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
RRID: AB_397076
الوصف: مزيج الأجسام المضادة لمجموعات الخلايا اللمفاوية البائية في الفئران هو كاشف ثلاثي الألوان مصمم لتحديد المجموعات الفرعية الرئيسية من الخلايا اللمفاوية البائية عن طريق التلوين المناعي الفلوري المباشر مع تحليل التدفق الخلوي. يتعرف الجسم المضاد RA3-6B2 على جزء من النطاق خارج الخلوي لـ CD45، والذي يُعبر عنه بشكل أساسي، بمستويات منظمة نمائيًا، على الخلايا اللمفاوية البائية في جميع مراحلها، بدءًا من الخلايا البائية الأولية وصولًا إلى الخلايا البائية الناضجة والمنشطة والمفرزة للأجسام المضادة وخلايا الذاكرة البائية. على الرغم من أن CD45R/B220 يُعتبر مستضدًا مميزًا لسلالة الخلايا البائية، فقد أُبلغ عن تعبير الخلايا القاتلة الطبيعية النشطة، وبعض الخلايا التائية المنشطة أو الميتة، وبعض الخلايا السلفية المكونة للدم غير التابعة لسلالة الخلايا البائية عن CD45R/B220. يتعرف الجسم المضاد B3B4 على CD23، وهو مستقبل IgE Fc ذو الألفة المنخفضة، والذي يُعبر عنه على الخلايا البائية التقليدية الناضجة في حالة الراحة، ولكنه لا يُعبر عنه على الخلايا البائية B-1 (الخلايا اللمفاوية البائية CD5+)، أو الخلايا اللمفاوية التائية، أو الخلايا البدينة. أما الجسم المضاد II/41 فيتعرف على IgM السطحي (sIgM)، وتحديدًا سلسلة الغلوبولين المناعي، وهو أحد مكونات معقد مستقبل المستضد على الخلايا اللمفاوية البائية غير الناضجة والناضجة، بما في ذلك خلايا البلازما. تمت معايرة الأجسام المضادة الثلاثة وتخفيفها مسبقًا، ثم خلطها معًا، وتركيبها لتحقيق أفضل أداء في التلوين. يحتوي عنصر التحكم في النمط المتساوي لمجموعة فرعية من الخلايا اللمفاوية البائية في الفئران على تراكيز مكافئة من الغلوبولين المناعي للتحكم السلبي المتطابق مع الفلوركروم والنمط المتساوي. يسمح استخدام ثلاثة فلوركرومات مختلفة لوسم الأجسام المضادة الثلاثة المختلفة بالتعرف على كل مستضد من المستضدات الثلاثة على كل خلية في العينة. تميز مستويات التعبير عن المستضدات الثلاثة المجموعات الفرعية الرئيسية من الخلايا اللمفاوية البائية النامية والمحيطية. يمكن دمج الكواشف الإضافية الموسومة بالفلوركروم مع كوكتيل الأجسام المضادة لمجموعة الخلايا الليمفاوية البائية للفأر، ومجموعة التحكم في النمط المتساوي لمجموعة الخلايا الليمفاوية البائية للفأر، وذلك لزيادة توصيف المجموعات الفرعية للخلايا البائية.
التحضير والتخزين: تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بـ PE-Cy7 في ظل الظروف المثلى، وتم التخلص من الجسم المضاد غير المرتبط وPE-Cy7 الحر. تم ربط الجسم المضاد بـ R-PE في ظل الظروف المثلى، وتم التخلص من الجسم المضاد غير المرتبط وPE الحر. تم ربط الجسم المضاد بـ APC في ظل الظروف المثلى، وتم التخلص من الجسم المضاد غير المرتبط وAPC الحر. يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد.
ملاحظات المنتج: تم تخفيف هذا الكاشف مسبقًا للاستخدام بالحجم الموصى به لكل اختبار. نستخدم عادةً 1 × 10^6 خلية في عينة تجريبية بحجم 100 ميكرولتر (اختبار). نظرًا لاختلاف التطبيقات، ينبغي على كل باحث معايرة الكاشف للحصول على أفضل النتائج. يُرجى الرجوع إلى www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية. للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يُرجى الرجوع إلى صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. يُعد PE-Cy7 فلوروكرومًا مزدوجًا يتكون من R-phycoerythrin (PE)، الذي يُثار بضوء طوله الموجي 488 نانومتر ويعمل كمانح للطاقة، مقترنًا بصبغة السيانين Cy7، التي تعمل كمستقبل للطاقة وتُصدر أقصى تألق عند 780 نانومتر. يُجمع انبعاث الفلوركروم المزدوج PE-Cy7 في كاشف لأطوال موجية فلورية تبلغ 750 نانومتر فأكثر. على الرغم من بذل قصارى الجهد لتقليل التباين بين الدفعات في كفاءة نقل طاقة الفلوركروم، فقد تُلاحظ اختلافات في الانبعاث المتبقي من PE. لذلك، نوصي بإجراء فحوصات تعويض فردية لكل مُقترن PE-Cy7. تم تحسين PE-Cy7 للاستخدام مع ليزر أيون الأرجون الأحادي الذي يُصدر ضوءًا بطول موجي 488 نانومتر، ولا يوجد تداخل يُذكر بين أطياف انبعاث PE-Cy7 وFITC. عند استخدام أجهزة قياس التدفق الخلوي ثنائية الليزر، التي قد تُثير كلاً من PE وCy7 مباشرةً، نوصي باستخدام تعويض الحزمة المتقاطعة أثناء جمع البيانات أو التعويض البرمجي أثناء تحليل البيانات. تحذير: تُظهر بعض مُقترنات APC-Cy7 وPE-Cy7 تغيرات في طيف انبعاثها مع التعرض المطول للفورمالديهايد. إذا تعذر عليك تحليل العينات المثبتة خلال أربع ساعات، فننصحك باستخدام مُثبِّت BD™ (رقم المنتج 338036). يُرجى مراعاة الاحتياطات التالية: قد يؤثر امتصاص الضوء المرئي بشكل كبير على نقل الطاقة في أي مُقترن فلوري مزدوج؛ لذا، نوصي باتخاذ احتياطات خاصة (مثل تغليف القوارير أو الأنابيب أو الحوامل بورق الألومنيوم) لمنع تعريض الكواشف المُقترنة، بما في ذلك الخلايا المصبوغة بها، لإضاءة الغرفة. يمكن استخدام هذا الكاشف المُقترن بـ APC في أي جهاز قياس التدفق الخلوي مُجهز بليزر صبغي أو ليزر هيليوم-نيون أو ليزر ثنائي أحمر. Cy هي علامة تجارية لشركة Amersham Biosciences Limited. يُباع هذا المنتج المُقترن بموجب ترخيص لبراءات الاختراع التالية: براءات الاختراع الأمريكية أرقام 5,486,616؛ 5,569,587؛ 5,569,766؛ 5,627,027. يخضع هذا المنتج لحقوق الملكية الفكرية لشركة Amersham Biosciences Corp. وجامعة كارنيجي ميلون، ويتم تصنيعه وبيعه بموجب ترخيص من شركة Amersham Biosciences Corp. هذا المنتج مرخص للبيع لأغراض البحث العلمي فقط، ولا يُسمح باستخدامه لأي غرض آخر. إذا كنت بحاجة إلى ترخيص تجاري لاستخدام هذا المنتج ولم يكن لديك ترخيص، فيُرجى إعادة هذه المادة غير مفتوحة إلى BD Biosciences، 10975 Torreyana Rd، سان دييغو، كاليفورنيا 92121، وسيتم رد أي مبلغ مدفوع مقابلها. تنبيه: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. لذا، يُرجى تخفيف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية، وتقع في الولايات المتحدة.
الوصف: الكمية/الحجم: رقم القطعة: معرف EntrezGene
غير متوفر : 100.0 : غير متوفر : غير متوفر