BD، 560116، BD Phosflow™ PE-Cy™7 مضاد ERK1/2 للفأر (pT202/pY204)

الاسم البديل: p44/42 MAPK؛ كيناز منظم الإشارة خارج الخلية 1/2 (pT202/Y204)
التفاعل: بشري (اختبار مراقبة الجودة)، بشري، فأر، جرذ (تم تأكيد التفاعل أثناء التطوير)
النمط المصلي: IgG1 الفأري
المستضد: ببتيد ERK1 الفأري المفسفر (T202/Y204)
التطبيق: التلوين داخل الخلايا (قياس التدفق الخلوي) (يتم اختباره بشكل روتيني)
حجم العينة لكل اختبار: 20 ميكرولتر
RRID: AB_1645296
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على BSA و ≤0.09% أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد. تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بـ PE-Cy7 في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة الجسم المضاد غير المرتبط وPE-Cy7 الحر.
إجراءات الفحص الموصى بها: هذا الجسم المضاد المُقترن مناسب للتلوين داخل الخلايا للدم الكامل البشري (باستخدام محلول BD Phosflow™ Lyse/Fix) وخلايا الدم أحادية النواة الطرفية (باستخدام محلول BD Cytofix™ Fixation Buffer أو محلول BD Phosflow™ Fix Buffer I). يمكن استخدام أي من محاليل BD Phosflow™ الثلاثة للنفاذية. تم توصيف هذا الجسم المضاد أحادي النسيلة بواسطة قياس التدفق الخلوي (Flow) وتحليل لطخة ويسترن (WB) باستخدام أنظمة النموذج التالية: الطريقة النوع الخلايا المعالجة محلول التثبيت محلول النفاذية النتيجة قياس التدفق الخلوي خلايا الدم أحادية النواة الطرفية البشرية PMA محلول التثبيت I أو II أو III تلوين إيجابي قياس التدفق الخلوي الدم الكامل البشري PMA Lyse/Fix I أو II أو III تلوين إيجابي لطخة ويسترن مستخلص خلايا A431 البشرية EGF غير قابل للتطبيق غير قابل للتطبيق 44/42 كيلو دالتون
ملاحظات المنتج: تم تخفيف هذا الكاشف مسبقًا للاستخدام بالحجم الموصى به لكل اختبار. نستخدم عادةً 1 × 10^6 خلية في عينة تجريبية حجمها 100 ميكرولتر (اختبار). PE-Cy7 هو فلوروكروم مزدوج يتكون من R-phycoerythrin (PE)، الذي يُثار بضوء طوله الموجي 488 نانومتر ويعمل كمانح للطاقة، مقترنًا بصبغة السيانين Cy7، التي تعمل كمستقبل للطاقة وتُصدر فلورة قصوى عند 780 نانومتر. يتم جمع انبعاث الفلوركروم المزدوج PE-Cy7 في كاشف لأطوال موجية للفلورة تبلغ 750 نانومتر فأكثر. على الرغم من بذل قصارى جهدنا لتقليل التباين بين الدفعات في كفاءة نقل طاقة الفلوركروم، فقد تُلاحظ اختلافات في الانبعاث المتبقي من PE. لذلك، نوصي بإجراء فحوصات تعويض فردية لكل مُقترن PE-Cy7. تم تحسين PE-Cy7 للاستخدام مع ليزر أيون الأرجون الأحادي الذي يُصدر ضوءًا بطول موجي 488 نانومتر، ولا يوجد تداخل يُذكر بين أطياف انبعاث PE-Cy7 وFITC. عند استخدام أجهزة قياس التدفق الخلوي ثنائية الليزر، التي قد تُثير كلاً من PE وCy7 مباشرةً، نوصي باستخدام تعويض الحزمة المتقاطعة أثناء جمع البيانات أو التعويض البرمجي أثناء تحليلها. Cy هي علامة تجارية مسجلة لشركة Amersham Biosciences Limited. يُباع هذا المنتج المُقترن بموجب ترخيص من براءات الاختراع الأمريكية التالية: 5,486,616؛ 5,569,587؛ 5,569,766؛ 5,627,027. يخضع هذا المنتج لحقوق الملكية الفكرية لشركة Amersham Biosciences Corp. وجامعة كارنيجي ميلون، ويتم تصنيعه وبيعه بموجب ترخيص من شركة Amersham Biosciences Corp. هذا المنتج مُرخص للبيع لأغراض البحث العلمي فقط، ولا يُرخص لأي استخدام آخر. إذا كنتَ بحاجة إلى ترخيص تجاري لاستخدام هذا المنتج ولم يكن لديك ترخيص، فيُرجى إعادة هذه المادة، غير مفتوحة، إلى شركة BD Biosciences، 10975 Torreyana Rd، سان دييغو، كاليفورنيا 92121، وسيتم رد أي مبلغ مدفوع مقابلها. يُرجى مراعاة الاحتياطات التالية: قد يؤدي امتصاص الضوء المرئي إلى تغيير كبير في نقل الطاقة الذي يحدث في أي مُقترن فلوري مزدوج؛ لذلك، نوصي باتخاذ احتياطات خاصة (مثل تغليف القوارير أو الأنابيب أو الحوامل بورق الألومنيوم) لمنع تعريض الكواشف المُقترنة، بما في ذلك الخلايا المصبوغة بهذه الكواشف، لإضاءة الغرفة. تحذير: يُنتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية تقع في الولايات المتحدة. للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يُرجى زيارة صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. وللاطلاع على البروتوكولات الفنية، يُرجى زيارة www.bdbiosciences.com/us/s/resources. تنبيه: قد تُظهر بعض مُقترنات APC-Cy7 وPE-Cy7 تغيرات في طيف انبعاثها عند التعرض المطول للفورمالديهايد. إذا تعذر تحليل العينات المُثبتة خلال أربع ساعات، نوصي باستخدام مُثبت BD™ Stabilizing Fixative (رقم المنتج 338036).