BD، 560802، BD Pharmingen™ مزيج من الأجسام المضادة الفلورية ثلاثية الألوان مع خلايا CD4+ البشرية PerCP-Cy™5.5

التفاعل: بشري (تم الإبلاغ عنه)
التطبيق: قياس التدفق الخلوي (تم اختباره أثناء التطوير)
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
RRID: AB_2034027
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على BSA و ≤0.09% أزيد الصوديوم.
الوصف: يحتوي هذا المزيج متعدد الألوان على خليط من الأجسام المضادة لـ CD4 البشري الموسومة بـ PerCP-Cy5.5 (النسيلة SK3) و FITC-Mouse IgG1, κ (MOPC-21) و PE-Mouse IgG1, κ (MOPC-21) و APC-Rat IgG1, κ (R3-34) كضوابط للنمط المتساوي. يُستخدم هذا المزيج من ضوابط النمط المتساوي للأجسام المضادة الفلورية كضابط سلبي للتلوين المناعي الفلوري وتحليل التدفق الخلوي باستخدام مجموعة BD Human Th1/Th2/Th17 Phenotyping Kit Cocktail (المكون 51-9006615 من رقم المنتج 560751). يتألف هذا المزيج من الأجسام المضادة لتحديد النمط الظاهري من: PerCP-Cy5.5 المضاد لـ CD4 البشري، وFITC-IgG1 الفأري، وκ المضاد لـ IFN-γ البشري، وAPC-IgG1 الجرذي، وκ المضاد لـ IL-4 البشري، وPE-IgG1 الفأري، وκ المضاد لـ IL-17 البشري. توفر مجموعة BD Human Th1/Th2/Th17 Phenotyping Kit مزيجًا سهل الاستخدام من أربعة ألوان من الأجسام المضادة الفلورية المتخصصة في CD4 البشري، وIFN-γ (للخلايا Th1)، وIL-4 (للخلايا Th2)، وIL-17A (للخلايا Th17)، مما يُمكّن الباحثين من تحديد وتوصيف طبيعة أنواع الخلايا التائية المساعدة من خلال التلوين المناعي الفلوري متعدد الألوان وتحليل التدفق الخلوي.
التحضير والتخزين: يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد. تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بصبغة PerCP-Cy5.5 في ظل الظروف المثلى، وتم التخلص من الجسم المضاد غير المرتبط وصبغة PerCP-Cy5.5 الحرة. لا يُنصح بتخزين مُقترنات PerCP-Cy5.5 في مخفف غير مُحسَّن، فقد يؤدي ذلك إلى فقدان شدة الإشارة. تم ربط الجسم المضاد بالصبغة في ظل الظروف المثلى، وتم التخلص من الجسم المضاد غير المرتبط والصبغة الحرة.
إجراءات الفحص الموصى بها: صُمم مزيج التحكم متعدد الألوان لنظائر الغلوبولين المناعي للتحكم في التلوين غير النوعي بواسطة الأجسام المضادة الفلورية الموجهة ضد المستضدات الخلوية الموجودة في خلايا CD4+ T المستهدفة، والتي تم تثبيتها باستخدام محلول التثبيت BD Cytofix™ (رقم المنتج 554655) ونفاذيتها باستخدام محلول BD Perm/Wash™ (رقم المنتج 554723)، أو مجموعة محلول التثبيت/النفاذية BD Cytofix/Cytoperm™ (رقم المنتج 554714). قد يكون التلوين غير النوعي بواسطة الأجسام المضادة الفلورية ناتجًا عن ارتباط غير نوعي للغلوبولين المناعي و/أو الفلوركروم بجزيئات خلوية، بما في ذلك مستقبلات Fc للغلوبولين المناعي. بالإضافة إلى ذلك، يمكن استخدام هذا المزيج متعدد الألوان من الأجسام المضادة من نوع Ig كعنصر تحكم سلبي في التلوين لمزيجات الأجسام المضادة الفلورية متعددة الألوان الأخرى التي تحتوي على PerCP-Cy™5.5 المضاد لـ CD4 البشري ممزوجًا بأجسام مضادة من نوع IgG1، κ للفأر مرتبطة بـ FITC وPE، وأجسام مضادة من نوع IgG1، κ للفئران مرتبطة بـ APC. وبذلك، يوفر هذا المزيج عناصر تحكم سلبية للتلوين المناعي الفلوري باستخدام أجسام مضادة فلورية خاصة بعلامات خلوية داخلية أخرى (مثل السيتوكينات، والكيموكينات، و/أو عوامل النسخ) التي تُعبر عنها خلايا CD4+ T المُحضرة باستخدام محلول التثبيت BD Cytofix™ ومحلول النفاذية/الغسل BD Perm/Wash™. راجع بروتوكول تحفيز الخلايا وتثبيتها ونفاذيتها وتلوينها في ورقة البيانات الفنية لمجموعة تحديد النمط الظاهري للخلايا التائية المساعدة البشرية Th1/Th2/Th17 (رقم المنتج 560751). يمكن استخدام خرز BD® CompBeads كبديل لتقييم تداخل الفلورة (التعويض). فعندما ترتبط الأجسام المضادة المقترنة بالفلوركروم بخرز BD® CompBeads، فإنها تُظهر خصائص طيفية مشابهة جدًا للخلايا. مع ذلك، قد توجد اختلافات طفيفة في الانبعاثات الطيفية لبعض الفلوركرومات مقارنةً بالخلايا، مما يؤدي إلى قيم تداخل تختلف عند مقارنتها بالضوابط البيولوجية. يُنصح بشدة، عند استخدام أي كاشف لأول مرة، بمقارنة التداخل على الخلايا وخرز BD® CompBeads للتأكد من ملاءمة خرز BD® CompBeads لتطبيقك الخلوي المحدد.
ملاحظات المنتج: تم تخفيف هذا الكاشف مسبقًا للاستخدام بالحجم الموصى به لكل اختبار. نستخدم عادةً 1 × 10^6 خلية في عينة تجريبية بحجم 100 ميكرولتر (اختبار). تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد في الماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية تقع في الولايات المتحدة. يمكن استخدام هذا الكاشف المقترن بـ APC في أي جهاز قياس التدفق الخلوي مزود بليزر صبغة أو ليزر هيليوم-نيون أو ليزر ثنائي أحمر. يرجى مراعاة الاحتياطات التالية: يمكن أن يؤدي امتصاص الضوء المرئي إلى تغيير كبير في نقل الطاقة الذي يحدث في أي اقتران فلوري مزدوج. لذا، نوصي باتخاذ احتياطات خاصة (مثل تغليف القوارير أو الأنابيب أو الحوامل بورق الألومنيوم) لمنع تعرض الكواشف المقترنة، بما في ذلك الخلايا المصبوغة بهذه الكواشف، لإضاءة الغرفة. للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يُرجى زيارة صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. يمكن استخدام الأجسام المضادة الموسومة بـ PerCP-Cy5.5 مع الكواشف الموسومة بـ FITC وR-PE في أجهزة قياس التدفق الخلوي أحادية الليزر دون تداخل طيفي يُذكر بين فلورة PerCP-Cy5.5 وFITC وR-PE. تم تحسين PerCP-Cy5.5 للاستخدام مع ليزر أيون الأرجون الأحادي الذي يُصدر ضوءًا بطول موجي 488 نانومتر. نظرًا لطيف الامتصاص الواسع للفلوركروم المزدوج، يجب توخي الحذر الشديد عند استخدام أجهزة قياس التدفق الخلوي ثنائية الليزر، والتي قد تُثير كلاً من PerCP وCy5.5™ بشكل مباشر. نوصي باستخدام تعويض الشعاع المتقاطع أثناء جمع البيانات أو التعويض البرمجي أثناء تحليلها. يُرجى مراجعة www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية. يُرجى مراجعة http://regdocs.bd.com للوصول إلى صحائف بيانات السلامة (SDS). Cy هي علامة تجارية لشركة Global Life Sciences Solutions Germany GmbH أو إحدى الشركات التابعة لها التي تُمارس أعمالها تحت اسم Cytiva.
الوصف: مستنسخ: النمط المصلي: معرف EntrezGene
غير متاح : غير متاح : | IgG1، κ،IgG1، κ،IgG1، κ،IgG1، κ : غير متوفر