BD، 561609، لوحة خلايا تي الساذجة/الذاكرة للفئران BD Pharmingen™

التفاعل: الفأر (اختبار مراقبة الجودة)
التطبيق: قياس التدفق الخلوي (يتم اختباره بشكل روتيني)
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
RRID: AB_2869387
الوصف: ملاحظة: تحتوي اللوحة على 50 اختبارًا. يتم توفير مواد إضافية لكل مكون لإجراء 10 اختبارات إضافية لأغراض إعداد الجهاز. تُقدم الأجسام المضادة في محلول مائي مُخفف يحتوي على ألبومين المصل البقري (BSA) ومثبت بروتيني و≤ 0.09% أزيد الصوديوم. أدى التلوين المناعي الفلوري متعدد الألوان، متبوعًا بتحليل وفرز الخلايا باستخدام قياس التدفق الخلوي، إلى توصيف النمط الظاهري والوظيفي لمجموعات فرعية متعددة من الخلايا التائية المحيطية. تم توصيف ثلاث مجموعات فرعية رئيسية من الخلايا التائية بشكل جيد، وهي: الخلايا التائية الساذجة، والخلايا التائية الذاكرة، والخلايا التائية الفعالة. تتميز الخلايا التائية الساذجة في الفئران بنمط ظاهري متجانس نسبيًا على سطح الخلية. وهي تُظهر مستويات عالية من مستقبل التوجيه إلى العقد اللمفاوية المحيطية، CD62L (L-selectin)، ومستويات منخفضة إلى متوسطة من جزيء الالتصاق، CD44 (Pgp-1). تُظهر الخلايا التائية الفعالة مستويات متفاوتة إلى منخفضة من CD62L ومستويات عالية من CD44، بينما تُظهر الخلايا التائية الذاكرة مستويات متفاوتة إلى عالية من CD62L ومستويات عالية من CD44. تحتوي لوحة الخلايا التائية الساذجة/الذاكرة في الفئران على أجسام مضادة فلورية (مُحسَّنة كل منها بـ 5 ميكرولتر لكل اختبار) مُخصصة لمستضدات سطح الخلية: CD44 وCD62L وCD4 وCD3. صُممت هذه اللوحة لتوحيد التلوين متعدد الألوان والتحليل الخلوي التدفقّي لمجموعات الخلايا التائية CD4+ الرئيسية الثلاث التي تنشأ نتيجةً للتطور أو التوسع النسيلي والتمايز الناتج عن التحفيز المستضدي (مثل الاستجابة لمسببات الحساسية أو الأمراض المعدية أو التطعيم). صُممت لوحة الأجسام المضادة الفلورية هذه بمرونة لتسمح للباحث بإضافة أجسام مضادة/مجسات مُقترنة بـ FITC أو Alexa Fluor® 488 أو خلايا تُعبر عن بروتينات فلورية خضراء إلى التحليل الخلوي التدفقّي لمجموعات الخلايا التائية في الفئران.
التحضير والتخزين: يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد. تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بـ R-PE في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة الجسم المضاد غير المرتبط وPE الحر. تم ربط الجسم المضاد بـ PerCP-Cy5.5 في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة الجسم المضاد غير المرتبط وPerCP-Cy5.5 الحر. لا يُنصح بتخزين مُقترنات PerCP-Cy5.5 في مخفف غير مُحسَّن، فقد يؤدي ذلك إلى فقدان شدة الإشارة. تم ربط الجسم المضاد بـ APC في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة الجسم المضاد غير المرتبط وAPC الحر. تم ربط الجسم المضاد بـ APC-Cy7 في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة الجسم المضاد غير المرتبط وAPC-Cy7 الحر.
ملاحظات المنتج: تم تخفيف هذا الكاشف مسبقًا للاستخدام بالحجم الموصى به لكل اختبار. نستخدم عادةً 1 × 10^6 خلية في عينة تجريبية بحجم 100 ميكرولتر (اختبار). مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية تقع في الولايات المتحدة. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد في الماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يرجى الرجوع إلى صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. يرجى مراعاة الاحتياطات التالية: يمكن أن يؤدي امتصاص الضوء المرئي إلى تغيير كبير في نقل الطاقة الذي يحدث في أي مركب فلوركروم مزدوج. لذا، نوصي باتخاذ احتياطات خاصة (مثل تغليف القوارير أو الأنابيب أو الحوامل بورق الألومنيوم) لمنع تعرض الكواشف المقترنة، بما في ذلك الخلايا المصبوغة بها، لإضاءة الغرفة. يمكن استخدام الأجسام المضادة الموسومة بـ PerCP-Cy5.5 مع الكواشف الموسومة بـ FITC وR-PE في أجهزة قياس التدفق الخلوي أحادية الليزر دون تداخل طيفي يُذكر بين تألق PerCP-Cy5.5 وFITC وR-PE. تم تحسين PerCP-Cy5.5 للاستخدام مع ليزر أيون الأرجون أحادي ينبعث منه ضوء بطول موجي 488 نانومتر. نظرًا لطيف الامتصاص الواسع للفلوركروم المزدوج، يجب توخي الحذر الشديد عند استخدام أجهزة قياس التدفق الخلوي ثنائية الليزر، والتي قد تُثير كلاً من PerCP وCy5.5™ بشكل مباشر. نوصي باستخدام تعويض الحزمة المتقاطعة أثناء جمع البيانات أو التعويض البرمجي أثناء تحليلها. يخضع هذا المنتج لحقوق الملكية الفكرية لشركة Amersham Biosciences Corp. وجامعة كارنيجي ميلون، ويتم تصنيعه وبيعه بموجب ترخيص من شركة Amersham Biosciences Corp. هذا المنتج مرخص للبيع لأغراض البحث العلمي فقط، ولا يُسمح باستخدامه لأي غرض آخر. إذا كنت بحاجة إلى ترخيص تجاري لاستخدام هذا المنتج ولم يكن لديك ترخيص، فيُرجى إعادة هذه المادة غير مفتوحة إلى شركة BD Biosciences، 10975 Torreyana Rd، سان دييغو، كاليفورنيا 92121، وسيتم رد أي مبلغ مدفوع مقابلها. يمكن استخدام هذا الكاشف المقترن بـ APC في أي جهاز قياس التدفق الخلوي مزود بليزر صبغي أو ليزر هيليوم-نيون أو ليزر ثنائي أحمر. APC-Cy7 هو فلوروكروم مزدوج يتكون من ألوفيوكوسيانين (APC)، الذي يُثار بواسطة خطوط الليزر بين 595 و647 نانومتر ويعمل كمانح للطاقة، مقترنًا بصبغة السيانين Cy7™، التي تعمل كمستقبل للطاقة وتتألق عند 780 نانومتر. وقد حسّنت شركة BD Biosciences Pharmingen نقل طاقة الفلوركروم في APC-Cy7 إلى أقصى حد، مما أدى إلى زيادة شدة انبعاث الفلورة، وتقليل الانبعاث المتبقي من APC، وتقليل التعويض الإلكتروني المطلوب في أنظمة قياس التدفق الخلوي متعددة الليزر. ملاحظة: على الرغم من بذل قصارى الجهد لتقليل التباين بين الدفعات في الانبعاث المتبقي من APC، يُوصى بشدة باختبار كل دفعة للتحقق من الاختلافات في مقدار التعويض المطلوب، وإجراء فحوصات تحكم فردية للتعويض لكل مُقترن APC-Cy7. يتم جمع انبعاث الفلوركروم المزدوج APC-Cy7 في كاشف لأطوال موجية فلورية تبلغ 750 نانومتر فأكثر. تحذير: قد تُظهر بعض مركبات APC-Cy7 وPE-Cy7 تغيرات في طيف انبعاثها عند تعرضها لفترات طويلة للفورمالديهايد. إذا تعذر تحليل العينات المثبتة خلال أربع ساعات، نوصي باستخدام مُثبِّت BD™ (رقم المنتج 338036). Cy علامة تجارية مسجلة لشركة GE Healthcare. يُرجى مراجعة www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية.
الوصف: الكمية/الحجم: رقم القطعة: معرف EntrezGene
غير متوفر : 60.0 : غير متوفر : غير متوفر