BD، 561825، BD Pharmingen™ PE-Cy™5 مضاد للفئران للهامستر CD3e

الاسم البديل: CD3؛ CD3 إبسيلون؛ Cd3e؛ CD3ε؛ T3e
التفاعل: الفأر (اختبار مراقبة الجودة)
النمط المتماثل: الهامستر الأرمني IgG1، κ
المستضد: مستنسخ الخلايا اللمفاوية التائية السامة للخلايا BM10-37 الخاص بـ H-2Kb
التطبيق: قياس التدفق الخلوي (يتم اختباره بشكل روتيني)
التركيز: 0.2 ملغم/مل
RRID: AB_10896325
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على ≤0.09% من أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد. تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بالصبغة في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة الجسم المضاد غير المرتبط والصبغة الحرة.
إجراءات التحليل الموصى بها: احتياطات إجراءات التحليل الموصى بها لقياس التدفق الخلوي: أُفيد أن صبغات PE-Cy™5 المزدوجة ترتبط ببعض أنواع الخلايا البلعمية والخلايا المحببة البشرية عبر مستقبلات Fc، كما أُفيد أن PE يرتبط بالخلايا اللمفاوية البائية للفئران عبر مستقبلات Fc. يمكن أن يقلل تحضين كريات الدم البيضاء للفئران مسبقًا مع Mouse BD Fc Block™ (جسم مضاد أحادي النسيلة 2.4 G2 نقي مضاد لـ CD16/CD32 للفئران) من الارتباط غير النوعي للكواشف المقترنة بـ PE-Cy™5 بالخلايا البائية للفئران. مع ذلك، لا ينبغي استخدام الكواشف المقترنة بـ PE-Cy™5 لتلوين الخلايا الطحالية لفئران SJL أو NOD أو MRL، حيث أُفيد أن الخلايا اللمفاوية البائية و/أو كريات الدم البيضاء الأخرى تتلون بشكل غير نوعي بغض النظر عن استخدام Mouse BD Fc Block™. يمكن استخدام الكواشف المقترنة بفلوركرومات PE، وPerCP، وPerCP-Cy™5.5، وAPC، وAPC-Cy™7 المزدوجة على خلايا الدم البيضاء من سلالات الفئران هذه. ويمكن استخدام خرز BD® CompBeads كبديل لتقييم تداخل الفلورة (التعويض). فعندما ترتبط الأجسام المضادة المقترنة بالفلوركرومات بخرز BD® CompBeads، فإنها تمتلك خصائص طيفية مشابهة جدًا للخلايا. ومع ذلك، قد توجد اختلافات طفيفة في الانبعاثات الطيفية لبعض الفلوركرومات مقارنةً بالخلايا، مما يؤدي إلى قيم تداخل تختلف عند مقارنتها بالضوابط البيولوجية. يُنصح بشدة، عند استخدام أي كاشف لأول مرة، بمقارنة التداخل على الخلايا وخرز BD® CompBeads للتأكد من ملاءمة خرز BD® CompBeads لتطبيقك الخلوي المحدد.
ملاحظات المنتج: نظرًا لاختلاف التطبيقات، ينبغي على كل باحث معايرة الكاشف للحصول على أفضل النتائج. على الرغم من عدم تحديد أنماط الغلوبولين المناعي للهامستر بدقة، فقد صنّفت شركة BD Biosciences Pharmingen الأجسام المضادة وحيدة النسيلة من نوع IgG للهامستر الأرمني والسوري وفقًا لتفاعلها مع مجموعة من الأجسام المضادة وحيدة النسيلة للفئران المضادة للهامستر من نوع IgG. يمكن الاطلاع على جدول مجموعات IgG للهامستر، بعنوان "تفاعل الأجسام المضادة وحيدة النسيلة للفئران المضادة للهامستر من نوع IgG"، على الرابط التالي: http://www.bdbiosciences.com/documents/hamster_chart_11x17.pdf. تم تحسين PE-Cy5 للاستخدام مع ليزر أيون الأرجون الأحادي الذي يُصدر ضوءًا بطول موجي 488 نانومتر. نظرًا لطيف الامتصاص الواسع لصبغة PE-Cy5 المزدوجة، يجب توخي الحذر عند استخدام أجهزة قياس التدفق الخلوي ثنائية الليزر التي قد تُثير كلاً من PE وCy5™ بشكل مباشر. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. لذا، يُرجى تخفيف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يُرجى زيارة صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. للاطلاع على البروتوكولات الفنية، يُرجى زيارة www.bdbiosciences.com/us/s/resources. يُرجى مراعاة الاحتياطات التالية: قد يؤدي امتصاص الضوء المرئي إلى تغيير كبير في نقل الطاقة في أي مُقترن فلوري مزدوج؛ لذلك، نوصي باتخاذ احتياطات خاصة (مثل تغليف القوارير أو الأنابيب أو الحوامل بورق الألومنيوم) لمنع تعريض الكواشف المُقترنة، بما في ذلك الخلايا المصبوغة بهذه الكواشف، لإضاءة الغرفة. يُعدّ PE-Cy5 فلوروكرومًا مزدوجًا يتكون من R-phycoerythrin (PE)، الذي يُثار بواسطة ضوء ليزر أيون الأرجون بطول موجي 488 نانومتر ويعمل كمانح للطاقة، مقترنًا بصبغة السيانين Cy5، التي تعمل كمستقبل للطاقة وتُصدر فلورة عند 670 نانومتر. وقد حسّنت شركة BD Biosciences Pharmingen نقل طاقة الفلوركروم في PE-Cy5 إلى أقصى حد، مما أدى إلى زيادة شدة انبعاث الفلورة، وتقليل الانبعاث المتبقي من PE، وتقليل التباين بين الدفعات. وقد أشارت التقارير إلى أن فلوروكرومات PE-Cy5 المزدوجة ترتبط ببعض أنواع الخلايا البلعمية والخلايا المحببة البشرية عبر مستقبلات Fc، كما أشارت التقارير إلى أن PE يرتبط بالخلايا اللمفاوية البائية في الفئران عبر مستقبلات Fc أيضًا. يمكن أن يقلل تحضين كريات الدم البيضاء للفئران مسبقًا باستخدام الجسم المضاد أحادي النسيلة 2.4G2 المضاد لـ CD16/CD32 في الفئران، والمُنقّى بواسطة Mouse BD Fc Block™، من الارتباط غير النوعي للكواشف المُقترنة بـ PE-Cy5 بخلايا B في الفئران. مع ذلك، لا يُنصح باستخدام الكواشف المُقترنة بـ PE-Cy5 لتلوين خلايا الطحال في فئران SJL وNOD وMRL، حيث أُبلغ عن تلوين غير نوعي للخلايا اللمفاوية B و/أو كريات الدم البيضاء الأخرى بغض النظر عن استخدام Mouse BD Fc Block™ (يُعتقد أن مُركب CD72c مسؤول عن ارتباط PE-Cy5 في هذه السلالات). يمكن استخدام الكواشف المُقترنة بـ PE وPerCP وPerCP-Cy5.5 وAPC وAPC-Cy7 على كريات الدم البيضاء من هذه السلالات من الفئران. يجب استخدام عينة تحكم متماثلة النمط بنفس تركيز الجسم المضاد المطلوب. يرجى الرجوع إلى http://regdocs.bd.com للاطلاع على صحائف بيانات السلامة (SDS). Cy هي علامة تجارية لشركة Global Life Sciences Solutions Germany GmbH أو إحدى الشركات التابعة لها التي تعمل تحت اسم Cytiva.