BD، 571325، BD Horizon™ RB613 مضاد الفأر Ki-67 البشري

الاسم البديل: المستضد KI-67؛ المستضد Ki67؛ KI-67؛ KI67؛ MKI67
التفاعل: بشري (اختبار مراقبة الجودة)
النمط المصلي: IgG1، κ للفأر BALB/c
المستضد: نوى خلايا خط ليمفوما هودجكين L428 البشري
التطبيق: التلوين داخل الخلايا (قياس التدفق الخلوي) (يتم اختباره بشكل روتيني)
حجم العينة لكل اختبار: 5 ميكرولتر/اختبار
معرف جين Entrez: 4288
RRID: AB_3686369
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على ≤0.09% من أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بالصبغة في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة الصبغة غير المتفاعلة. يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد.
إجراءات التحليل الموصى بها: يمكن استخدام خرز BD® CompBeads كبديل لتقييم التداخل الفلوري (التعويض). عند ارتباط الأجسام المضادة المقترنة بالفلوركروم بخرز BD® CompBeads، فإنها تمتلك خصائص طيفية مشابهة جدًا للخلايا. مع ذلك، قد توجد اختلافات طفيفة في الانبعاثات الطيفية لبعض الفلوركرومات مقارنةً بالخلايا، مما يؤدي إلى قيم تداخل تختلف عند مقارنتها بالضوابط البيولوجية. يُنصح بشدة، عند استخدام أي كاشف لأول مرة، بمقارنة التداخل على الخلايا وخرز BD® CompBeads للتأكد من ملاءمة خرز BD® CompBeads لتطبيقك الخلوي المحدد.
إشعارات المنتج: يُرجى مراجعة www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية. يجب استخدام عنصر تحكم متماثل النمط بنفس تركيز الجسم المضاد المطلوب. يُرجى مراجعة http://regdocs.bd.com للوصول إلى صحائف بيانات السلامة (SDS). CF™ علامة تجارية مسجلة لشركة Biotium, Inc. للاطلاع على براءات الاختراع الأمريكية التي قد تنطبق، يُرجى زيارة bd.com/patents. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. تم تخفيف هذا الكاشف مسبقًا للاستخدام بالحجم الموصى به لكل اختبار. نستخدم عادةً 1 × 10^6 خلية في عينة تجريبية بحجم 100 ميكرولتر (اختبار). للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يُرجى مراجعة صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. لوحظت تأثيرات خلفية خاصة بالمتبرعين البشريين فيما يتعلق بوجود أجسام مضادة لبولي إيثيلين جلايكول (PEG)، والتي تتكون نتيجة لبعض اللقاحات التي تحتوي على PEG، بما في ذلك بعض لقاحات كوفيد-19. نوصي باستخدام محلول التلوين BD Horizon Brilliant™ في تجاربكم للمساعدة في تقليل التأثيرات الخلفية المحتملة. لمزيد من المعلومات، تفضلوا بزيارة https://www.bdbiosciences.com/en-us/support/product-notices. عند استخدام تراكيز عالية من الأجسام المضادة، لوحظ ارتباط خلفي لهذه الصبغة بشظايا خلايا الدم الحمراء الناتجة عن التحلل باستخدام كلوريد الأمونيوم، كما هو الحال مع محلول التحلل BD Pharm Lyse™ (رقم المنتج 555899)، وذلك عند وجود مُقترن الأجسام المضادة أثناء عملية التحلل. قد يتسبب هذا في تلوين غير نوعي للخلايا المستهدفة، مثل خلايا الدم البيضاء، التي ارتبطت بشظايا خلايا الدم الحمراء الناتجة. يمكن التخفيف من هذه الخلفية باتباع أي من الإجراءات التالية: معايرة مُقترن الأجسام المضادة إلى تركيز أقل، أو تثبيت العينات بالفورمالديهايد، أو إزالة كريات الدم الحمراء قبل التلوين (مثل الطرد المركزي المتدرج أو التحلل المسبق بالغسل). لم تُلاحظ هذه الخلفية عند تحلل الخلايا باستخدام محلول BD FACS™ Lysing Solution (رقم المنتج 349202) بعد التلوين. يُرجى مراعاة الاحتياطات التالية: نوصي باتخاذ احتياطات خاصة (مثل تغليف القوارير أو الأنابيب أو الحوامل بورق الألومنيوم) لحماية الكواشف المُقترنة، بما في ذلك الخلايا المُلوّنة بهذه الكواشف، من التعرض لإضاءة الغرفة. يمكن أن يؤثر امتصاص الضوء المرئي بشكل كبير على أطياف الانبعاث والعائد الكمي لمقترنات الفلوركروم المزدوجة. تحتوي الفلوركرومات المزدوجة على كلٍ من مانح الطاقة ومستقبل الطاقة. على الرغم من بذل قصارى الجهد لتقليل التباين بين الدفعات في كفاءة نقل طاقة الفلوركروم، فقد تُلاحظ اختلافات في الانبعاث المتبقي من المُعطي. إضافةً إلى ذلك، قد تُثير أجهزة قياس التدفق الخلوي متعددة الليزر كلاً من فلوروكروم المُعطي والمُستقبل بشكل مباشر. لذا، نوصي لكل مُقترن ترادفي، بالحصول على عينة تحكم فردية مُطابقة أحادية التلوين لإنشاء مصفوفة تعويض أو فصل طيفي.