BD، 550067، BD Pharmingen™ الفأر المؤتلف IL-4

التحضير والتخزين: يُحفظ المنتج في درجة حرارة -80 درجة مئوية قبل الاستخدام أو للتخزين طويل الأمد للمحاليل المركزة. يُذاب المنتج بسرعة ويُرج جيدًا قبل الاستخدام. تجنب تكرار تجميد المنتج وإذابته. لا يحتوي هذا المستحضر على مواد حافظة، لذا يجب التعامل معه في ظروف معقمة.
إجراءات التحليل الموصى بها: عند إذابة المنتج، يُقسّم إنترلوكين-4 الفأري المُعاد تركيبه (رقم المنتج 550067) إلى حصص صغيرة في أنابيب دقيقة من البولي بروبيلين، ويُجمّد عند درجة حرارة -80 درجة مئوية لاستخدامه لاحقًا. بدلاً من ذلك، يمكن تخفيف المنتج في محلول منظم معقم محايد يحتوي على ما لا يقل عن 0.5 - 10 ملغم/مل من بروتين حامل، مثل ألبومين مصل الإنسان أو البقر، ثم يُقسّم إلى حصص صغيرة ويُخزّن عند درجة حرارة -80 درجة مئوية. يُوصى باستخدام تركيزات بروتين حامل تتراوح بين 5 و10 ملغم/مل لاستخدامه كمعيار في اختبار ELISA. أما بالنسبة للاختبارات البيولوجية في المختبر، فيُقترح استخدام تركيزات بروتين حامل تتراوح بين 0.5 و1 ملغم/مل. قد يؤدي عدم إضافة البروتين الحامل أو عدم التخزين في درجات الحرارة المحددة إلى فقدان الفعالية. يجب عدم تخفيف هذا المنتج إلى أقل من 50 ميكروغرام/مل للتخزين طويل الأمد. ينبغي فحص البروتينات الحاملة مسبقًا للتأكد من عدم وجود تأثيرات محتملة في النظام التجريبي لكل باحث. قد تؤثر البروتينات الحاملة سلبًا على نتائج التجارب نظرًا لسميتها، أو ارتفاع مستويات السموم الداخلية فيها، أو احتمالية تثبيطها. معيار ELISA: يُعدّ إنترلوكين-4 الفأري معيارًا كميًا مفيدًا لقياس مستويات بروتين إنترلوكين-4 الفأري في اختبار ELISA ساندويتش خاص بإنترلوكين-4، باستخدام الجسم المضاد 11B11 النقي (رقم المنتج 554434) كجسم مضاد لالتقاط البروتين، والمستنسخ البيوتينيلاتي BVD6-24G2 (رقم المنتج 554390) كجسم مضاد للكشف. وللحصول على منحنيات معيارية خطية، يجب تضمين تخفيفات مضاعفة لمعيار إنترلوكين-4 الفأري من حوالي 2000 إلى 15 بيكوغرام/مل مع كل صفيحة ELISA. يُوصى باستخدام هذا الزوج من اختبارات ELISA بشكل أساسي لقياس السيتوكينات من أنظمة زراعة الخلايا التجريبية، وليس لتحليل عينات المصل أو البلازما. لقياس مستوى إنترلوكين-4 (IL-4) في المصل أو البلازما، تم تصميم مجموعة BD OptEIA™ Mouse IL-4 (رقم المنتج 555232) خصيصًا لهذا الغرض، وهي موصى بها. الفحص الحيوي: يُنصح الباحثون بأن تطبيق الفحص الحيوي لا يُختبر بشكل روتيني لهذه المادة، ويُشجعون بشدة على معايرة هذه المادة وإدراج ضوابط مناسبة في التجارب ذات الصلة. وقد تم الإبلاغ سابقًا عن نطاق نشاط يتراوح بين 0.3 و2.0 × 10^8 وحدة/ملغ، يشمل قيمة ED50 تتراوح بين 50 و300 بيكوغرام/مل، باستخدام خلايا MC/9 المؤشرة للتكاثر مع MTT (بروميد 3-(4،5-ثنائي ميثيل ثيازول-2-يل)-2،5-ثنائي فينيل تترازوليوم)، وتُعرَّف الوحدة بأنها كمية المادة اللازمة لتحفيز استجابة نصف قصوى عند تشبع السيتوكين.
ملاحظات المنتج: نظرًا لاختلاف التطبيقات، ينبغي على كل باحث معايرة الكاشف للحصول على أفضل النتائج. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية تقع في الولايات المتحدة. يُرجى مراجعة الموقع الإلكتروني www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية.