BD، 550068، BD Pharmingen™ عامل تحفيز مستعمرات المحببات والبلاعم البشري المؤتلف

التحضير والتخزين: يُحفظ المنتج في درجة حرارة -80 درجة مئوية قبل الاستخدام أو للتخزين طويل الأمد للمحاليل المركزة. يُذاب المنتج بسرعة ويُرج جيدًا قبل الاستخدام. تجنب تكرار تجميد المنتج وإذابته. لا يحتوي هذا المستحضر على مواد حافظة، لذا يجب التعامل معه في ظروف معقمة.
إجراءات التحليل الموصى بها: عند إذابة المنتج، يُقسّم عامل تحفيز مستعمرات المحببات والبلاعم البشري المؤتلف (رقم المنتج 550068) إلى حصص صغيرة في أنابيب دقيقة من البولي بروبيلين، ويُجمّد عند درجة حرارة -80 درجة مئوية لاستخدامه لاحقًا. بدلاً من ذلك، يمكن تخفيف المنتج في محلول منظم معقم متعادل يحتوي على ما لا يقل عن 0.5-10 ملغم/مل من بروتين حامل، مثل ألبومين مصل الإنسان أو البقر، ثم يُقسّم إلى حصص صغيرة ويُخزّن عند درجة حرارة -80 درجة مئوية. للاستخدام في التحليلات البيولوجية المخبرية، يُوصى بتركيز بروتين حامل يتراوح بين 0.5 و1 ملغم/مل. أما للاستخدام كمعيار في اختبار ELISA، فيُوصى بتركيز بروتين حامل يتراوح بين 5 و10 ملغم/مل. قد يؤدي عدم إضافة البروتين الحامل أو عدم التخزين في درجات الحرارة المحددة إلى فقدان الفعالية. يجب عدم تخفيف المنتج إلى أقل من 5 ميكروغرام/مل للتخزين طويل الأمد. ينبغي فحص البروتينات الحاملة مسبقًا للتأكد من عدم وجود تأثيرات محتملة في النظام التجريبي لكل باحث. قد يكون للبروتينات الحاملة تأثير غير مرغوب فيه على نتائج التجارب بسبب سميتها، أو ارتفاع مستويات السموم الداخلية، أو نشاطها المُثبِّط المحتمل. معيار ELISA: يُمكن استخدام عامل تحفيز مستعمرات المحببات والبلعميات البشري المُعاد تركيبه (GM-CSF) (رقم المنتج 550068) كمعيار كمي لقياس مستويات بروتين GM-CSF البشري باستخدام مقايسة ELISA الساندويتشية، مع استخدام الجسم المضاد BVD2-23B6 المُنقّى (رقم المنتج 554502) كجسم مضاد مُلتقط، والجسم المضاد BVD2-21C11 المُؤشَّر بالبيوتين (رقم المنتج 554505) كجسم مضاد كاشف. وللحصول على منحنيات معيارية خطية، قد يرغب الباحثون في استخدام تخفيفات مُضاعفة من GM-CSF البشري المُعاد تركيبه، تتراوح من 2000 إلى 15 بيكوغرام/مل، لتُضاف إلى كل صفيحة ELISA. لقياس مستوى عامل تحفيز مستعمرات المحببات والبلعميات البشري (GM-CSF) في المصل أو البلازما، يُنصح الباحثون بشدة باستخدام مجموعة BD OptEIA™ Human GM-CSF ELISA (رقم المنتج 555126). فيما يخص التحليل البيولوجي، يُنصح الباحثون بأن تطبيق التحليل البيولوجي لا يُختبر بشكل روتيني لهذا العامل، ويُنصح بشدة بمعايرة هذا العامل وإدراج ضوابط مناسبة في التجارب ذات الصلة. وقد سُجل سابقًا نطاق نشاط يتراوح بين 0.1 و1.0 × 10^9 وحدة/ملغ، يشمل قيمة ED50 تتراوح بين 10 و90 بيكوغرام/مل، باستخدام TF-1 كخلايا مؤشرة للتكاثر، حيث تُعرف الوحدة بأنها كمية العامل اللازمة لتحفيز استجابة نصف قصوى عند تشبع السيتوكين. الحجب: يمكن استخدام عامل تحفيز مستعمرات المحببات والبلاعم البشري المؤتلف (رقم المنتج 550068) كعنصر تحكم للحجب في تحليل التدفق الخلوي عند استخدامه مع BVD2-21C11 المرتبط بـ PE (رقم المنتج 554507). يُنصح الباحثون بأن تطبيق الحجب لا يُختبر بشكل روتيني لهذه المادة. وقد وصف كل من سي. بروسين ودي. ميتكالف بالتفصيل تقنيات تلوين السيتوكينات داخل الخلايا واستخدام عناصر التحكم للحجب.
ملاحظات المنتج: نظرًا لاختلاف التطبيقات، ينبغي على كل باحث معايرة الكاشف للحصول على أفضل النتائج. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية تقع في الولايات المتحدة. يُرجى مراجعة الموقع الإلكتروني www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية.