BD، 550071، BD Pharmingen™ إنترلوكين-6 بشري مُعاد التركيب

التحضير والتخزين: يُحفظ المنتج في درجة حرارة -80 درجة مئوية قبل الاستخدام أو للتخزين طويل الأمد للمحاليل المركزة. يُذاب المنتج بسرعة ويُرج جيدًا قبل الاستخدام. تجنب تكرار تجميد المنتج وإذابته. لا يحتوي هذا المستحضر على مواد حافظة، لذا يجب التعامل معه في ظروف معقمة.
إجراءات التحليل الموصى بها: عند إذابة المنتج، يُقسّم إنترلوكين-6 البشري المؤتلف (رقم المنتج 550071) إلى حصص صغيرة في أنابيب دقيقة من البولي بروبيلين، ويُجمّد عند درجة حرارة -80 درجة مئوية لاستخدامه لاحقًا. بدلاً من ذلك، يمكن تخفيف المنتج في محلول منظم معقم متعادل يحتوي على ما لا يقل عن 0.5 - 10 ملغم/مل من بروتين حامل، مثل الألبومين البشري أو البقري، ثم يُقسّم إلى حصص صغيرة ويُخزّن عند درجة حرارة -80 درجة مئوية. للاستخدام في التحليلات البيولوجية المخبرية، يُوصى باستخدام تركيزات بروتين حامل تتراوح بين 0.5 و1.0 ملغم/مل. أما للاستخدام كمعيار في اختبار ELISA، فيُوصى باستخدام تركيزات بروتين حامل تتراوح بين 5 و10 ملغم/مل. قد يؤدي عدم إضافة البروتين الحامل أو عدم التخزين في درجات الحرارة المحددة إلى فقدان الفعالية. يجب فحص البروتينات الحامل مسبقًا للتأكد من عدم وجود تأثيرات محتملة في النظام التجريبي لكل باحث. قد تؤثر البروتينات الحاملة سلبًا على نتائج التجارب نظرًا لسميتها، أو ارتفاع مستويات السموم الداخلية فيها، أو احتمالية تثبيطها. معيار ELISA: يُمكن استخدام الإنترلوكين-6 البشري المؤتلف (رقم المنتج 550071) كمعيار كمي لقياس مستويات بروتين الإنترلوكين-6 البشري باستخدام مقايسة ELISA الساندويتشية، وذلك باستخدام الجسم المضاد MQ2-13A5 النقي (رقم المنتج 554543) كجسم مضاد لالتقاط البروتين، والجسم المضاد MQ2-39C3 المُؤشَّر بالبيوتين (رقم المنتج 554546) كجسم مضاد للكشف. وللحصول على منحنيات معيارية خطية، يُنصح الباحثون باستخدام تخفيفات مضاعفة من الإنترلوكين-6 البشري المؤتلف، تتراوح بين 2000 و15 بيكوغرام/مل، تُضاف إلى كل صفيحة ELISA. لقياس مستوى إنترلوكين-6 البشري في المصل أو البلازما، يُنصح الباحثون بشدة باستخدام مجموعة BD OptEIA™ Human IL-6 ELISA (رقم المنتج 555220) أو مجموعة BD OptEIA™ Human IL-6 ELISA Kit II (رقم المنتج 550799). فيما يخص التحليل البيولوجي، يُنصح الباحثون بأن تطبيق التحليل البيولوجي لا يُختبر بشكل روتيني لهذه المادة، ويُنصح بشدة بمعايرة هذه المادة وإدراج ضوابط مناسبة في التجارب ذات الصلة. وقد سُجّل سابقًا نطاق نشاط يتراوح بين 0.5 و3.0 × 10^8 وحدة/ملغ، يشمل قيمة ED50 تتراوح بين 30 و200 بيكوغرام/مل، باستخدام TF-1 كخلايا مؤشرة للتكاثر، حيث تُعرّف الوحدة بأنها كمية المادة اللازمة لتحفيز استجابة نصف قصوى عند تشبع السيتوكين. الحجب: يمكن استخدام الإنترلوكين-6 البشري المؤتلف (رقم المنتج 550071) كعنصر تحكم حجب في تحليل التدفق الخلوي عند استخدامه مع الأجسام المضادة MQ2-13A5 المقترنة بـ FITC أو PE (رقم المنتج 554544 أو 554545)، أو الأجسام المضادة MQ2-6A3 المقترنة بـ FITC أو PE (رقم المنتج 554696 أو 554697). يُنصح الباحثون بعدم إجراء اختبار روتيني لهذا المنتج عند استخدامه كعنصر تحكم حجب. وقد وصف كل من سي. بروسين ودي. ميتكالف تقنيات تلوين السيتوكينات داخل الخلايا واستخدام عناصر التحكم الحجب بالتفصيل.
ملاحظات المنتج: نظرًا لاختلاف التطبيقات، ينبغي على كل باحث معايرة الكاشف للحصول على أفضل النتائج. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية تقع في الولايات المتحدة. يُرجى مراجعة الموقع الإلكتروني www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية.