BD، 554618، BD Pharmingen™ عامل نخر الورم البشري المؤتلف

التحضير والتخزين: يُحفظ المنتج في درجة حرارة -80 درجة مئوية قبل الاستخدام أو للتخزين طويل الأمد للمحاليل المركزة. يُذاب المنتج بسرعة ويُرج جيدًا قبل الاستخدام. تجنب تكرار تجميد المنتج وإذابته. لا يحتوي هذا المستحضر على مواد حافظة، لذا يجب التعامل معه في ظروف معقمة.
إجراءات التحليل الموصى بها: عند إذابة التجميد الأولي، يجب تقسيم عامل نخر الورم البشري المؤتلف (رقم المنتج 554618) إلى حصص في أنابيب دقيقة من البولي بروبيلين وتجميدها عند درجة حرارة -80 درجة مئوية لاستخدامها لاحقًا. بدلاً من ذلك، يمكن تخفيف المنتج في محلول منظم معقم متعادل يحتوي على ما لا يقل عن 0.5-10 ملغم/مل من البروتين الحامل، مثل الألبومين البشري أو البقري، وتقسيمه إلى حصص وتخزينه عند درجة حرارة -80 درجة مئوية. للاستخدام في التحليلات البيولوجية المخبرية، يُوصى بتركيزات بروتين حامل ≥ 1 ملغم/مل. للاستخدام كمعيار في اختبار ELISA، يُوصى بتركيزات بروتين حامل تتراوح بين 5 و10 ملغم/مل. قد يؤدي عدم إضافة البروتين الحامل أو عدم التخزين في درجات الحرارة المحددة إلى فقدان الفعالية. يجب فحص البروتينات الحامل مسبقًا للتأكد من عدم وجود تأثيرات محتملة في النظام التجريبي لكل باحث. قد تؤثر البروتينات الحاملة سلبًا على نتائج التجارب نظرًا لسميتها، أو ارتفاع مستويات السموم الداخلية فيها، أو احتمالية تثبيطها. معيار ELISA: يُمكن استخدام بروتين TNF البشري المؤتلف (رقم المنتج 554618) كمعيار كمي لقياس مستويات بروتين TNF البشري باستخدام مقايسة ELISA الساندويتشية، وذلك باستخدام الجسم المضاد MAb1 النقي (رقم المنتج 551220) كجسم مضاد لالتقاط البروتين، والجسم المضاد MAb11 المُؤشَّر بالبيوتين (رقم المنتج 554511) كجسم مضاد للكشف. وللحصول على منحنيات معيارية خطية، يُنصح الباحثون باستخدام تخفيفات مضاعفة لمعيار TNF البشري المؤتلف، تتراوح بين 2000 و15 بيكوغرام/مل، لإضافتها إلى كل صفيحة ELISA. لقياس عامل نخر الورم البشري (TNF) في المصل أو البلازما، يُنصح الباحثون بشدة باستخدام مجموعة BD OptEIA™ Human TNF ELISA (رقم المنتج 555212) أو مجموعة BD OptEIA™ Human TNF ELISA Kit II (رقم المنتج 550610). فيما يخص التحليل البيولوجي، يُنصح الباحثون بأن تطبيق التحليل البيولوجي لا يُختبر بشكل روتيني لهذه المادة، ويُنصح بشدة بمعايرة هذه المادة وإدراج ضوابط مناسبة في التجارب ذات الصلة. وقد سُجّل سابقًا نطاق نشاط يتراوح بين 0.05 و2.0 × 10^9 وحدة/ملغ، يشمل قيمة ED50 تتراوح بين 5 و200 بيكوغرام/مل، باستخدام خلايا L929 كخلايا مؤشرة في اختبار تحلل الخلايا، حيث تُعرّف الوحدة بأنها كمية المادة اللازمة لتحفيز استجابة نصف قصوى عند تشبع السيتوكين.
ملاحظات المنتج: نظرًا لاختلاف التطبيقات، ينبغي على كل باحث معايرة الكاشف للحصول على أفضل النتائج. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية تقع في الولايات المتحدة. يُرجى مراجعة الموقع الإلكتروني www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية.