BD، 555052، BD Pharmingen™ مضاد TGF-β1 نقي للفئران والبشر والخنازير

التفاعل: بشري (اختبار مراقبة الجودة)، بشري، فأر، خنزير (تم اختباره أثناء التطوير)
النمط المصلي: IgG2a، κ للفئران
المستضد: TGF-β1 الفأري المؤتلف
التطبيق: اختبار ELISA (يتم اختباره بشكل روتيني)، اختبار Western blot (تم الإبلاغ عنه)
التركيز: 0.5 ملغم/مل
RRID: AB_395673
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على ≤0.09% من أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي بواسطة كروماتوغرافيا التقارب. يُحفظ غير مخفف عند درجة حرارة 4 درجات مئوية.
إجراءات التحليل الموصى بها: 1. اختبار ELISA: يُستخدم الجسم المضاد A75-2 النقي كجسم مضاد لالتقاط TGF-β1 في اختبار ELISA الساندويتش لقياس TGF-β1 في الفئران أو البشر أو الخنازير، إلى جانب الجسم المضاد A75-3 المضاد لـ TGF-β1 والموسوم بالبيوتين (رقم المنتج 555053) كجسم مضاد للكشف. يجب معايرة الجسم المضاد النقي بتركيز يتراوح بين 1.0 و4.0 ميكروغرام/مل لتحديد التركيز الأمثل لاختبار ELISA. للاطلاع على المنهجية التفصيلية، يُرجى مراجعة قسم البروتوكولات أو فصل ELISA في دليل وظائف المناعة، وكلاهما متوفر على الموقع الإلكتروني www.bdbiosciences.com. يُوصى باستخدام هذا الزوج من اختبارات ELISA لقياس السيتوكينات من أنظمة زراعة الخلايا التجريبية، ولا يُوصى باستخدامه لاختبار عينات المصل أو البلازما. لقياس TGF-β1 في المصل أو البلازما، تم تصميم مجموعة BD OptEIA™ Human TGF-β1 ELISA (رقم المنتج 559119) خصيصًا لهذا الغرض، وهي موصى بها. هام: قبل إجراء اختبار ELISA لقياس مستويات بروتين TGF-β1، يجب معالجة عينات السوائل البيولوجية بالتحميض. يرد وصف البروتوكول أدناه. بالنسبة لعينات المصل، يُخفف المصل أولًا في محلول فوسفات ملحي (PBS) بنسبة 1:5 (20 ميكرولتر مصل + 80 ميكرولتر PBS)، ثم يُضاف حمض الهيدروكلوريك 1N بنسبة 1:25 لضبط الرقم الهيدروجيني إلى 3 (أي 4 ميكرولتر من حمض الهيدروكلوريك 1N لكل 100 ميكرولتر من المصل المخفف). يمكن معالجة السائل الطافي للخلايا دون تخفيف بمحلول حمض الهيدروكلوريك 1N بنسبة 1:25 لضبط درجة الحموضة إلى 3 (أي 4 ميكرولتر من حمض الهيدروكلوريك 1N لكل 100 ميكرولتر من السائل الطافي). تُحضن العينات المحمضة لمدة 60 دقيقة عند 4 درجات مئوية (أو يمكن معالجتها في درجة حرارة الغرفة لمدة 15 دقيقة). بعد التحضين، تُعادل العينات بمعالجة كل عينة بمحلول هيدروكسيد الصوديوم 1N بنسبة 1:25، ثم تُختبر فورًا أو تُحفظ عند -70 درجة مئوية لحين الاختبار. ملاحظة: لا يظهر زوج ELISA هذا أي تفاعل متبادل مع أي من السيتوكينات التي تم اختبارها (على سبيل المثال، الماوس IL-1β، IL-2، IL-3، IL-4، IL-6، IL-7، IL-9، IL-10، IL-12 p70، IL-15، GM-CSF، IFN-γ، MCP-1، TCA-3، TNF؛ IL-1α البشري، IL-1β، IL-2، IL-3، IL-4، IL-6، IL-7، IL-8، IL9، IL-10، IL-11، IL-12 p70، IL-12 p40، IL-13، IL-15، G-CSF، GM-CSF، IFN-γ، ليمفوتكتين، MCP-1، العملية التشاورية المتعددة الأطراف-2, MIP-1α، MIP-1β، NT-3، PDGF-AA، sCD23، SCF، TNF، LT-α، VEGF؛ فئران IL-2، IL-4، IL-6، IL-10، GM-CSF، IFN-γ، TNF).
ملاحظات المنتج: نظرًا لاختلاف التطبيقات، ينبغي على كل باحث معايرة الكاشف للحصول على أفضل النتائج. يُرجى الرجوع إلى www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي.